芮琪
- 作品数：19 被引量：69H指数：5
- 供职机构：南京农业大学生命科学学院生物化学与分子生物学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学文化科学农业科学更多>>
- 生物化学实验课程的研究型教学改革实践
- 生物化学实验是一门重要的专业基础课,其教学过程是培养创新型人才的重要训练途径。本文介绍了我们如何在现有条件的基础上,因地制宜地在教学过程中引入研究型教学的思路、手段和方法,将原来独立的多个相关小实验设计成连续性大实验,同...
- 芮琪胡琼英汪瑾徐朗莱沈文飚
- 关键词：高等教育生物化学技术研究型教学教学改革
- 文献传递
- 丝氨酸内肽酶在黄瓜叶片衰老中的作用被引量：10
- 2006年
- 采用丝氨酸内肽酶抑制剂和植物生长调节剂处理离体黄瓜叶片,研究了黄瓜叶片暗诱导衰老过程中丝氨酸内肽酶的作用。结果表明,6-BA50μmol/L与丝氨酸内肽酶抑制剂AEBSF能抑制叶片内肽酶活性的升高,延缓蛋白质降解,而ABA50μmol/L则促进了内肽酶活性的升高;其作用效果与AEBSF相反。活性电泳结果显示,黄瓜叶片中检测到6条内肽酶同工酶,其中4条(CEP2、3、4、6)为丝氨酸类型内肽酶,而ABA使丝氨酸内肽酶CEP2、3、4、6的活性明显增强,提示了丝氨酸类型内肽酶在黄瓜叶片衰老过程中具有重要作用。
- 张鹏王飞张列峰芮琪徐朗莱
- 关键词：黄瓜叶片衰老蛋白质降解脱落酸
- 拟南芥DNA去甲基化基因RLL4的定位与功能分析
- 2017年
- 该研究以携带2×35S:LUC报告基因的转基因拟南芥Col-LUC为亲本系,将其种子进行甲基磺酸乙酯(EMS)诱变,在M2代筛选出1株低荧光的候选突变体,命名为rll4(reduced LUC luminescence 4)。遗传学分析表明,rll4突变位点包含1个核基因隐性突变。图位克隆技术定位结果显示,突变基因的位点位于4号染色体2个分子标记CL417-B10M1和CL418-B2M2之间,这2个分子标记分别位于F20D10和F20M13BAC(bacterial artificial chromosome)克隆。酶切PCR(Chop-PCR)结果显示,rll4突变体中基因组DNA的部分位点甲基化显著升高。反转录PCR(RT-PCR)结果显示,rll4突变体中ROS1(REPRESSOR OF SILENCING 1)的表达量并没有明显变化,而一些RNA介导的DNA甲基化(RdDM)过程靶位点的基因表达量有明显下降。研究表明,RLL4位点很可能参与了拟南芥DNA去甲基化过程。
- 郭倩丽罗俊鹏芮琪腊红桂
- 关键词：拟南芥
- 小麦叶片衰老期间内肽酶同工酶的变化被引量：4
- 2010年
- 以扬麦158为试验材料,采用改进的以血红蛋白为底物的梯度凝胶电泳结合内肽酶同工酶染色方法,探讨在自然衰老和暗诱导衰老条件下,叶片内肽酶(EP)活性和同工酶酶谱的变化模式。结果显示小麦叶片暗诱导衰老和自然衰老过程中,内肽酶活力均先上升后下降;在叶片暗诱导衰老过程中先后出现4种新的内肽酶同工酶,而在自然衰老过程中先后出现5种新的内肽酶同工酶,其中EP3只在自然衰老末期才能检测到。表明自然衰老与暗诱导衰老过程中的内肽酶同工酶谱变化基本相似,因此暗诱导衰老可以作为研究叶片自然衰老期间内肽酶的一种模式。
- 芮琪张鹏董汉松徐朗莱
- 关键词：内肽酶同工酶叶片衰老小麦
- 暗诱导衰老小麦叶片内一种耐热蛋白水解酶的分离及其生化特性鉴定被引量：3
- 2007年
- 采用30%~50%饱和度的硫酸铵沉淀、凝胶层析脱盐及聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳,再通过直接切胶后用回收槽电洗脱回收的方法,从暗诱导衰老小麦叶片中分离得到了1种耐热的蛋白水解酶。该酶具有良好的热稳定性,且表现出相当宽的pH稳定范围。该酶的最适温度为50℃,最适pH为8。分离得到的酶液在0-60℃处理1 h后,酶活性无明显变化,70℃处理1 h后仍有部分活性。酸性蛋白酶抑制剂、金属蛋白酶抑制剂和半胱氨酸蛋白酶抑制剂都不能抑制该蛋白水解酶的活性,但丝氨酸蛋白酶抑制剂能部分抑制该酶的活性。
- 王晓媛陈晨赵江哲芮琪张列峰汪瑾徐朗莱
- 关键词：小麦叶片蛋白水解酶热稳定性生化特性
- 生命科学大四学生综合性实验课程体系的实践被引量：1
- 2015年
- 介绍了南京农业大学生命科学学院大四学生必修课程——综合性实验三大模块,即植物学大实验、微生物大实验、生物大分子分离和鉴定的方式内容以及考核方式。通过系列实验的锻炼,提高了学生综合运用各种知识和实验方法解决复杂问题的能力,为学生进入研究生阶段的学习和科研奠定了良好的基础。
- 汪瑾卢亚萍芮琪
- 关键词：研究型教学
- 小麦叶片老化期间的内肽酶与H_2O_2的关系(英文)被引量：10
- 2001年
