王芳妹
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院蛋白质化学与发育生物学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家质检总局科技计划项目教育部重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程生物学农业科学理学更多>>
- 5种致泻大肠埃希氏菌实时荧光定量PCR快速检测技术被引量：6
- 2019年
- 将5种致泻大肠埃希氏菌的毒力基因保守序列进行设计并合成了引物和探针,建立的多重实时荧光PCR4种试剂盒可以同时检测5种致泻大肠埃希氏菌。结果表明:4种试剂盒的12对毒力基因通过5种致泻大肠埃希氏菌的标准储备菌株均得到验证;并且12对毒力基因只对对应的致泻大肠埃希氏菌特异性起作用,对常见的食源性致病菌都无扩增曲线;escV、bfpB、stx1、ipaH和invE基因的检出限是10CFU/mL,aggR基因的检出限是102CFU/mL,astA和pic基因的检出限是103CFU/mL,而stx2A、ipaH和stIb基因菌液浓度<10CFU/mL时,均可观察到明显的"S"型扩增曲线,且线形较好;并且对抽查和委托检验的肉类、奶和动物腹泻物以及人工污染样品等40份样品进行检测,共检出11份阳性样本,与GB4789.6-2016标准检测结果相一致,表明建立的4种试剂盒方法具有良好的实用性。
- 王芳妹王芳妹王淑好卢琳韩奉玲
- 关键词：实时荧光定量PCR毒力基因
- 四重PCR反应体系的建立及在牛肉掺假检测中的应用被引量：3
- 2016年
- 目的:建立马、牛、猪、鸭肉四重聚合酶链式反应(PCR)反应体系,为牛肉掺假检测提供参考。方法:选取马、牛、猪、鸭肉阳性样本,根据线粒体基因组中细胞色素b(cytochrome b)序列,设计多重PCR引物,同时对马、牛、猪、鸭肉进行PCR及电泳检测,建立四重PCR反应体系,并运用该体系对市场40份牛肉制品进行检测。结果:引物比例为马:牛:猪:鸭=1:1:2:1时,46℃退火温度下反应35个循环,四重PCR效果较好;建立四重PCR反应体系,四重PCR条带清晰且亮度较为一致,几乎没有二聚体产生,扩增灵敏度高。根据样品检测结果,烤牛肉串、牛肉丸的掺假率较高,分别为36.4%、75%,牛排未检出除牛肉外的三种动物源成分,但不排除有其他动物源成分的掺入。结论:四重PCR反应体系可用于牛肉掺假检测。
- 钟文涛王芳妹李白玉蒋伟周丛
- 关键词：细胞色素B
- 阿司匹林对人慢性粒细胞白血病细胞株K562的生长抑制作用被引量：8
- 2013年
- 为研究阿司匹林对人慢性粒细胞白血病细胞株K562生长的影响,采用光学显微镜和Hoechst 33258染色观察阿司匹林处理后细胞的形态和数目变化,显示阿司匹林促进K562细胞的凋亡.MTT法、细胞计数、软琼脂克隆形成实验、FACS和裸鼠成瘤实验在体外和体内检测阿司匹林对K562细胞增殖和存活的影响,发现阿司匹林明显抑制K562细胞的体外增殖和裸鼠体内成瘤能力.Western blot实验分析细胞信号通道下游基因的表达影响,显示β-catenin、STAT5A、PARP和NF-κB p65蛋白的表达量下调,而细胞周期抑制因子p21表达上调.这些结果提示阿司匹林从体外和体内抑制K562细胞的生长,其作用的机制复杂,可能影响β-catenin信号通道、JAK蛋白酪氨酸激酶/STAT5A信号通道、NF-κB信号传导通道和细胞周期的进程.
