林智敏
- 作品数:67 被引量:170H指数:8
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- 发文基金:国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省科技计划项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学环境科学与工程轻工技术与工程更多>>
- 水稻密码子优化的cry1Ca基因在大肠杆菌中表达、纯化及抗体制备被引量:2
- 2011年
- 将水稻偏好密码子优化并人工合成抗虫基因cry1Ca通过限制性内切酶酶切的方法构建原核表达载体pET-28bca,成功表达了带6个组氨酸标签的His-cry1Ca融合蛋白,其表达量约占菌体总蛋白的24%,表达的融合蛋白主要以包涵体的形式存在。对包涵体蛋白进行可溶性处理,亲和纯化出带6个组氨酸标签的融合蛋白,将其作为抗原免疫家兔获得了滴度(ELISA)为l∶50 000的抗血清,并具有较强的特异性。
- 林智敏陈在杰胡太蛟胡昌泉颜静宛苏军王锋
- 关键词:原核表达融合蛋白多克隆抗体
- 氮肥对稻田土壤反硝化细菌群落结构和丰度的影响被引量:30
- 2012年
- 以氮肥田间定位试验为研究对象,利用PCR-DGGE(聚合酶链反应变性梯度凝胶电泳)和荧光定量PCR(real-time PCR)技术,通过对反硝化细菌nirS基因的检测,分析了定位试验第2年稻田反硝化细菌群落结构和丰度的变化。DGGE图谱及依据其条带位置和亮度数字化数值进行的主成分分析(PCA)结果均显示:在氮肥定位试验第2年,与不施肥对照(CK)比较,在水稻各个生育期(分蘖期、齐穗期和成熟期)内,施用氮肥[150kg(N)·hm-2]的稻田根层土或表土中的反硝化细菌群落结构均无明显变化;且稻田根层土或表土中的反硝化细菌群落结构在水稻各个生育期间也均无明显差异。荧光定量PCR结果显示,在水稻生长发育过程中,施用氮肥的稻田根层土或表土中的反硝化细菌nirS基因拷贝数始终显著(P<0.05)高于其对应的不施肥对照。此外,无论施用氮肥与否,根层土中的反硝化细菌nirS基因拷贝数在水稻成熟期时都会显著(P<0.05)降低;但表土中的nirS基因拷贝数在水稻各生育期间无明显变化;且水稻成熟期时施用氮肥和不施肥的稻田表土中nirS基因拷贝数都显著(P<0.05)高于根层土。同时,与对照比较施用氮肥可促进水稻增产44%。研究表明,短期定位试验中施用氮肥能够显著提高稻田土壤反硝化细菌的丰度,但对其群落结构没有明显影响。
- 宋亚娜林智敏林艳
- 关键词:氮肥反硝化细菌群落结构丰度荧光定量PCR
- 不同品种水稻土壤氨氧化细菌和氨氧化古菌群落结构组成被引量:11
- 2009年
- 本研究通过提取土壤总DNA,利用特异引物进行PCR扩增和变性梯度凝胶电泳(DGGE),研究了不同品种水稻对稻田土壤氨氧化细菌和氨氧化古菌群落结构组成的影响。结果显示:稻田土壤具有丰富的氨氧化细菌和氨氧化古菌,且氨氧化古菌种类更多;不同品种水稻氨氧化细菌群落结构组成差异较大,其中以"天A/Km71"、"闽优1027"和"Km62/1027"3个品种相似性较高,且明显不同于其余3个品种;而氨氧化古菌群落结构组成在不同土层间表现出较大差异,其中以"天A/Km71"和"Km62/1027"的表土与根际土氨氧化古菌群落组成差异最大。研究表明不同水稻品种及土壤层次对氨氧化微生物群落结构组成具有一定影响,证明氨氧化微生物尤其是氨氧化古菌在稻田土壤生态系统中占有重要地位。
- 宋亚娜林智敏林捷
- 关键词:水稻氨氧化细菌氨氧化古菌根际土群落结构PCR-DGGE
- 三株拮抗菌对根结线虫卵和幼虫的抑杀效果被引量:3
- 2001年
- 检测了 LB2、Am b3、Apb三种拮抗菌对根结线虫的抑杀效果。盆钵试验结果显示 ,3个菌株对根结线虫卵均有一定的抑制作用 ,其中以 LB2的效果最佳 ;室内毒力试验表明 ,L B2、Amb3、Apb对根结线虫的校正死亡率均达 80 %以上 ,尤以菌体 +无菌水处理的效果最佳。
- 林智敏宋娅娜宋铁英蔡宣梅郑伟文
- 关键词:拮抗菌根结线虫拮抗作用幼虫
- 一个水稻磷脂酰肌醇转运蛋白胚特异启动子及其应用
- 本发明公开了一个水稻磷脂酰肌醇转运蛋白胚特异性表达启动子及其应用。水稻磷脂酰肌醇转运蛋白OsPIP8基因胚特异性表达启动子,具有如SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列。构建启动子表达载体转化日本晴水稻,证明该启动子是水...
