胡忠 作品数:17 被引量:161 H指数:7 供职机构: 中国科学院昆明植物研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 云南省自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
商陆种子抗病毒蛋白的0.25nm分辨率晶体结构 被引量:5 1998年 在高蛋白浓度 ( 1 0 0mg/mL)和高温 ( 33℃ )条件下得到了美洲商陆种子抗病毒蛋白的单晶 ,具有较高的衍射分辨率 .用分子置换法在 0 .2 5nm分辨率确定了该蛋白晶体结构的初始模型 ,经分子动力学修正技术精化 ,晶体学R因子为 1 8.1 5 % ,键长键角对理想值的均方差分别为 0 .0 0 1 6nm和 2 .0 4° .通过与另外两种商陆抗病毒蛋白结构的比较 ,发现连接第 5条 β链段和第 2个α螺旋的环套区位于活性中心附近 ,并且为序列和结构的多变区 ,其上分布着可能的活性残基 。 曾宗浩 金雷 李宏民 胡忠 王大成关键词:商陆 抗病毒蛋白 晶体结构 种子 分辨率 乌天麻Gastrodianin基因的鉴定及其在天麻发育进程中的表达 被引量:6 2007年 基于相似性克隆策略和RT-PCR,从兰科植物乌天麻(Gastrodia elataf.glauca)球茎克隆得到两个新的天麻抗真菌蛋白基因,命名为gastrodianin-4A(ga4A)和gastrodianin-4B(ga4B),并首次用Northern杂交研究了该基因在植物不同部位的转录表达。结果表明,天麻个体的不同部位只转录表达同一种Gastrodianin基因,纯化自球茎的Gastrodianin蛋白质的肽质量指纹谱与推导的Ga4A和Ga4B成熟蛋白的氨基酸序列相吻合;Northern杂交证明天麻的地上器官Gastrodianin基因转录表达量远远高于地下球茎,而次生球茎皮层组织的表达量比中柱和整个营繁茎的都高一些。天麻球茎Gastrodianin的外周表达模式可能是天麻在地下抵御蜜环菌(Armillaria mellea Karst)入侵球茎皮层内部的防卫机制之一,但该基因在天麻地上部分的高丰度表达暗示Gastrodianin可能蕴藏其它生理功能。 王浩鑫 杨涛 曾英 胡忠关键词:天麻抗真菌蛋白 兰科 蜜环菌 杜仲皮中抗真菌蛋白的分离和特性研究 被引量:58 1994年 从杜仲(EucommiaulmoidesOliv)皮中分离纯化到一种新的抗真菌蛋白(EucommiaAntifungalProtein),简称EAFP。将切碎的杜仲树皮用NaCl溶液在组织捣碎器中高速匀浆提取,经硫酸铁沉淀、CM一cellulose离子交换层析和Bio一gel一p一10凝胶层析纯化。如此纯化而得的EAFP在SDS-PAGE胶片上显示一条分子量为5.0kD的单一带。反相HPLC显示4样品是纯的。等电聚焦电泳测得其pI值大于11.0。经还原和氨酰羧甲基化处理,用HPLC层析证明EAFP为单链。用酚一硫酸法未测出其含糖。EAFP是简单单链蛋白。氨基酸组成分析结果表明它宫含Arg、Cys和Gly,不含Met,Lys,Trp,His和Phe。未经热变性或SDS处理的EAFP与考马氏亮蓝试剂不发生显色反应。手工Edman降解法测得N一端3个氨基酸残基的顺序为Gly一Asp一Ala。用羧肽酶A和B酶解EAFP测得其C一末端为Val.0.3mg/mL蛋白明显抑制木霉、小麦赤霉菌、烟草黑茎病菌和棉花枯萎病菌菌丝的生长。蛋白在沸水中保温30min活性不变。 刘小烛 胡忠 李英 杨俊波 李炳钧关键词:抗真菌蛋白 天麻发育进程中Gastrodianin基因的时空表达研究 基于相似性克隆策略和RT-PCR,从乌天麻(G.elata Bl.f.glauca S.chow)球茎克隆得到两个新的天麻抗真菌蛋白基因并命名为gastrodianin-4A(ga4A)和gastrodianin-4B(... 