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王宁: 作品数：21 被引量：42H指数：4; 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：生物学轻工技术与工程经济管理理学更多>>

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蓬莱仙洞CO_2浓度及温度的变化规律初探被引量：10: 2008年; 通过不同季节对蓬莱仙洞的客流量、温度、洞穴空气中二氧化碳(CO2)浓度的系统观测,分析研究了旅游淡旺季上述指标的基本变化规律。研究结果表明,洞穴空气中CO2浓度主要受游客量、洞体结构、风速、外界CO2含量的影响,洞穴温度主要受游客量、洞体结构、外界气候、洞内灯光系统的影响,其中,洞穴旅游活动对洞穴的温度和空气中CO2浓度变化有主控作用。; 杜金娥张光生王宁; 关键词：洞穴旅游温度变化 CO2浓度

乡村旅游资源的开发与保护: ＜正＞乡村旅游是21世纪我国旅游业发展的热点。乡村旅游资源是乡村旅游得以顺利进行的基础。如何在乡村旅游的发展过程中,既充分、合理地开发利用乡村旅游资源,又使其得到有效的保护,这是乡村旅游保持其独特魅力,又使它能够可持续发...; 王宁张光生; 关键词：乡村旅游资源; 文献传递

植烷醇磷酸甘露糖的酶法合成及应用: 2020年; 内质网(ER)腔内的甘露糖基化修饰共同存在于N-糖基化、糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定化、O-和C-甘露糖基化中,对于真核生物来说具有重要的作用。ER腔内的甘露糖基化的底物供体为多萜醇磷酸甘露糖(Dol-P-Man),因此Dol-P-Man的合成对于理解不同种类的糖基化修饰具有重要的意义。本研究原核表达纯化了酵母Dol-P-Man的合成酶(Dpm1),并鉴定了重要的DXD motif。利用纯化的Dpm1蛋白,及简单的植烷醇(Phytanol)代替复杂的多萜醇(Dolichol),体外酶法合成了Dol-P-Man的替代结构Phy-P-Man。在N-糖基化途径中Alg3催化Dol-PP-GlcNAc2-Man5和Dol-P-Man生成Dol-PP-GlcNAc2-Man6。通过体外酶反应,本研究证明Phy-P-Man同样能够作为Alg3的底物供体用于N-糖基化途径的研究,为以后合成高甘露糖型的N糖结构及GPI、O-和C-甘露糖基化的研究奠定了基础。; 李盛陶王宁高晓冬

利用来源于Paenibacillus macerans的α-CGTase突变体Y89D制备α-环糊精被引量：10: 2011年; 对α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGTase)突变体Y89D制备α-环糊精的影响因素进行初步研究。其因素包括淀粉种类(马铃薯淀粉、玉米淀粉、木薯淀粉、可溶性淀粉)、加酶量、反应时间、pH值、有机溶剂(乙醇、异丙醇、正丁醇、正癸醇)和温度。结果表明:选用5g/100mL马铃薯淀粉、pH5.0、温度30℃、加酶量控制在每克淀粉5U左右,反应体系中加入体积分数5%的正癸醇,反应6h后,淀粉总转化率可达70%,其中α-环糊精在产物中质量分数约为85%,转化产物中含有少量β-环糊精(15%),而极少生成γ-环糊精。因此,α-CGTase突变体Y89D在制备α-环糊精工艺中具有很好的工业化应用前景。; 王宁吴丹陈晟陈坚吴敬; 关键词：Α-环糊精 Α-环糊精葡萄糖基转移酶转化率

