杨永华
- 作品数：7 被引量：26H指数：3
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 枯草蛋白酶E的突变体被引量：3
- 2000年
- Ser236位于横贯枯草蛋白酶E的α螺旋末端,远离催化活性中心,Ser236的突变不会对酶的活性产生大的影响。用定点突变的方法对枯草蛋白酶E的基因进行改造引入Ser236Cys,可能会形成分子间二硫键,有利于提高酶的稳定性。Ser236Cys变体酶(BP1)活性是野生型蛋白酶E的15倍,热稳定性提高3倍;进一步在其他位点引入突变的变体酶BU1(A1a15Asp/Gly20His/Ser236Cys)和BW1(Ser24His/Lys27Asp/Ser236Cys)活性都比野生型蛋白酶E低,但BW1的稳定性稍高于野生型蛋白酶E。
- 杨永华吴宇杰蒋岚朱榴琴杨胜利
- 关键词：枯草杆菌蛋白酶蛋白质工程稳定性
- 非水介质中稳定的多肽连接酶及制法和用途
- 本发明提供了一种衍生自枯草蛋白酶E的变体酶,它含有Ser221Cys、Met222Ala和Pro225Ala突变。较佳地,它还含有选自下组的突变:Asn118Ser和Ser24His/Lys27Asp/Ser236CYs...
- 杨永华蒋岚杨胜利
- 文献传递
- 枯草蛋白酶E的定点突变及其对酶性质的影响被引量：4
- 2000年
- 用定点突变的方法研究S2 2 1C/P2 2 5A ,N118S/S2 2 1C/P2 2 5A ,D6 0N/S2 2 1C/P2 2 5A和Q10 3R/S2 2 1C/P2 2 5A突变对蛋白酶活性 ,酯酶活性与蛋白酶活性之比的影响。结果表明 :S2 2 1C/P2 2 5A突变使蛋白酶活性比枯草蛋白酶E低 730 0 0多倍 ,酯酶活性与蛋白酶活性之比是Subtiligase的 3倍 ;N118S/S2 2 1C/P2 2 5A突变使蛋白酶活性和酯酶活性分别比S2 2 1C/P2 2 5A突变下降 3 6倍和 15倍 ,酯酶与蛋白酶活性之比下降 4倍 ,同时增加变体酶的热稳定性 ;D6 0N/N118S/S2 2 1C/P2 2 5A突变使蛋白酶活性比N118S/S2 2 1C/P2 2 5A突变体下降 15倍 ,但对酯酶活性几乎没有影响 ,酯酶与蛋白酶活性之比增加 14倍 ,分别是S2 2 1C/P2 2 5A突变体和Subtiligase的 3 3倍和 10 3倍 ;但是 ,Q10 3R/N118S/S2 2 1C/P2 2 5A突变使蛋白酶活性比N118S/S2 2 1C/P2 2 5A突变体增加 5倍 ,酯酶活性下降5 5倍 ,酯酶与蛋白酶活性之比下降 10 0 0倍。
- 杨永华蒋岚杨胜利吴宇杰朱榴琴
- 关键词：定点突变蛋白酶活性酯酶活性
- 青蒿素含氮衍生物的合成及药理研究
- 杨永华
- 新型枯草杆菌蛋白酶及制法和用途
- 本发明提供了衍生自枯草蛋白酶E的变体酶,它含有Ser226CYs突变。它还含有选自下组的突变:Ala15Asp/Gly20His和Ser24His/Lys27Asp。本发明的变体酶热稳定性以及在非水介质中的稳定性都显著提...
- 杨永华蒋岚杨胜利
- 文献传递
- 稀有密码子对proUK基因在大肠杆菌中高表达的影响被引量：21
- 1999年
- ＡＧＧ／ＡＧＡ密码子在ｐｒｏＵＫ基因中出现的频率高达２％，大肠杆菌中现有的编码ｔＲＮＡＵＣＵ的ａｒｇＵ基因不能满足ｐｒｏＵＫ高表达的需要。本文研究了ａｒｇＵ基因剂量对ｐｒｏＵＫ表达的影响，结果表明带有ａｒｇＵ基因的中等拷贝数质粒能促进ｐｒｏＵＫ基因表达。
- 蒋岚杨永华龚毅杨胜利
- 关键词：稀有密码子基因表达大肠杆菌
- 多肽连接酶的研究
- 杨永华
- 关键词：基因表达分离纯化