王浩鑫 杨涛 曾英 胡忠关键词:蜜环菌 文献传递 一种治疗外伤创面药物的制备方法 一种治疗外伤创面药物的制备方法。本发明是用蟑螂作原料,从中提取药用有效成份制备药物的方法,该方法由虫体干燥粉碎、乙醇浸泡提取、减压浓缩、脱脂过滤等步骤制得水溶性浸膏,然后按比例加入分散剂,防腐剂和蒸馏水配制而成。该方法工... 李树楠 胡忠文献传递 商陆毒蛋白与蓖麻毒蛋白A链作为免疫毒素“弹头”的比较研究 被引量:4 1992年 免疫毒素系由具有导向能力的载体和具有杀伤能力的毒素或药物偶联形成的复合物。单克隆抗体的问世使载休的高度特异性得到解决,选择合适的“弹头” 褚嘉佑 朱晓梅 张和君 胡忠 杨爱德 王辨明 郭仁关键词:免疫毒素 全文增补中 珠子参抗真菌糖蛋白的研究 被引量:10 1992年 珠子参(Panax japonicus C.A.Meyer var. major(Burk)Wu et Feng)根茎用盐溶液提取,透析,两次离子交换层析,凝胶过滤,分离到两个蛋白质(ZP-1,ZP-2),其中,ZP-2能明显地抑制绿色木霉、麦类赤霉菌丝的生长。经SDS-PAGE及Sephadex G-75过滤,测得ZP-2的分子量分别为55和66kD,是由分子量非常相近的两个亚基组成。PAS反应表明ZP-2是一个糖蛋白,经GLC分析,中性糖含量为28.91%,由葡萄糖、甘露糖、岩藻糖、木糖、鼠李糖和半乳糖组成;糖醛酸含量经Bitter的方法测得为22.76%。用OPA柱前衍生氨基酸高压液相色谱法测定ZP-2的部分氨基酸组成,结果表明此蛋白质高含酸性氨基酸。ZP-2对人红血细胞无凝集活性,也无几丁酶和β-1,3-葡聚糖酶活性。 杜良成 王世林 李英 胡运乾 胡忠关键词:珠子参 糖蛋白 一种从杜仲中提取的抗真菌多肽及其提取方法 本发明提供一种从植物杜仲中筛选出的抗真菌多肽EAFP及其提取方法。EAFP是一种新的、具有较高抗菌活性的、特别是对稻瘟病菌有较高抗菌活性的单链简单的抗真菌多肽。 刘小烛 胡忠文献传递 一种治疗外伤创面药物的制备方法 一种治疗外伤创面药物的制备方法。本方法是用蟑螂作原料,从中提取药用有效成份制备药物的方法,该方法由虫体干燥粉碎、乙醇浸泡提取、减压浓缩、脱脂过滤等步骤制得水溶性浸膏,然后按比例加入分散剂,防腐剂和蒸馏水配制而成。该法工艺... 李树楠 胡忠天麻抗真菌蛋白GAFP-Ⅰ的一级结构和cDNA克隆 被引量:20 1999年 天麻抗真菌蛋白GAFP-Ⅰ是从天麻(GastrodiaelataBl)顶生球茎分离的14kD蛋白,它能强烈抑制腐生真菌菌丝的生长,在天麻限制和防止密环菌(Armilariamelea)侵染球茎的防卫机制中起重要作用。本文报告GAFP-Ⅰ的一级结构和cDNA克隆的核苷酸序列。首先测得N-末端7个氨基酸序列为SDRLNSG-用以合成一个简并引物,由天麻营养球茎提取RNA,通过3′-RACE技术扩增到一个600bp的cDNA片段,直接克隆到pGE-T载体中测定核苷酸序列。根据cDNA核苷酸序列和用羧肽酶A测得GAFP-Ⅰ的C-末端为-ASG,确认该cDNA含有429bp编码区,它编码一条129个氨基酸的GAFP-I和14个氨基酸的C-末端扩展肽。同时,分离和纯化GAFP-Ⅰ经过羟胺裂解和α-糜乳胰蛋白酶消化产生的肽段,经自动Edman降解程序测出它们的氨基酸序列。结果表明,由此测出的GAFP-Ⅰ氨基酸序列和由cDNA核苷酸序列推导出的序列984%一致。GAFP-Ⅰ由129个氨基酸组成,富含Asn(19)、Gly(14),29和52位间有一对双硫键,计算分子量为13958Da。GAFP-Ⅰ与雪花莲(Galan? 胡忠 黄清藻 刘小烛 杨俊波关键词:天麻 抗真菌蛋白 CDNA 克隆