王卓
- 作品数：21 被引量：89H指数：7
- 供职机构：辽宁省益康生物制品厂更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 仔猪大肠杆菌K88ac-ST1-LTB三价基因工程灭活苗的研究 Ⅰ.基因工程菌株BL21(DE3)(pXKST3LT5)菌种的限定代次及保存条件试验被引量：1
- 2002年
- 许崇波卫广森王文成王卓
- 关键词：仔猪大肠杆菌灭活苗
- 表达大肠杆菌肠毒素ST_1—LT_B融合蛋白工程菌株的免疫原性研究被引量：1
- 1998年
- 已构建的能表达大肠杆菌肠毒素ＳＴ１—ＬＴＢ融合蛋白的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴ－ＳＬＴ１）及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从ＩＰＴＧ诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原，免疫小鼠，结果免疫小鼠至少能抵抗１．５ＬＤ１００的大肠杆菌强毒株Ｃ８３９０２（Ｋ８８ａｃ，ＳＴ＋，ＬＴ＋）的攻击。用提取的包涵体免疫家兔后，采集的血清能够中和天然ＳＴ１的毒性。这表明构建的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。
- 许崇波卫广森王卓冯书章吴广谋王文成张万林
- 关键词：融合蛋白
- 表达大肠杆菌肠毒素ST<sub>1</sub>—LT<sub>B</sub>融合蛋白工程菌株的免疫原性研究
- 1998年
- 已构建的能表达大肠杆菌肠毒素ＳＴ１—ＬＴＢ融合蛋白的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴ－ＳＬＴ１）及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从ＩＰＴＧ诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原，免疫小鼠，结果免疫小鼠至少能抵抗１．５ＬＤ１００的大肠杆菌强毒株Ｃ８３９０２（Ｋ８８ａｃ，ＳＴ＋，ＬＴ＋）的攻击。用提取的包涵体免疫家兔后，采集的血清能够中和天然ＳＴ１的毒性。这表明构建的工程菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。
- 许崇波卫广森王卓冯书章吴广谋王文成张万林
- 关键词：融合蛋白免疫原性
- 大肠杆菌肠毒素ST_1—LT_B融合基因的高效表达被引量：1
- 1998年
- 用限制性核酸内切酶ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌肠毒素ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因的质粒ｐＸＳＬＴ１，回收０．８４ｋｂ的ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因，再将载体ｐＥＴ—２８ｂ（＋）用ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切，然后将其与ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因连接，转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＥｃｏＲⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切反应鉴定重组子质粒，得到了理想重组质粒ｐＸＥＴ－ＳＬＴ１。重组菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后，其表达产物经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和ＥＬＩＳＡ检测，结果表明重组菌株可以高效表达ＳＴ１—ＬＴＢ融合蛋白，该融合蛋白占菌体总蛋白的３３．２１％。
- 许崇波卫广森王卓冯书章吴广谋吴广谋张万林
- 关键词：产气荚膜梭菌融合基因
- C型产气荚膜梭菌β毒素基因克隆与核苷酸序列分析被引量：8
- 1999年
- 用ＰＣＲ技术，从含Ｃ型产气荚膜梭菌β毒素基因质粒ｐＢ１２中扩增出了０．９５Ｋｂ的β毒素基因，然后用限制性核酸内切酶ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ对其进行双酶切处理，最后将其定向连接在事先经同样内切酶处理的载体ｐＥＴ－２８ｃ（＋）中的相应位点上，转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双酶切分析和核苷酸序列分析，证明重组质粒ｐＸＥＴＢ２含有产气荚膜梭菌β毒素基因，确定了其全部的核苷酸序列。
