胡慧中
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 供职机构：清华大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金清华大学基础研究基金资助国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人热休克蛋白70基因的克隆、表达及鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的克隆人热休克蛋白70(HSP70)基因,构建其原核高效表达载体。方法将PCR扩增的HSP70基因克隆到原核高效表达载体pET-28b中,转化大肠杆菌JM109。挑选阳性克隆,提取质粒pE28b70F,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达目标蛋白。结果在大肠杆菌中成功表达了HSP70,表达量约占细菌总蛋白的22·3%,其中可溶性目标蛋白占上清总蛋白的12%。Westernblot表明该目标蛋白具有与鼠抗人HSP70单抗特异结合的抗原活性。通过Ni2+-NTA亲和柱,从1L诱导产物中纯化出约1520mg重组蛋白,纯度在80%以上。结论已成功表达HSP70,为进一步研究其生物学功能和作用机制奠定了基础。
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- 关键词：热休克蛋白基因克隆原核表达
- 含CpG基元的SARS冠状病毒S-1基因片段DNA疫苗的构建及动物试验
- 2005年
- 设计了3对含不同数目CpG基元(CpGmotifs)的引物,用SARS冠状病毒(SARSCoV)S1基因片段作为靶基因,通过PCR扩增出目的片段,插入真核表达载体pVAX1中。用电击法把构建好的不同质粒注入相应组BALB/c小鼠的股四头肌,2周后再加强免疫一次。每周分别测定血清IgG1和IgG2a抗体水平。结果,免疫组IgG1和IgG2a抗体浓度以及IgG2a与IgG1的比值均显著增加(P<0.001)。表明所构建的SARSCoVS基因S1片段的真核表达质粒可诱导小鼠产生很强的免疫反应。
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- 关键词：SARS冠状病毒CPG基元DNA疫苗IGG2AIGG1
- 应用RP-HPLC测定自微乳化油相制剂中胰岛素的含量及预处理方法的研究
- 2007年
- 目的:选择适当的样品预处理方法,应用反相高效液相色谱建立自微乳化油相制剂中胰岛素的检测方法。方法:通过酸解、萃取以及表面活性剂破乳法对自微乳化油相制剂样品进行预处理,并优化预处理方法以提高油相制剂中胰岛素的回收率。结果:经过适当的样品预处理,2种脂肪酸成分不同的油相制剂中的胰岛素回收率均高于95%。结论:本方法操作简便,结果准确,重复性好,能满足自微乳化油相制剂中胰岛素检测的需要。
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- 关键词：胰岛素
