田芳
- 作品数：47 被引量：159H指数：9
- 供职机构：郑州大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部“211”工程国家自然科学基金河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 核基质结合区提高稳定整合的CAT报告基因在NIH3T3细胞中的表达被引量：9
- 2005年
- 通过PCR从人基因组扩增β珠蛋白核基质结合区(matrix attachment region,MAR)及β干扰素MAR,正向及反向克隆至pCAT3载体SV40启动子的上游,分别检测瞬时及稳定表达的情况下MAR在NIH3T3细胞内对CAT报告基因的影响情况。结果显示:瞬时表达情况下,反向及正向插入的MAR均不能提高CAT基因的表达;稳定整合的情况下,插入的β珠蛋白MAR可使CAT报告基因表达水平提高8倍,β干扰素MAR提高3倍,反向及正向插入的MAR没有明显的差别。这表明MAR能在一定程度上提高外源基因的表达水平,并且不同的MAR对外源基因表达的影响存在差异,MAR的插入方向对外源基因的表达水平没有明显的作用。
- 王天云田芳张胜力侯卫红王建民薛乐勋
- 关键词：核基质结合区NIH3T3细胞基因表达基因沉默转基因
- 课前实际、课中实用、课后实效——病理生理学基于慕课实施线上翻转课堂教学改革初探
- 2021年
- 为进一步落实教育部关于一流本科课程建设的实施意见,在在线教学中实现金课“两性一度”的要求,我们创新实施了检验康复专业学生线上翻转课堂教学改革。通过课前教师网上集体备课讨论翻转课堂和混合式教学方式、准备学生自学资料;课堂上的思政教育、线上实施翻转课堂;课后科学的过程性评价,丰富了教学手段、增加了教学互动,真正让“让学生忙起来”、“让教学活起来”,为将病理生理学课程打造成具有高阶性、创新性、挑战度的线上线下混合式“金课”奠定基础。
- 张晓艳杨婉景袁宝银路静田芳
- 姜黄素与p65siRNA促进食管鳞癌细胞凋亡的比较研究被引量：2
- 2011年
- 背景与目的:活化的核转录因子-kappa B(nuclear factor-kappa B,NF-κB)信号通路在多种肿瘤的发生、发展中起着重要的作用,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关基因的表达。目前其在食管鳞癌中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨p65siRNA和姜黄素能否通过阻断NF-κB信号通路,促进食管鳞癌细胞的凋亡及增强对化疗药的敏感性,并将两种方法加以比较。方法:Western blot检测p65siRNA转染到食管鳞癌细胞EC9706和Eca109中p65蛋白的表达;EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素(50μmol/L)后检测pIκBα蛋白的表达。转染p65siRNA的食管鳞癌细胞,单独或联合使用氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)治疗72 h;EC9706和Eca109细胞中加入姜黄素培养72 h,或联合使用姜黄素和5-FU培养72 h,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。显微镜下观察各组食管鳞癌细胞形态学特性的改变。结果:Western blot结果显示,转染p65siRNA的EC9706和Eca109细胞中,p65蛋白的表达水平下调,而非靶向蛋白MAPK的表达无影响;姜黄素组中,EC9706和Eca109细胞中pIκBα蛋白的表达水平随着姜黄素作用时间的延长逐渐下降。将siRNA转染组与姜黄素组所引起的食管鳞癌细胞的凋亡及联合应用化疗药所引起的细胞凋亡加以比较,结果发现,与siRNA转染组相比,单独使用姜黄素可引起细胞凋亡数增加(P<0.05);但姜黄素与5-FU联合应用时,可明显提高肿瘤细胞对化疗药的敏感性,凋亡和坏死的细胞均显著增加(P<0.05)。结论:p65siRNA和姜黄素都可以通过阻断NF-κB信号通路,促进食管鳞癌细胞的凋亡及增强对5-FU的敏感性;RNA干扰虽特异,但用于临床还需要一段时间。姜黄素不良反应小,有望成为治疗食管癌的辅助用药。
