林锋 作品数:102 被引量:86 H指数:5 供职机构: 浙江省淡水水产研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖州市科技攻关计划项目 浙江省公益性技术应用研究计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 环境科学与工程 轻工技术与工程 医药卫生 更多>>
三疣梭子蟹C-型凝集素基因多态性标记及SNP分子标记基因分型的方法 本发明公开了三疣梭子蟹C-型凝集素基因多态性标记,该基因多态性标记包括三疣梭子蟹C-型凝集素基因序列的4个SNP位点及一个三碱基的缺失,其中第四外显子205bp处的SNP与三疣梭子蟹溶藻弧菌易感性/抗性相关联,命名为T/... 郝贵杰 王春琳 沈锦玉 母昌考 潘晓艺 林锋 李荣华 盛鹏程 姚嘉赟 徐洋文献传递 三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)半乳糖凝集素PtGAL的基因克隆与原核重组表达 被引量:2 2016年 半乳糖凝集素(Galectin)是动物凝集素家族的一员,在脊椎动物和无脊椎动物中都参与了重要的免疫防御反应,是一种重要的免疫因子。通过RT-PCR和RACE技术克隆获得了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)半乳糖凝集素基因全长,并命名为PtGal。该基因全长875bp,开放阅读框为669bp,编码222个氨基酸,包含一个糖识别结构域CRD(位于16—142位氨基酸),预测蛋白的分子量(Mw)为23529.4Da,理论等电点(p I)为5.21。同源性比对结果显示,PtGal编码的氨基酸序列与中华绒螯蟹、南美白对虾、日本囊对虾galectin的同源性分别为77%、66%、58%。实时荧光定量PCR(qRT-RCR)结果表明,PtGal在三疣梭子蟹肝胰腺、肌肉、肠、胃、鳃、心脏、性腺中都有表达,其中在性腺中的表达量最高,在肝胰腺中的表达量最低,但人工感染溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)后,肝胰腺的表达呈先升高后降低的趋势。利用原核表达系统对三疣梭子蟹PtGal进行了重组表达,并通过纯化复性获得了重组目的蛋白rPtGal,ELISA检测rPtGal与不同细菌及真菌的结合活性,结果表明,该重组蛋白与革兰氏阳性菌、阴性菌和真菌均有较强的结合。本研究为进一步深入研究三疣梭子蟹半乳糖凝集素的功能奠定了基础。 郝贵杰 林锋 母昌考 李荣华 姚嘉赟 潘晓艺 袁雪梅 沈锦玉 王春琳关键词:三疣梭子蟹 半乳糖凝集素 实时荧光定量PCR 溶藻弧菌 重组蛋白 鳖源致病性嗜水气单胞菌的分离与鉴定 被引量:4 2014年 从患病中华鳖(Pelodiscus sinensis)肺组织中分离到优势菌1株,进行了表型特征分析和16S r DNA序列测定。结果表明,该菌为气单胞菌属的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),通过对健康中华鳖进行人工感染,发现该菌具有致病性;选取20种常规药敏试纸进行药敏试验,结果表明,该嗜水气单胞菌对庆大霉素、头孢他啶、头孢西丁、链霉素、呋喃妥因敏感,对诺氟沙星、红霉素、阿米卡星、环丙沙星中敏,对其他11种抗生素具有耐药性。 林锋 刘莉 曹铮 叶雪平 郝贵杰 盛鹏程关键词:RDNA 三疣梭子蟹血清凝集素的生物学特性(英文) 2016年 对三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)血清凝集素的凝集特性进行了研究。