- 林智敏颜静宛
- 荧光定量PCR技术检测红壤稻田土壤厌氧氨氧化细菌被引量:5
- 2010年
- 利用厌氧氨氧化细菌16S rDNA基因特异引物对红壤稻田土壤总DNA进行扩增、PCR产物纯化、克隆和测序,得到属浮霉菌(Planctomycetes)的厌氧氨氧化细菌的部分16S rDNA序列(长度为502 bp)。以含该序列的重组质粒作为荧光定量PCR的标准品,对水稻不同生育期红壤稻田土壤中的厌氧氨氧化细菌数量进行检测。结果表明水稻各生育期内稻田表层和根层土壤中均存在一定数量的厌氧氨氧化细菌,且其数量随水稻生长有所变化。表土中的数量随水稻生长呈逐渐增加的趋势,根层土的数量在水稻生长前期变化不大,孕穗期后明显增加。红壤稻田土壤中存在的厌氧氨氧化细菌对稻田土壤的硝化作用可能具有一定贡献。
- 宋亚娜林智敏陈在杰刘晓强
- 关键词:红壤稻田厌氧氨氧化细菌
- 一种arf1基因3′-UTR及其在控制基因表达中的应用
- 本发明属于植物基因工程领域,提供了arf1基因3′-UTR及其在控制基因表达中的应用,arf1基因3′UTR序列如SEQ?ID?NO.1所示<b>,</b>是将编码arf1基因3′-UTR的核苷酸...
- 王锋苏军管其龙陈松彪李刚颜静宛林智敏胡太蛟
- 一种绿色安全无标记转基因水稻培育方法
- 本发明提供一种绿色安全无标记转基因水稻培育方法,构建基于水稻茎叶特异性表达外源基因与胚乳特异性表达调控位点特异性重组酶系统的水稻遗传表达载体,转化水稻愈伤组织,经检测与筛选获得绿色安全无标记的转基因水稻株系。本发明方法所...
- 胡太蛟陈爱敏苏军李刚林智敏颜静宛林艳宋亚娜王锋
- 文献传递
- 生防菌株BC2001中hcnBC基因序列的扩增及同源性测序
- 本文以BC2001菌株为试验材料,通过对BC2001菌基因组DNA的16SrRNA的扩增,可初步把BC2001菌株特性归类于hcn-4菌系。用Aca和Acb设计的引物扩增BC2001菌基因组DNA,结果属非特异性扩增,而...
- 林智敏宋亚娜郑伟文
- 关键词:基因扩增测序
- 文献传递
- BC2001生防菌对南方根结线虫生防机理的初探
- 2009年
- 研究了BC2001生防菌对南方根结线虫卵和卵囊孵化影响,及对南方根结线虫二龄幼虫的影响。结果表明BC2001对线虫分散卵的相对抑制率达87.3%、对卵囊的相对抑制率达40.50%,而对二龄幼虫的校正死亡率达92%;从显微结构上看,BC2001对卵和二龄幼虫的抑杀作用主要是通过菌体附着,引起卵和虫体内物质泡化聚集,最终消解。在人工接种条件下,BC2001菌在大田防治中对根结线虫虫口基数的相对抑制率达57.8%。
- 林智敏宋亚娜郑伟文
- 关键词:南方根结线虫