- 田芳柴玉荣江亚南张晓艳
- 关键词：食管鳞癌姜黄素核转录因子-ΚBIΚBΑSIRNA
- HeLa细胞系中核转录因子-κB与Bcl-2的表达被引量：2
- 2009年
- 目的:分析宫颈鳞癌HeLa229细胞中核转录因子(NF-κB)的激活状态及其与抗凋亡基因Bcl-2表达的相关性。方法:采用免疫细胞化学法和Western Blot法检测宫颈鳞癌HeLa229细胞中NF-κB亚单位p50和p65及其下游调控基因Bcl-2的蛋白表达,RT-PCR法检测宫颈鳞癌HeLa229细胞中p50和p65 mRNA的表达。EMSA法检测HeLa229细胞核中NF-κB与DNA的结合活性。结果:宫颈鳞癌HeLa229细胞质中NF-κB的亚单位p50和p65均有表达,p50/p65在细胞核中具有较高的DNA结合活性。RT-PCR结果表明,p50和p65的mRNA在细胞质中也存在表达,并且在HeLa229细胞中也检测到Bcl-2蛋白的表达。结论:在宫颈鳞癌HeLa229细胞中存在有NF-κB及其下游基因Bcl-2的表达,提示激活的NF-κB信号通路可能在宫颈鳞癌发生发展及抗凋亡中起重要作用。
- 田卫红田芳许培荣刘红涛薛乐勋
- 关键词：核转录因子-ΚBBCL-2
- 重组小鼠canstatin N端片段对鸡胚新生血管生成的抑制作用(英文)被引量：2
- 2004年
- 为了研究重组小鼠canstatinN端片段的体内抗血管生成活性 ,通过PCR扩增小鼠canstatinN端片段cDNA ,定向克隆于原核表达载体 pET30a (+)中 ,构建小鼠canstatinN端片段重组表达载体 pET mCanN ,转化E .coliBL2 1(DE3) ,IPTG诱导表达 ,SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)和蛋白质印迹检测小鼠canstatinN端片段的表达 .结果表明 ,IPTG诱导原核表达载体 pET mCanN在大肠杆菌E .coliBL2 1(DE3)中高效表达 ,小鼠canstatinN端片段表达量约占菌体总蛋白量的 18% ,小鼠canstatinN端片段主要以包涵体形式存在 ,包涵体经过洗涤、裂解、Ni spincolumn亲合柱层析以及蛋白质复性等步骤纯化后 ,获得了纯度约为 92 %的重组小鼠canstatinN端片段 .鸡胚绒毛尿囊膜 (chickenembryochoriollantoicmembrane ,CAM)实验表明 ,原核表达的小鼠canstatinN端片段能有效地按剂量依赖的方式抑制鸡胚新生血管的形成 .
- 侯卫红贾岩龙王天云柴玉荣袁保梅田芳王建民薛乐勋
- 关键词：CANSTATIN肿瘤血管生成抑制剂原核表达
- 杜氏盐藻rbcS启动子的克隆和功能分析被引量：9
- 2008年
- 为提高转基因盐藻的表达效率,利用基因组步行方法和巢式PCR,从盐藻中克隆了1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(rubisco)的小亚基基因rbcS的5′上游调控序列,并对其进行序列分析和转基因功能分析。采用DraI、EcoR V、PvuII和StuI4种平端限制内切酶分别酶切盐藻基因组DNA,并与接头连接,构建基因组步行文库GWL1、GWL2、GWL3和GWL4;设计特异引物从这4种文库中扩增rbcS基因的5′上游调控序列。在GWL1、GWL4中分别扩增出约1.2kb的片段。对该序列的分析表明,它的3′端与已知盐藻rbcScDNA的5′端序列完全一致,说明是该基因的5′端上游区,并且包含多个与转录调控有关的保守序列(如TATA-box,CAAT-box),富含GT的重复序列。此序列EcoR I下游的片段与除草剂抗性基因bar相融合,构建表达载体,电击法转化盐藻。通过对转化藻株的抗性筛选以及PCR和Southern blot检测,表明该区域能驱动外源基因bar在转基因盐藻中的表达,推断是盐藻rbcS基因的启动子调控区。
