肖薇
- 作品数：3 被引量：23H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：卫生部临床学科重点项目国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Calcein-AM和Annexin V在流式细胞术检测早期细胞凋亡的敏感性比较
- 2006年
- 目的比较Calcein-AM与Annexin V用于流式细胞术检测活细胞早期凋亡时的敏感性,建立新的检测细胞早期凋亡的方法。方法将人类急性T淋巴细胞白血病细胞株(Molt-4)经喜树碱(CPT)、紫外线(UV)诱导后,分别采用Calcein-AM及异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(Annexin V)染色,然后用流式细胞仪分析凋亡率,通过比较诱导后不同时间点的凋亡率来分析Calcein-AM和Annexin V对于检测细胞早期凋亡的敏感性。结果在喜树碱诱导模型中,加药后2 h即可用Calcein-AM检测到明显的细胞凋亡,而3 h后才能用Annexin V检测到;在紫外线诱导模型中,照射后1 h即可用Calcein-AM检测到明显的细胞凋亡,而要在2 h后才能用Annexin V检测到。结论Calcein-AM用于检测活细胞早期凋亡比Annexin V更为敏感,是一种稳定、可靠、灵敏度高并且较为经济的检测细胞早期凋亡的活细胞染料。
- 王佳冯永东陶德定李小兰肖薇刘双又余从年龚建平
- 关键词：流式细胞术凋亡膜联蛋白V
- MOLT-4细胞凋亡不同阶段活性Caspase-3在细胞内的空间位相移行被引量：16
- 2004年
- 背景与目的:在细胞凋亡过程中,位于细胞浆中的Caspase-3酶原是由什么方式引起细胞形态序贯性变化的问题还没有完全阐明,本研究旨在探讨放射诱导的MOLT-4细胞凋亡不同阶段活性Caspase-3在细胞内的空间分布、细胞形态的变化以及二者的关系。方法:10GyX射线照射诱导MOLT-4细胞。亚G1峰法和凝胶电泳检测凋亡细胞中DNA变化。膜联蛋白V标记细胞膜,带荧光素的Caspase抑制剂(fluorochromeinhibitorofcaspase,FLICA)标记活性Caspase,并用流式细胞仪检测。应用共聚焦显微镜观察MOLT-4细胞凋亡形态及活性Caspase-3在细胞内的分布。免疫印迹检测Caspase-3的表达。结果:X射线10Gy照射后,MOLT-4细胞出现细胞膜翻转、凋亡小体等典型的细胞凋亡特征。其凋亡过程中Caspase-3激活,4h其活性明显增加。在细胞内,活性Caspase-3由靠近细胞膜的胞浆面向细胞浆、胞核移行,与细胞凋亡的形态学变化相吻合,在时间上早于细胞膜翻转。结论:X线照射后MOLT-4细胞中Caspase-3激活,且其亚细胞分布与细胞凋亡的形态学变化相吻合。活性Caspase-3在凋亡细胞中空间位相的移行是放射诱导的细胞凋亡机制之一。
- 冯永东谢大兴覃吉超钟以胜李小兰肖薇吴剑宏陶德定胡俊波龚建平
- 关键词：细胞凋亡CASPASE-3细胞内定位激光扫描共聚焦显微镜MOLT-4
- 流式细胞术检测胱氡肽酶3原位激活与两种检测细胞凋亡方法的比较性研究被引量：7
- 2004年
- 目的 用一种新的荧光染色技术 (FLICA/PI)检测放射诱导T淋巴细胞白血病细胞(MOLT 4 )的细胞凋亡过程中胱氡肽酶 3(Caspase 3)原位激活及探讨其活性变化特点 ,并与亚G1峰和膜联蛋白V/碘化丙啶 (AnnexinV/PI)检测细胞凋亡方法的灵敏度进行比较性评价。方法 以放射诱导的MOLT 4细胞凋亡为模型 ,用荧光标记的Caspase 3抑制剂 (FLICA)标记原位激活的Caspase 3,然后 ,用流式细胞仪定量检测并分析其活性变化 ;同时 ,用亚G1峰法和AnnexinV/PI检测细胞凋亡。结果 FLICA/PI检测到的Caspase 3激活 ,在照射后 2h开始升高 (5 84 % ) ,而AnnexinV/PI在 4h时检测到的凋亡率为 5 35 % ,FLICA/PI比AnnexinV/PI可提前 2h检测到细胞凋亡 ,Caspase 3活性的出现早于细胞膜反转。FLICA阳性率在照射后 4h暴发性增高至 12 39% ,显示有时间效应。两种检测方法均比亚G1峰法敏感 ,但AnnexinV/PI检测的凋亡率低于FLICA/PI法。结论 X 射线能诱导MOLT 4细胞凋亡 ,并有明显的时间效应关系 ;Caspase 3激活有阈值效应 ,是照射后细胞发生凋亡过程中早于形态学变化的检测指标。用Caspase 3活性检测细胞凋亡更直接 ,更敏感。
- 冯永东陶德定谢大兴钟以胜李小兰肖薇余源吴剑宏胡俊波龚建平
- 关键词：细胞凋亡CASPASE3凋亡率肽酶MOLT-4