ALG11-CDG突变蛋白在原核细胞中的稳定表达: 2021年; 甘露糖基转移酶Alg11是N糖基化途径中的关键酶,催化第4和第5个甘露糖(Man)残基以α-1,2连键的形式转移到底物Man3-GlcNAc2-PP-Dol生成Man5-GlcNAc2-PP-Dol,人类ALG11基因致病突变会导致相关的先天性糖基化疾病ALG11-CDG(Congenital Disorders of Glycosylation)。目前,对ALG11-CDG的研究更侧重于其临床症状,而患者Alg11突变蛋白的性质还有待探索。作者以研究ALG11-CDG突变蛋白的重组表达及活性为目的,首先在人胚胎肾细胞HEK293和酿酒酵母中分别表达了Alg11野生型及突变体蛋白,发现其表达量存在显著差异,突变体蛋白不能稳定表达。最终在大肠杆菌中成功稳定表达了野生型及ALG11-CDG相关突变蛋白,利用液质联用定量分析了蛋白质的活性,结果显示,突变蛋白的活性存在不同程度的降低,其降低程度与ALG11-CDG疾病的严重程度存在一定的相关性。上述研究结果证明:1)ALG11-CDG相关突变蛋白的不稳定有可能是造成疾病的原因之一;2)体外定量测试大肠杆菌表达的ALG11-CDG相关突变蛋白的活性可以为相应患者的疾病严重程度提供参考。; 王佩李盛陶王宁高晓冬; 关键词：N-糖基化酶活

Alg1蛋白活性与脂肪醇寡糖中脂肪链结构相互关系的研究: N-糖基化是一种重要的蛋白质翻译后修饰。蛋白质N-糖基化起始于内质网膜上的脂肪醇寡糖(lipid-linked oligosaccharide,LLO)的合成,该过程由一系列的糖基转移酶(asparagine-linke...; 王宁; 文献传递

人源β-N-乙酰葡糖胺转移酶I(hGnT-I)的原核表达与活性鉴定被引量：1: 2021年; N-乙酰葡糖胺转移酶I(hGnT-I)功能为在高尔基体中向糖蛋白上的N-寡糖M5GN2结构添加一个β-1,2连接的N-乙酰葡糖胺。为大量获得具有活性的hGnT-I蛋白,构建了重组表达质粒pET28a-MGAT1△TM并将其在大肠杆菌Rosetta菌株中表达。对诱导条件进行优化后,将获得的可溶性重组蛋白His-hGnT-I△TM进行镍柱亲和纯化并通过高效液相色谱(HPLC)检测其体外活性和底物特异性。结果表明,大肠杆菌ROSETTA体系可以成功表达可溶性重组hGnT-I蛋白;该蛋白质相对分子质量约为42800,在体外反应中具有相应的糖基转移酶活性;除天然糖链底物M5GN2外,该蛋白质可以识别非天然糖链底物M3GN2;产物经酶切反应验证,证明该蛋白质催化添加一个β糖苷键连接的N-乙酰葡糖胺的反应。本研究所开发的原核表达体系可以大量制备纯化的功能性重组hGnT-I蛋白,以应用于该蛋白质的性质研究以及N-糖链的体外合成。; 陆天天王宁高晓冬; 关键词：活性检测

RP-HPLC法测定酒花中的黄腐酚被引量：2: 2009年; 建立了反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测酒花中黄腐酚含量的方法。选用色谱柱Zorbax Eclipse XDB-C18柱(250mm×4·6mm,5μm),以甲醇和0·2%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱。柱温25℃,流速0·5mL/min,检测波长370nm。在此条件下,黄腐酚得到很好分离,在1·13～113mg/L范围内线性关系良好,R2=0·9992,外加标回收率在95·05%～104·03%之间,RSD=2·71%。该方法可以简便、准确地测定酒花中黄腐酚的含量。; 王宁陶冠军秦昉单连菊李崎; 关键词：黄腐酚酒花反相高效液相色谱

多萜醇N,N′-二乙酰壳二糖的合成: 2021年; 以全乙酰壳二糖为原料,经过脱乙酰基,磷酸化和去苄基得到七乙酰壳二糖-1-α-磷酸;聚戊烯醇经过不对称加氢,磷酸化得到多萜醇磷酸,与七乙酰壳二糖-1-α-磷酸偶联后脱去乙酰基得到多萜醇N,N′-二乙酰壳二糖。目标化合物多萜醇N,N′-二乙酰壳二糖经1H NMR,13C NMR,31P NMR和基质辅助激光解吸-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)表征。; 陈征辉晁强高晓冬王宁; 关键词：不对称加氢反应