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范汉东: 作品数：14 被引量：46H指数：3; 供职机构：杭州师范大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江西省科技支撑计划项目江西省科学院国家级预研项目更多>>; 相关领域：生物学医药卫生农业科学环境科学与工程更多>>

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药渣纤维素降解菌的筛选及酶活测定被引量：5: 2012年; 以药渣和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)为碳源,通过平板初筛及多种酶活综合测定复筛,从深层封土、牛粪堆肥等样品中筛选到8株纤维素降解菌,其中菌株JX9的酶活最高,酶系组成最合理,其Cx、Cb、C1和FPA分别达到82.41、5.71、15.52和7.64 U/mL。; 郭建军范汉东黄晓萍杨一兵黄臣臣; 关键词：药渣纤维素降解菌纤维素酶

转反义trxs基因小麦籽粒发育过程中基因表达差异: 2011年; 为探讨反义trxs基因在转基因抗穗发芽小麦中的作用机制,以转反义trxs基因和非转基因小麦开花后5~30 d的籽粒为材料,采用mRNA差异显示技术分析了转基因与非转基因小麦在籽粒形成过程中的基因表达差异。结果表明,在籽粒发育过程中,转基因与非转基因小麦存在明显的基因表达差异,差异可归纳为转基因增强型、转基因减弱型、转基因特异型和沉默型4种类型,而且特异型表达明显高于增强型和减弱型;差异条带数随种子成熟度的增加而不断增多,到花后第25天达到最高（77条）,然后略有下降,且在胚乳中的差异明显高于胚中的。; 郭建军范汉东王娜尹钧任江萍杨一兵; 关键词：小麦反义TRXS基因 MRNA差异显示

减蛋综合征病毒纤维蛋白主要抗原结构域原核表达及抗原性鉴定被引量：3: 2012年; 利用生物信息学软件对减蛋综合征病毒(EDSV)AV-127纤维蛋白进行抗原特性分析,人工合成融合基因Knobs,将其克隆到原核表达载体pET28a的多克隆位点,构建原核表达载体pET28a-Knobs,将其转化到感受态细胞Rosetta(DE3)pLysS中,经30℃、1.0 mmol.L-1IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀。结果显示:目的蛋白以包涵体形式存在,蛋白分子质量约为26.0 ku;Western blot结果表明目的蛋白具有较好的抗原活性。本试验为进一步研究EDSV抗原结构域的免疫原性以及减蛋综合征基因工程疫苗的开发奠定了基础。; 郭建军范汉东杨一兵; 关键词：减蛋综合征病毒结构域原核表达抗原

新城疫病毒F48E9株F-HN蛋白融合基因在毕赤酵母中的表达被引量：1: 2011年; 利用重叠PCR技术拼接新城疫病毒F蛋白基因和HN蛋白基因,并将构建好的融合基因克隆到载体pET28a,经测序后融合基因插入表达载体pPIC9K中,在启动子AOXⅠ和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白F-HN。重组质粒pPIC9K-F-HN经SacⅠ线性化后,电击转化毕赤酵母GS115,经G418筛选得到转化子。PCR扩增鉴定后,用甲醇诱导表达,SDS-PAGE分析结果表明,目的蛋白为分泌性表达,分子量约为86.5 ku;Western-blot结果表明融合蛋白具有良好的免疫反应性,为下一步研究高效亚单位基因工程苗奠定基础。; 郭建军范汉东杨一兵罗成; 关键词：新城疫病毒毕赤酵母

人白细胞介素24蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活检测: 2011年; 构建人白细胞介素24蛋白酵母双杂交诱饵载体,并检测其自激活作用。采用PCR技术特异性扩增人白细胞介素24基因IL-24,将其克隆入酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7中,通过PCR扩增、限制性酶切鉴定及序列测定,获得质粒pGBKT7-IL-24。采用PEG/L iAc法将其转入酵母AH109中,经表型筛选检测其自激活作用,同时利用对照质粒组筛选组氨酸(H is)本底表达抑制剂3-AT的合适工作浓度。结果获得了无自激活作用的诱饵载体pGBKT7-IL-24。确定了组氨酸(H is)本底表达抑制剂3-AT的最佳工作浓度。结论:诱饵质粒pGBKT7-IL-24可以用于酵母双杂交实验,为进一步运用酵母双杂交技术在人类组织cDNA文库中筛选与之相互作用的蛋白奠定了基础。; 黄晓萍郭建军范汉东杨一兵; 关键词：白细胞介素24 双杂交系统技术自激活作用