- 许崇波王玉炯卫广森王卓王卓王文成冯书章李尚波
- 关键词：产气荚膜梭菌基因克隆核苷酸序列
- 大肠杆菌肠毒素ST_1-LT_B融合基因的构建被引量：22
- 1998年
- 用ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌不耐热肠毒素（ＬＴＢ）基因的质粒ｐＸＬＴ１－１，回收５０５ｂｐ的ＬＴＢ基因片段，再用ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌耐热肠毒素（ＳＴ１）基因的质粒ｐＸＳＴ１，与上述回收的ＬＴＢ基因片段连接，转化至受体菌ＪＭ１０９中。经ＥｃｏＲＩ、ＢａｍＨＩ、ＨｉｎｄⅢ酶切反应鉴定重组子质粒，得到了理想重组子质粒ｐＸＳＬＴ１。ＥＬＩＳＡ检测到了ＳＴ１－ＬＴＢ融合蛋白，而且该融合蛋白无天然ＳＴ１生物毒性。
- 许崇波于凤芹卫广森王卓冯书章王文成马成国李尚波
- 关键词：大肠杆菌LTB基因融合基因基因克隆
- 仔猪大肠杆菌K88ac-ST_1-LT_B三价基因工程灭活苗 Ⅳ.保存期试验和田间试验
- 2002年
- 许崇波卫广森王文成王卓
- 关键词：仔猪保存期试验田间试验
- 产气荚膜梭菌α-β融合基因的构建被引量：1
- 2001年
- 用 PCR从含产气荚膜梭菌β毒素基因的质粒 p XETB2中扩增出β毒素基因 ,Nco 和 Bam H 双酶切该 β毒素基因 ,回收 0 .93kb的 β毒素基因片段 ,再用 Nco 和 Bam H 双酶切含产气荚膜梭菌 α毒素基因质粒 p XETA1 ,与上述回收的 β毒素基因片段连接 ,转化至受体菌 BL2 1 ( DE3)中。经 Nco 、Bam H 、Not 酶切反应鉴定和核苷酸序列分析证实 ,获得的重组质粒 p XCPAB1含有 α-β融合基因。重组菌株 BL2 1( DE3) ( p XCPAB1 )表达产物经 ELISA检测和 SDS-PAGE分析 。
- 许崇波赵宝华卫广森蒋玉文王卓
- 关键词：产气荚膜梭菌Α毒素基因融合基因基因克隆动物坏死性肠炎
- 鸡大肠杆菌病中草药佐剂多价灭活苗的研制Ⅱ疫苗免疫产生期、免疫持续期及保存期试验被引量：1
- 2002年
- 对鸡大肠杆菌中草药佐剂多价灭活苗进行了免疫产生期、免疫持续期、疫苗保存期试验。研究表明 :雏鸡接种该疫苗 3～ 5d后便产生免疫力 ,到 9d时抗体产生水平已经很高 ;以免疫攻毒保护率不低于 80 %为标准 ,疫苗的免疫持续期可在 7个月以上 ;以物理性状合格和免疫攻毒保护率不低于 80 %为标准 ,疫苗置 4℃时保存期为 18个月 ,2 5℃保存 6个月为宜。
- 王文成卫广森王卓尹广东宣华李素
- 关键词：大肠杆菌病多价灭活苗免疫持续期
- 大肠杆菌肠毒素ST_1-LT_B融合基因的高效表达被引量：21
- 1999年
- 用限制性核酸内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌肠毒素ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因的质粒ｐＸＳＬＴ１，回收０８４ｋｂ的ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因，再将载体ｐＥＴ—２８ｂ（＋）用ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切，然后将其与ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因连接，转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＥｃｏＲⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切反应鉴定重组子质粒，得到了理想重组质粒ｐＸＥＴＳＬＴ１。重组菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后，其表达产物经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和ＥＬＩＳＡ检测，结果表明重组菌株可以高效表达ＳＴ１—ＬＴＢ融合蛋白，该融合蛋白占菌体总蛋白的３３２１％，而且无天然ＳＴ１生物毒性。
- 许崇波卫广森王卓于凤芹于凤芹冯书章马成国王文成张万林
- 关键词：大肠杆菌融合基因融合蛋白
