苏瑞波
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 供职机构：农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程更多>>
- 发文基金：国家粮食丰产科技工程国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 农作物抗旱育种新进展被引量：6
- 2012年
- 概述了通过常规育种、分子标记辅助育种(MAB)和遗传工程(转基因)增强农作物的抗旱性方面的研究进展,并探讨了3种抗旱育种方法的前景。
- 苏瑞波王四清马庆
- 关键词：抗旱性常规育种分子育种基因工程QTL
- 用核基质结合区(SAR)序列提高小麦最小表达框转基因表达的稳定性被引量：1
- 2014年
- 采用最小表达框技术转化植物可以规避由骨架序列引起的安全风险。核基质结合区序列SAR（scaffold attachment region）可作为边界元件与核基质结合阻挡转基因片段邻近染色质区的作用与影响,提高外源基因稳定性。本研究在最小表达框序列两端添加SAR序列,提高小麦最小表达框转基因表达的稳定性,提高转化基因的表达效率。首先,以GUS为目的基因构建带有SAR序列的最小表达框,以科农199为受体进行基因枪转化,同时以不加SAR序列的最小表达框片段为对照。带有SAR序列的最小表达框片段共轰击857个幼胚,T0代获得40株再生植株,PCR检测到16株阳性植株,转化效率为1.87%;对这16个阳性单株进行GUS染色,15株显色;从来自4个T0阳性植株的18个T1代植株中随机选取18株进行PCR和GUS染色检测,有15株表现为阳性。不带SAR序列的对照片段轰击1012个幼胚,获得31株再生植株,其中5株PCR阳性,转化效率0.49%,这5个阳性植株中仅2株为GUS染色阳性;来自于5个T0代PCR阳性株系的10个T1代单株中没有发现PCR和GUS染色阳性株。表明SAR序列可以提高基因枪转基因效率和目的基因表达稳定性。为了创制抗旱转基因小麦,以来自大豆的抗旱相关转录因子基因GmDREB3为目的基因,Bar基因为筛选标记基因,转化受体小麦济麦22,共轰击6045个幼胚,获得再生植株130株,PCR检测阳性植株30株,转化效率为0.50%;随机选取6株PCR阳性植株进行RT-PCR分析,其中5株可检测到外源基因的转录。进一步对这5株RT-PCR阳性植株插入片段完整性进行分析,其中4株插入片段基本完整。通过real-time PCR分析,发现T0代6个RT-PCR阳性植株的外源GmDREB3的拷贝数为1~3个。以上结果证明,在最小表达框两端加上SAR序列后可以提高小麦最小表达框转基因表达的稳定性。
- 苏瑞波陈明徐兆师李连城马庆马有志
- 关键词：基因枪转化法
- 利用改进的最小表达框技术获得抗旱转基因小麦
- 因基因枪共转化法具有无宿主限制和不受季节时间的限制、简单易操作等优点，目前基因枪共转化法约占所有转基因作物65％以上。采用最小表达框技术转化植物，只导入了包含启动子、编码序列及终止子的表达框序列，不含载体骨架序列，规避了...
- 苏瑞波
- 关键词：基因枪转化法
- 文献传递
