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H9N2亚型禽流感病毒M1基因的克隆及其原核表达被引量：1: 2014年; 为克隆H9N2亚型禽流感病毒M1基因并研究其原核表达产物的反应原性,从H9N2亚型禽流感病毒中提取病毒基因组RNA,采用RT-PCR方法克隆了M1全长基因。把M1基因克隆至pMD18-T载体中之后进行测序。M1基因亚克隆至pET-28a(+)表达载体中,构建重组表达质粒pET-28a-M1。该重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)并经IPTG诱导表达,对表达产物进行纯化和鉴定。测序分析结果表明,本研究克隆的M1基因与数株甲型流感病毒的M1基因的核苷酸同源性为89.7%~99.1%。SDS-PAGE分析表明,构建的重组蛋白以可溶性形式存在。Western-blot鉴定结果表明,它具有良好的反应原性。M1的成功表达为进一步研制新型流感疫苗奠定了基础。; 石少华杨文涛胡静涛王倩黄海斌许云飞赵亮石春卫王春凤杨桂连; 关键词：禽流感病毒克隆原核表达

重组鹅源新城疫病毒HN基因乳酸菌的构建被引量：4: 2015年; 构建了重组鹅源新城疫病毒(NDV)HN基因乳酸杆菌后,将HN基因亚克隆至可在乳酸杆菌和大肠杆菌中穿梭表达的载体pSIP409中。此后,将构建的阳性重组体pSIP409-HN采用电转化方法转化至植物乳酸杆菌感受态细胞中。利用SDS-PAGE和Western-blot检测HN蛋白的表达情况。为明确HN蛋白的表达位置,利用流式细胞术检测了重组菌细胞是否有HN蛋白的表达。结果显示,克隆了NDV HN基因,构建了阳性重组质粒pSIP409-HN;鉴定结果表明,阳性重组质粒pSIP409-HN被成功电转化至乳酸杆菌感受态细胞中。SDS-PAGE和Western-blot分析结果表明,构建的重组菌可以表达与HN蛋白已知大小相符的条带(66ku),且该蛋白能与NDV阳性抗体反应,具有反应原性。流式细胞术检测结果表明,HN蛋白被表达于菌体细胞表面,可作为黏膜疫苗的候选抗原。; 胡静涛郭衍冰杨文涛石少华王春凤丁壮; 关键词：新城疫病毒乳酸杆菌

Toll样配体的免疫作用及在免疫佐剂中的应用: 2014年; 有效的新型疫苗的研究，不仅依赖于新的疫苗种类和设计策略，还要求疫苗制品中不可缺少的组分--佐剂的发展和创新。从最初的传统佐剂铝盐佐剂到弗氏佐剂再到目前多种类型的佐剂，佐剂类型正在不断发展。佐剂能通过一系列机制加强抗原提呈能力和疫苗的免疫效果，所以成功的疫苗必须要联合佐剂的使用。; 杨文涛石少华王春凤杨桂连; 关键词：免疫佐剂免疫作用 TOLL 配体抗原提呈能力

广谱型抗禽流感重组乳酸菌及其制备方法: 本发明公开了一种广谱型抗禽流感重组乳酸菌及其制备方法，利用禽流感NP和M1的抗原保守性以及乳杆菌作为抗原递呈载体的安全性，应用重组DNA技术构建了表达禽流感NP和M...; 王春凤杨桂连杨文涛石少华赵亮; 文献传递

通用型抗禽流感重组乳酸菌及其制备方法: 本发明公开了一种通用型抗禽流感重组乳酸菌及其制备方法，利用禽流感血凝素HA2的抗原保守性以及乳杆菌作为抗原递呈载体的安全性，应用分子生物学技术构建了表达禽流感HA2基因的重组表达载体...; 王春凤杨桂连杨文涛赵亮石少华刘玉颖; 文献传递