半夏中一种抗癌蛋白的纯化及其抗癌活性研究被引量：14: 2012年; 经硫酸铵分级沉淀、疏水层析和DEAE离子交换层析3种方法从新鲜半夏块茎中分离纯化出一种具抗肿瘤作用的蛋白,命名为APPT,用MTT法、载瘤小鼠实验和流式细胞术研究其抗肿瘤作用.结果显示:APPT是一种分子量大小为12.09ku的糖蛋白,其含糖量为3.22%;MTT实验结果表明APPT对Sarcoma 180细胞有一定的细胞毒性,同时载瘤小鼠实验证明APPT能明显抑制载瘤小鼠中肿瘤的生长,当APPT处理剂量为0.85mg/kg、2.30mg/kg及3.25mg/kg体重时,其抑制率分别为15.6%、32.1%、36.2%;流式细胞仪结果显示APPT不能诱导Sarcoma 180细胞凋亡,却能抑制Sarcoma 180细胞DNA的合成起始并将大量细胞同步于G0/G1期.表明APPT是半夏总蛋白中具有抑癌活性的成分之一,APPT通过抑制肿瘤细胞DNA合成的起始进而阻止肿瘤细胞增殖而不是诱导细胞凋亡.; 范汉东王雪蔡永君郭建军杨一兵邹国林; 关键词：半夏抗肿瘤活性分离纯化

新城疫病毒F48E9株HN蛋白抗原结构域区段的原核表达被引量：2: 2010年; 利用生物软件对新城疫病毒F48E9株的血凝素神经氨酸酶(HN)蛋白进行抗原特性分析,选定172～570位氨基酸区域作为多肽表位候选区域。以pUC18-F-HN为模板,设计引物通过PCR扩增,获得HN抗原结构域基因片段,SaⅠl、NoⅠt双酶切定向克隆到原核表达载体pET28a,获得重组质粒分别命名为pET28a-HNa。重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞BL21,筛选出阳性克隆,诱导表达并取产物进行分析。结果表明,HN抗原结构域基因片段获得了融合表达,Western-blotting分析证实表达产物HN与NDV阳性血清具有免疫反应性。为进一步研究HN蛋白抗原结构域的免疫原性以及HN蛋白与F蛋白相互作用奠定了基础。; 郭建军范汉东杨一兵; 关键词：新城疫病毒结构域原核表达

制药废弃物生物降解及资源化安全利用技术: 杨一兵郑国华范汉东郭建军袁林涂祖新黄晓萍贺伟华; 该项目属于农业生物工程领域农业发酵工程方向。主要科技内容：通过野外分离筛选出降解木质素出发菌株9株、降解纤维素出发菌株8株和降解药物残留菌株4株，对其诱变选育及其组合培养，用PCR-DGGE技术和传统平板培养法结合，...; 关键词：; 关键词：微生物肥料

掌叶半夏胰蛋白酶抑制剂的分离纯化及其性质被引量：2: 2010年; 经硫酸铵分级沉淀、热处理、DEAE等方法从掌叶半夏中分离出一种不含糖的具有抗虫作用的胰蛋白酶抑制剂(Pinellia pedatisecta trypsin in hibitor,PPTI),SDS-PAGE电泳与反相液相色谱(RT-HPLC)检测证明分离得到一纯蛋白,质谱(LC-MS)测定其相对分子质量为20596.09.荧光光谱分析研究结果显示:PPTI在pH低于9、温度低于60℃时,PPTI的三级结构相对稳定;抗虫活性结果显示有较好的抗芽虫作用.; 范汉东郭建军杨一兵邹国林; 关键词：掌叶半夏胰蛋白酶抑制剂

可在大肠杆菌中实现重组子筛选的乳酸菌分泌型载体及其构建方法、应用: 本发明属于生物工程领域。本发明公开了一种可在大肠杆菌中实现重组子筛选的乳酸菌分泌型载体，其包括氨苄抗性基因序列大肠杆菌复制子ori、大肠杆菌组成型启动子P32、乳酸菌分泌信号肽USP45、多克隆位点及大肠杆菌不耐热性肠毒...; 范汉东党伟陆洪良; 文献传递

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