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王春卉

作品数：6 被引量：111H指数：4
供职机构：山东大学生命科学学院微生物技术国家重点实验室更多>>
发文基金：山东省自然科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学化学工程更多>>

合作作者

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 5篇生物学
  • 1篇化学工程

主题

  • 3篇基因
  • 2篇单胞
  • 2篇纤维素
  • 2篇纤维素酶
  • 2篇克隆
  • 2篇黄单胞菌
  • 2篇杆菌
  • 2篇大肠杆菌
  • 1篇亚克隆
  • 1篇野油菜黄单胞...
  • 1篇油菜
  • 1篇瑞氏木霉
  • 1篇生物降解
  • 1篇酿酒
  • 1篇酿酒酵母
  • 1篇葡聚糖酶基因
  • 1篇氢酶
  • 1篇微紫青霉
  • 1篇纤维二糖
  • 1篇纤维二糖水解...

机构

  • 6篇山东大学

作者

  • 6篇王春卉
  • 5篇高培基
  • 5篇汪天虹
  • 1篇邹玉霞

传媒

  • 2篇遗传
  • 1篇生物工程进展
  • 1篇微生物学报
  • 1篇生物工程学报
  • 1篇纤维素科学与...

年份

  • 1篇2000
  • 3篇1998
  • 2篇1997
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
具有高外切葡聚糖纤维二糖水解酶I活力的新型黄单胞工程菌的构建被引量：1
1997年
由广宿主质粒ｐＲＫ４０４和微紫青霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶Ｉ（ＣＢＨＩ）ｃＤＮＡ基因ｃｂｈＩ构建了重组质粒ｐＲＫ４０４－１８１，在携带有诱动质粒的菌株ＥＤ８６５４（ｐＲＫ２０１３）的存在下，采用三亲滤膜结合的方法，将该质粒转移到野油菜黄单胞菌Ｓ－１５２中，并成功地得到表达。结合子Ｓ－１５２（ｐＲＫ４０４－１８１）外切葡聚糖纤维二糖水解酶的ｐＮＰＣ活力比原始菌株Ｓ－１５２提高了２～４倍，滤纸酶活提高了１倍。
王春卉汪天虹高培基钟玲
关键词：黄单胞菌纤维二糖水解酶基因
野油菜黄单胞菌S-152内切葡聚糖酶基因在大肠杆菌中的克隆与表达被引量：3
1998年
以质粒ｐＵＣ９为载体，大肠杆菌ＪＭ８３为宿主菌，用鸟枪法克隆到纤维素降解细菌野油菜黄单胞菌Ｓ－１５２的内切葡聚糖酶（ＣＭＣａｓｅ）基因，克隆到的ＣＭＣａｓｅ基因位于２７ｋｂ的ＨｉｎｄⅢ片段上，该重组质粒命名为ｐＵＣ９Ｈ－１。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析结果显示所克隆到的内切葡聚糖酶基因与野油菜黄单胞菌染色体ＤＮＡ有亲和性。对克隆株的酶学性质分析表明，其ＣＭＣａｓｅ活力为０３１０μｍｏｌＧｌｕ／ｍｇ蛋白·分钟，最适作用ｐＨ为６４，最适作用温度为５５℃。
汪天虹钟玲王春卉朱悦
关键词：野油菜黄单胞菌基因克隆
微紫青霉CBHI酶的CBD蛋白编码区在大肠杆菌中的亚克隆及表达被引量：6
1998年
对插入质粒pUC18－181上的微紫青霉（Penicilliumjanthinellum）CBHI酶的cDNA基因进行一系列DNA体外操作，包括进行序列定向缺失，最后将两末端修饰为平端后进行连接使质粒环化。用得到的产生序列定向缺失的重组质粒转化大肠杆菌JM109。利用CBD能吸附到结晶纤维素上的特性，从随机选取的24个缺失转化子中筛选到一株含CBD编码区的转化子JM109（pUC18C），所表达的CBD融合蛋白分子量为21kD．JM109（pUC18C）所产生的LacZ-CBD融合蛋白可通过对纤维素的吸附-解吸附过程一步纯化。其IPTG诱导的pNPC酶活力为零，表明该菌已不再具有CBHI酶活力。
江天虹王春卉高培基钟玲邹玉霞
关键词：大肠杆菌亚克隆微紫青霉
纤维素酶分子的纤维素吸附区的研究进展被引量：40
1997年
纤维素是生物界中最重要的碳源物质，其生物降解对维持地球上的碳素循环至关重要。其降解涉及到一系列的纤维素酶，是一个多酶协同的过程。近年来相继发现纤维素酶大都含有催化区和可与纤维素结合且氨基酸序列较为保守的功能区，即纤维素吸附区（cellulosebindingdomain,CBD）。通过序列之间的比较，用小角度X射线衍射、核磁共振及流水基簇分析等方法，在CBD的结构、功能及与纤维素的吸附机制等方面有了较深人的了解。本文为近十年来此领域研究进展的简述。
王春卉汪天虹高培基
关键词：纤维素酶纤维素生物降解
纤维素酶纤维素吸附区的结构与功能被引量：58
2000年
大多数纤维素酶含有催化区和可与纤维素结合且氨基酸序列较为保守的纤维素吸附区(cellulosebindingdomain ,CBD)。纤维素吸附区促进酶与底物的结合 ,有利于催化区对不溶性底物的作用 ,但对可溶性底物的催化作用无影响。对CBD结构的研究和进一步的诱变研究揭示 :纤维素吸附区是通过几个芳香族氨基酸结合到纤维素表面。有实验证明外切葡聚糖酶的CBD对结晶纤维素有疏解作用。CBD结构域已成功地应用于一系列重组融合蛋白的纯化和固定化。对纤维素吸附区结构与功能的深入了解对进一步了解酶的作用机制 。
汪天虹王春卉高培基
关键词：纤维素酶芳香氨基酸
瑞氏木霉木糖醇脱氢酶基因的分离与鉴定被引量：7
1998年
将在木聚糖上生长的瑞氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｓｅｉ）ＲｕｔＣ３０的ｃＤＮＡ文库全部质粒转化已携带有毕赤氏酵母（Ｐｉｃｈｉａｓｔｉｐｉｔｉｓ）木糖还原酶基因的重组酿酒酵母（Ｓａｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）菌株Ｈ４７５，在Ｈ４７５中构建了瑞氏木霉的ｃＤＮＡ表达亚文库。在以木糖为唯一碳源的选择性酵母合成培养基上，从该亚文库中筛选到瑞氏木霉木糖醇脱氢酶ｃＤＮＡ基因，该基因片段长为１３ｋｂ。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交分析和蛋白质凝胶电泳结果表明该基因确实来源于瑞氏木霉，所编码蛋白质分子量约为４０ｋＤａ。携带有毕赤氏酵母木糖还原酶和瑞氏木霉木糖醇脱氢酶基因的重组酵母能够在以木糖为唯一碳源的培养基上生长，并能将９０％以上的木糖转化为木糖醇、乙醇和其它副产品。
汪天虹高培基王春卉钟玲
关键词：瑞氏木霉木糖醇脱氢酶基因酿酒酵母
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