- 研究了H2 O2 和蛋白水解酶在小麦 (TriticumaestivumL .cv.Yanmai15 8)叶片老化过程中的关系。小麦叶片老化期间 ,H2 O2 含量高的叶片中内肽酶活力也高。老化后期 ,内源H2 O2 迅速累积 ,内肽酶活力迅速上升 ;通过内肽酶同工酶电泳可检测到新增一种活力较强的内肽酶。用外源H2 O2 处理全展旗叶的内肽酶粗提液 ,随着H2 O2 浓度的升高 ,内肽酶活力先上升后下降。
- 张志刚芮琪徐朗莱
- 关键词：内肽酶H2O2小麦过氧化氢
- 分子生物学实验课程中自行设计实验的实践被引量：6
- 2012年
- 自行设计实验报告是学校分子生物学实验课程考核体系的一个重要内容,由学生以小组的形式分工合作完成。报告设计的实验方案在全班进行讨论和修改,最后确定一套切实可行的实验方案。学生参与自行设计实验的每一个环节,包括试剂的选择与订购、器皿耗材的准备、试剂的配制、实验的操作和结果的处理分析等等。该实验增加了实验教学的主动性、创新性、系统性和高效性。这一研究过程拓宽了学生的知识面、提高了学生解决问题的能力,同时积累了科研工作的经验,为进入研究生阶段的工作奠定基础。
- 卢亚萍汪瑾张炜芮琪
- 关键词：分子生物学实验研究型教学自主创新
- 小麦叶片暗诱导衰老期间内肽酶的特性(英文)被引量：5
- 2003年
- 研究了小麦 (Triticum aestivum L. cv. Yangmai 158)叶片暗诱导衰老期间内肽酶同工酶的变化及其部分生化特性,发现叶片衰老期间,内肽酶活性升高,同时出现5种新的内肽酶同工酶(EP1、EP2、EP4、EP5、EP6)。6-苄氨基嘌呤(6-BA)处理能延缓这些同工酶的出现,而脱落酸(ABA)处理则加速它们的表达。衰老期间小麦叶片内的6种内肽酶同工酶(EP1-EP6)中的EP1、EP2、EP4、EP5、EP6呈现活性的pH及温度范围较窄,而EP3有活性的pH范围和温度范围均较宽,且EP3在嫩叶、老叶中均有活性。另外,EP3、EP5、EP6对热不太敏感。蛋白酶抑制剂实验表明,EP1、EP2 是需金属离子的半胱氨酸型内肽酶,EP4是丝氨酸型内肽酶。
- 芮琪徐朗莱
- 关键词：内肽酶同工酶小麦酶活性
- 小麦叶片中1种降解Rubisco大亚基的蛋白酶鉴定被引量：1
- 2015年
- [目的]探明小麦叶片衰老过程中1种降解1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶（ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase,Rubisco）大亚基蛋白酶的生化特性。[方法]通过天然梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳后切胶回收的方法获得Rubisco全酶,采用离子交换层析、非完全变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和切胶回收蛋白等方法分离目的蛋白酶,并采用含明胶的聚丙烯酰胺凝胶电泳研究其生化特性（主要是最适p H、最适温度、热稳定性、蛋白酶类型等）。[结果]切胶回收的Rubisco全酶样品中存在降解大亚基的蛋白酶。在Mono-Q离子交换层析条件下,该蛋白酶与Rubisco不易分离。利用非完全变性十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离出这种降解大亚基的蛋白酶;在聚丙烯酰胺凝胶中,该蛋白酶相对分子质量大于大亚基相对分子质量,位置在大亚基上方,其余部分没有检测到蛋白酶活性。该酶的最适温度为60℃;最适p H值为7.0,在p H 5.0~8.0均表现出较高的活性;该酶热稳定性一般,在50℃以上几乎完全丧失其活性;丝氨酸蛋白酶抑制剂AEBSF[4-（2-Aminoethyl）benzenesulfonyl fluoride hydrochloride]可以完全抑制蛋白酶活性,金属蛋白酶抑制剂1,10-phenanthroline可以部分抑制该蛋白酶的活性,酸性蛋白酶抑制剂pepstatin、半胱氨酸蛋白酶抑制剂E-64[transepoxysuccinyl-L-leucylamido（4-guanidino）butane]、金属蛋白酶抑制剂EDTA（ethylene diamine tetraacetic acid）和EGTA[ethylenebis（oxyethylenenitrilo）tetraacetic acid]以及丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF（phenylmethanesulfonyl fluoride）不抑制该蛋白酶的活性。[结论]在切胶回收的Rubisco全酶中发现了1种可以降解Rubisco大亚基的蛋白酶,其可能是1种需要金属离子的丝氨酸型蛋白酶。
- 吴蔚陈晓张鹏郑斯旻吴文郭金贺徐朗莱芮琪
- 关键词：蛋白水解酶小麦叶片衰老理化特性