结果表明:三疣梭子蟹血清凝集素对鲫鱼、中华鳖、草鱼、鸡和人类A、B、O型血细胞没有凝集作用,但是对小鼠、兔的血细胞表现出较强的凝集活性,其中对小鼠血细胞的血凝活性达到210,对兔血细胞的血凝活性达到28;盐度对其凝集活性有较大影响,Na Cl浓度在0.6 mol/L以上时基本失活;凝集素活性最适p H值为6.0~7.4;血清凝集素对Ca2+、Mg2+离子有明显的依赖性,EDTA可以明显抑制其凝集活性;糖抑制结果表明,血清凝集素活性能被N-乙酰葡萄糖胺及N-乙酰甘露糖胺特异性抑制;对血清凝集素进行硫酸铵分级沉淀分离后,发现凝集素活性主要分布在25%饱和度硫酸铵沉淀区;聚丙烯凝胶电泳(SDS-PAGE)结果表明,主要蛋白条带在72~95 ku。 郝贵杰 王春琳 林锋 母昌考 徐洋 袁雪梅 潘晓艺 姚嘉赟 沈锦玉关键词:三疣梭子蟹 血清凝集素 凝集活性 基因I型草鱼呼肠孤病毒的检测方法及检测试剂盒 本发明公开了基因I型草鱼呼肠孤病毒的检测方法,包括下述步骤:1)提取草鱼的RNA,加入到预混反应液中利用两对引物对基因I型草鱼呼肠孤病毒的保守区序列进行环介导等温核酸扩增,其中所用的引物分别为引物GCRVI-F3序列SE... 郝贵杰 沈锦玉 林锋 潘晓艺 袁雪梅 陈智慧 黄小红文献传递 虾鳖混养模式的水质特征及对虾产量的影响 被引量:2 2015年 对不同比例的虾鳖混养模式过程中主要水质指标进行定期监测,并研究捕获时虾的产量及生长情况。结果表明:虾鳖混养塘水体的氨态氮、亚硝酸盐、硫化物含量相对比较稳定,混养塘虾的平均体长、体质量明显优于对照塘,且虾的产量也高于对照塘。虾鳖混养模式一定程度上改善了水质,提高了虾的产量;混养塘中鳖的存在,一定程度上对虾病原传播起到了阻断作用。 林锋 刘莉 曹铮 蔺凌云 盛鹏程 沈芸 王雨辰关键词:凡纳滨对虾 中华鳖 混养模式 水质 不同饲料对乌鳢中汞和甲基汞富集水平的影响 被引量:1 2020年 为了解冰鲜鱼和水产配合饲料2种不同饲料对乌鳢(Ophiocephalus argus)中汞和甲基汞富集水平和食用安全的影响,实验采用ICP-MS法、液相-原子荧光分光光度法分别测定乌鳢在摄食冰鲜鱼和水产配合饲料两种不同饲料后,研究其肌肉、肝脏和肾脏3种不同组织中总汞和甲基汞的含量随养殖周期的富集规律。结果显示:在整个养殖过程中,饲料投喂组肌肉、肝脏和肾脏中总汞和甲基汞含量均低于冰鲜鱼投喂组,其中冰鲜鱼组肌肉、肝脏中总汞和甲基汞的富集均明显高于饲料组,肾脏中总汞的富集明显高于饲料组。从不同组织看,肌肉对总汞和甲基汞的富集显著高于肝脏和肾脏。肌肉中汞主要以甲基汞形式存在,平均含量占总汞的84.2%,低于国家食品安全限量标准,食用风险较低。相关性分析显示,2种不同饲料中总汞、甲基汞含量对乌鳢生长周期内总汞、甲基汞富集无显著性影响。结果表明乌鳢配合饲料养殖较冰鲜鱼养殖更为安全,适宜进一步推广运用。 施沁璇 孙博怿 朱云海 盛鹏程 林锋 高晟 郝贵杰关键词:冰鲜鱼 汞 甲基汞 中华鳖出血症病毒引起的病理学特征浅析 中华鳖出血症病毒是引起中华鳖出血症的高致死性病毒。本文就该病毒引起的组织病理学特征及肝损伤的分子病理学特征进行了初步分析。解剖学特征显示该病毒引起中华鳖肝、脾、肾、肺、肠等组织均有不同程度充血;病理组织特征进一步显示肝、... 刘莉 曹铮 林锋 叶雪平 卢淑娟关键词:组织病理 分子病理 文献传递 虾疫苗的研究进展概述 养殖业的发展,作为主要养殖品种之一的虾,养殖规模也在逐年扩大,而虾病爆发的次数与严重性也在逐年增强。因此,如何对养殖虾的疾病进行防治显得尤为重要。本文根据虾疫苗的发展历程,介绍了传统疫苗、基因工程疫苗的研究近况,指出DN... 林锋 曹铮 盛鹏程 吴颖蕾关键词:基因疫苗 疾病防控 罗氏沼虾野田村病毒NASBA检测技术的研究 罗氏沼虾野田村病毒(Macrobrachium rosenbergii Nodavirus,MrNV)是一种暴发面广、死亡率高的RNA病毒。本文以被MrNV感染的罗氏沼虾苗种为材料,提取总RNA为模板,在野田村病毒RNA... 林锋 曹铮 刘问 吴颖蕾 钱冬关键词:罗氏沼虾