- 王芳妹杨子剑韩梅胡翔丁小凤
- 关键词：阿司匹林慢性粒细胞白血病细胞增殖
- 水产食品中纳米颗粒TiO2与重金属Cd复合污染危害的研究
- 2017年
- 目的研究纳米颗粒二氧化钛(TiO_2NPs)和重金属Cd复合污染对水产食品的生态危害。方法采用光学立体解剖显微镜观察纳米颗粒TiO_2和重金属Cd复合污染处理后斑马鱼的形态变化,记录染毒48 hpf后的孵化数和染毒96 hpf后的死亡数,并且利用DCFH-DA探针检测了活性氧含量的变化。结果与仅TiO_2NPs污染相比较,TiO_2NPs和重金属Cd复合染毒48 hpf后,胚胎发生心包水肿,卵黄囊肿。染毒72 hpf后,胚胎外包偏少,并且斑马鱼胚胎的孵化率下降,死亡率上升,ROS含量升高。结论本研究可为水产食品业生物安全评价提供参考。
- 王芳妹陈谋瑛方雷周雅娜李白玉蒋伟钟文涛
- 关键词：二氧化钛重金属CD斑马鱼
- DNA条形码在肉制品掺伪中非定向筛查技术的研究被引量：6
- 2017年
- 目的对基于DNA条形码的肉制品掺伪中非定向筛选技术进行探索。方法以线粒体基因组中COI基因为靶标,设计猪、牛、羊、马、鸡、鸭、鹅、鼠8种动物源物种间的通用引物和特异性引物,建立禽畜肉的DNA条形码检测方法。同时应用该技术对50份市售的肉制品进行检测。结果本研究建立了DNA条形码筛选技术,电泳条带通过基因测序能正确识别猪、牛、羊、马、鸡、鸭、鹅、鼠8种动物源成分,结合分子克隆技术能实现对混合肉的检测。50份市售肉制品的DNA条形码结果显示,16份掺杂了除牛羊肉以外的其他禽畜肉。结论 DNA条形码技术能打破传统标准中PCR法检测目标唯一性的局限,具有良好的应用前景。
- 钟文涛王芳妹李白玉蒋伟颜亨梅
- 关键词：DNA条形码COI基因
- 包装饮用水中铜绿假单胞菌实时荧光定量PCR快速检测
- 2023年
- 目的:有效弥补传统微生物学检验方法的缺陷。方法:针对GB 8538—2022中铜绿假单胞菌的毒力基因pcrL和16S rRNA基因的V3~V4区保守序列设计合成引物和探针,建立实时荧光PCR方法。结果:该方法可以有效扩增常见标准储备菌株的16S rRNA基因,且对铜绿假单胞菌标准储备菌株的毒力基因pcrL的检测效果良好,观察到明显的“S”型扩增曲线,但对常见的食源性致病菌无扩增曲线。当菌液浓度<10 CFU/mL时,pcrL基因仍有扩增曲线,其检测范围为10~10~7 CFU/mL,检测限为10 CFU/mL;不同菌液浓度下毒力基因pcrL的Ct平均值为18.0~38.6。对近3年湖南省14个县、市抽查检验(瓶)桶装水中铜绿假单胞菌不合格样品进行进一步检测,符合率达到100%。结论:该方法对铜绿假单胞菌携带毒力因子pcrL检测的灵敏度较高;且操作简便、特异性强,具有良好的实用性。
- 王芳妹王芳妹林丹朱秋燕洪振柏蒋伟
- 关键词：铜绿假单胞菌毒力基因饮用水
- miR-124和miR-520b下调Eps8表达并抑制HeLa细胞增殖被引量：3
- 2013年
- Eps8是一个多功能的信号分子,参与肌动蛋白重排、受体内吞和肿瘤的发生发展.为了寻找靶向Eps8的microRNAs(miRNAs)并研究其在宫颈癌中的调控作用,本文采用软件预测获得4个可能调控Eps8表达的miRNAs.利用双荧光素酶报告系统和Western印迹研究发现,miR-124和miR-520b结合到人EPS8 mRNA的3'非翻译区(untranslated region,UTR)并有效抑制Eps8蛋白的表达.进一步细胞存活检测、MTT法和克隆形成实验分析显示,miR-124和miR-520b过表达显著抑制HeLa细胞的生长和增殖.而且,miRNA调节的Eps8下调能提高HeLa细胞对化疗药物顺铂的敏感性.同时证明,miR-124和miR-520b激活肿瘤抑制基因p53与下游基因p21报告基因转录活性,也相应地上调了p53与p21的蛋白表达.这些结果提示,miR-124和miR-520b下调癌基因EPS8表达,从而抑制HeLa细胞增殖,负调控宫颈癌细胞生长.
- 李新鑫陈成王芳妹丁小凤
- 关键词：HELA细胞