- 柴玉荣田芳刘红涛李杰薛乐勋
- 关键词：盐藻RBCS启动子
- 留学生病理生理学教学中推行PBL教学模式的探讨
- 2012年
- 目前,越来越多的外国留学生到中国高等学校学习,留学生教学已成为我国高等教育的重要组成部分。郑州大学国际教育学院医学部目前有留学生700余人,主要来自印度、尼泊尔和巴基斯坦等国,包括本科生、硕士研究生、博士研究生以及短期进修生。为了提高教学质量,国际教育学院医学部通过各种形式与国外著名大学开展教育合作与交流,
- 田芳张燕
- 关键词：病理生理学PBL留学生教学方法
- p65 siRNA联合顺铂对宫颈癌HeLa229细胞增殖及侵袭力的影响被引量：1
- 2008年
- 目的通过RNA干扰(RNAi)阻断宫颈癌细胞HeLa229中核因子(NF)-κB信号通路,观察其单独或与顺铂(DDP)联合对HeLa229增殖、耐药性和侵袭力的影响。方法利用RNAi技术,将HeLa229分为未转染组(A组)和转染p65小干扰RNA(siRNA)组(B组),用MTT法检测转染p65 siRNA 24、48、72 h时HeLa229的增殖情况;加入不同浓度DDP,观察其对HeLa229细胞增殖的影响。用Boyden chamber体外侵袭实验检测A、B组及p65siRNA与DDP(8.6 mg/L)联合组(C组)细胞侵袭力的变化。结果B组细胞存活率较A组明显下降;加入DDP后,A、B组细胞的存活率均随DDP浓度的增加而下降。siRNA与DDP联合应用可明显提高HeLa229对DDP的敏感性。与A组相比,B、C组穿越Matrigel胶的细胞数明显减少(P<0.05)。结论应用RNAi技术可有效阻断HeLa229内NF-κB信号通路,抑制其增殖和体外侵袭力,增强其对DDP的敏感性。
- 田卫红田芳许培荣刘红涛薛乐勋
- 关键词：宫颈癌HELA229细胞核因子小干扰RNA
- NF-κB信号通路在食管鳞癌细胞系中的激活被引量：16
- 2006年
- 目的核转录因子NF-kappaB(NF-κB)是一种重要的转录因子,参与调控多种与炎症、抗凋亡、肿瘤形成和转化有关的基因表达。本研究拟通过检测NF-κB信号通路在食管鳞癌细胞系中是否存在,分析NF-κB在食管鳞癌细胞中的激活状态及其对食管鳞癌细胞的生存及转化作用。方法采用免疫细胞化学法和Western blotting法检测两株食管鳞癌细胞系中NF-κB亚单位p50和p65,阻遏物IκBα及其上游激酶IKKβ的蛋白表达。并采用EMSA法检测两株食管鳞癌细胞核中NF-κB与DNA的结合活性。结果食管鳞癌细胞中存在激活的NF-κB信号通路,p50、p65、IκBα及其上游激酶IKKβ的蛋白在细胞质中均表达,并且p50/p65在细胞核中具有较高的DNA结合活性。结论本研究发现NF-κB信号通路在两种食管鳞癌细胞系被激活,提示激活的NF-κB信号通路可能在食管鳞癌发生中起重要作用。
- 田芳许培荣侯卫红刘红涛陈奎生薛乐勋
- 关键词：食管癌NF-KB信号传导通路
- 婴幼儿急性轮状病毒肠炎100例临床检验指标分析被引量：2
- 2019年
- 为探讨婴幼儿急性轮状病毒肠炎临床检验与分析,2017-2018年选取对照组100名健康体检婴幼儿、观察组100例急性轮状病毒肠炎患儿为研究对象,且均进行实验室检测,包括血清电解质水平、免疫球蛋白水平和异型淋巴细胞计数。结果显示,观察组二氧化碳结合力、血氯、血钠、血钾均低于对照组(P <0.05),观察组IgM、IgG、IgA均低于对照组(P <0.05),异型淋巴细胞计数高于对照组(P <0.05)。结果表明,血清电解质水平、免疫球蛋白水平和异型淋巴细胞计数对预测婴幼儿急性轮状病毒肠炎病情进展具有重要意义,可了解婴幼儿当前免疫功能状态,同时在治疗中具有一定的指导意义。
- 赵红丽赵红丽陈丹陈丹
- 关键词：急性轮状病毒肠炎婴幼儿