巴西蘑菇活性成分的免疫调节作用研究进展被引量：6: 2015年; 在人类社会生产生活中，由于真菌具有其独特的香味、鲜嫩的口感、丰富的生物活性成分、重要的营养价值和药用价值而被大量种植和广泛应用［1］。巴西蘑菇是一种生长在巴西、秘鲁等地的一种珍贵的食、药用真菌，属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、蘑菇科、蘑菇属，在日本称为“姬松茸”，在中国也称为“粱金菇”。自1893年发现以来，被世界各地大量栽培种植，其中巴西种植量最大。巴西蘑菇不但味道鲜美，营养丰富，而且含有多种矿物质、维生素、蛋白质、低脂肪、多糖和甾醇等营养或生物活性物质。传统上，人们将巴西蘑菇作为常规食物摄入体内，且早期许多学者都热衷于研究巴西蘑菇活性成分的提取纯化及成分分析，而其活性成分的作用研究较少以至于没有更好地利用其药用价值。现在的观点认为巴西蘑菇的生物活性成分可以有效激活和调节机体免疫系统［2］。研究表明巴西蘑菇多糖可通过刺激免疫细胞发挥抗肿瘤作用，初步推测可能是激活巨噬细胞产生肿瘤坏死因子发挥抗肿瘤效应［3，4］。最近，研究发现低分子量巴西蘑菇多糖可以增强树突状细胞（Dendritic cells，DC）Th1型免疫反应，可能具有免疫佐剂的调节作用［5］，也有研究证实适当浓度的巴西蘑菇多糖能促进DC分化成熟，增强DC的抗肿瘤作用［6］。此外，巴西蘑菇及其提取物还有降血脂、护肝、抗菌和抗氧化等作用［7-10］。; 石少华杨文涛王春凤李玉; 关键词：生物活性成分免疫调节作用抗肿瘤作用生物活性物质机体免疫系统

流感病毒感染诱导T细胞免疫应答的研究进展被引量：4: 2015年; A型流感病毒(Influenza A virus,IAV)属正粘病毒科流感病毒属,是造成人畜呼吸道感染的重要病原微生物。随着研究的不断深入,国内外不断发现肺脏效应CD4+T细胞、CD8+T细胞和调节性T细胞利用多重效应和调节机制控制IAV感染。本文通过查阅流感病毒介导T细胞免疫反应的有关文献,主要对IAV逃逸T细胞免疫的策略、宿主感染IAV过程中T细胞亚群和固有免疫样T细胞产生的免疫反应等方面展开综述,为国内相关领域的研究提供理论依据。; 杨文涛石少华杨桂连王春凤; 关键词：流感病毒 T细胞免疫反应

树突状细胞介导重组HA-DC乳酸菌对H9N2型禽流感保护作用研究: 禽流感病毒感染呈世界范围分布,给养禽业造成巨大的经济损失,严重危害我国养禽业的发展。H9N2亚型禽流感病毒(AIV)是当今禽流感流行的主要型别之一,自我国有感染人事件以后,H9N2亚型流感病毒更引起了人们的关注。本研究...; 石少华; 关键词：H9N2亚型禽流感病毒乳酸菌 HA蛋白

肠上皮细胞的免疫调节作用研究进展被引量：1: 2015年; 在胃肠道里由专门上皮细胞构成一种屏障,它不仅有助消化且能显著影响黏膜免疫系统的发育和功能。这类肠上皮细胞（Intestinal epithelial cells,IECs）能够感知微生物并对其刺激做出反应以加强其屏障功能,还参与调节从耐受到抗病原体等适应性免疫反应。然而,如果上皮细胞或免疫细胞内环境稳定被打破,微生物定植就具有感染和引起炎症的可能。; 刘玉颖石少华杨文涛杨桂连王春凤; 关键词：肠上皮细胞免疫调节作用黏膜免疫系统适应性免疫免疫细胞巨噬细胞

H9N2亚型禽流感病毒HA-DCpep融合基因重组乳杆菌的构建及免疫原性分析被引量：3: 2014年; 为了构建HA-DCpep融合基因重组乳杆菌并检测其表达产物的免疫原性,以pSIP409-HA质粒为模板,采用PCR方法将HA基因和DCpep基因融合。将目的基因克隆至pGEM-T载体中,进行测序。再将阳性基因亚克隆至大肠杆菌-乳杆菌穿梭表达载体pSIP409中,电转化入植物乳杆菌NC8中,经SppIP诱导后对表达产物进行Western-blot分析。结果显示,重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep的裂解物中出现大小约为64ku的反应条带,大小与预期结果相符,表明重组融合蛋白具有良好的反应原性。重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep口服免疫SPF雏鸡后,在免疫后第14天可被检出特异性HI抗体,28d后达到高峰。结果表明,应用重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep免疫雏鸡能刺激机体产生特异性体液免疫应答反应,这为研制预防禽流感的重组乳杆菌口服制剂奠定了基础。; 石少华杨文涛叶丽萍黄海斌蔡若鹏李雨宸闫晓月王春凤杨桂连; 关键词：禽流感病毒免疫原性

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石少华

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