李柳萍
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 供职机构：深圳职业技术学院应用化学与生物技术学院更多>>
- 发文基金：广东省教育部产学研结合项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 干扰素(Ⅰ型α、β,Ⅱ型γ)的分子结构和生物活性的对应关系及其临床应用被引量：4
- 2011年
- 干扰素是由干扰素诱生剂诱导生物细胞后所产生的一类高活性多功能的糖蛋白,自发现后一直处于细胞因子基础和临床研究的前沿。本文通过分析Ⅰ型干扰素α、β和Ⅱ型干扰素γ各自的分子结构,来综述对应的亚型的干扰素的生物活性和特点,同时对其临床应用尤其是最近开发的新的适应症进行了介绍和展望。
- 李柳萍杨胥微王妍
- 关键词：IFN-ΑIFN-ΒIFN-Γ分子结构生物活性
- 重组人IFN-β1a的纯化工艺研究及质量分析
- IFN-β是由干扰素诱生剂诱导生物细胞后所产生的高活性多功能蛋白，参与抗病毒、抗增殖和免疫反应，在保持体内平衡和宿主防御方面起作用，自被发现后一直是细胞因子基础和临床研究的前沿。本实验应用15L生物反应器悬浮微载体培养C...
- 李柳萍
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞分离纯化
- 文献传递
- 重组人β干扰素1a(rhIFN-β1a)单克隆抗体的制备
- 2015年
- 目的制备抗重组人β干扰素1a(rhIFN-β1a)单克隆抗体(mAb)。方法用纯化的rh IFN-β1a免疫BALB/c小鼠。取血清抗rh IFN-β1a滴度最高的小鼠的脾淋巴细胞与小鼠骨髓瘤Sp2/0细胞进行融合。经HAT筛选、有限稀释及阳性选择步骤获得稳定的杂交瘤细胞株。通过ELISA结果计算抗体的平衡解离常数(KD)并比较,选取KD最好的1株细胞通过生物反应器进行罐培养,含有抗体的培养液经超滤和蛋白G凝胶亲和层析进行纯化。结果通过融合筛选过程获得了13株稳定分泌抗rh IFN-β1a mAb的杂交瘤细胞株。KD为4.6×10-9mol/L的1E8细胞株经培养后其上清抗体滴度可达1∶5000,经过2步纯化获得了纯度可达90%的抗体。结论成功制备了纯度较高的rh IFN-β1a mAb。
- 张登央喇文军李柳萍王妍
- 关键词：杂交瘤细胞单克隆抗体生物反应器纯化
- 重组人干扰素β1a的纯化及其理化性质被引量：1
- 2013年
- 目的纯化重组人干扰素β1a(recombinant human interferonβ1a,rhIFNβ1a),并分析其理化性质。方法应用15 L生物反应器悬浮微载体培养表达rhIFNβ1a的重组CHO细胞,细胞培养收获液经超滤浓缩、蓝胶亲和层析、脱盐和CM离子交换层析纯化后,采用水泡性口炎病毒抑制法测定rhIFNβ1a的效价;Lowry法测定蛋白含量;等电聚焦电泳法测定其等电点;SDS-PAGE和高效液相色谱法测定其纯度;Western blot法分析其免疫活性;SDS-PAGE和质谱仪测定其相对分子质量;圆二色谱法分析其二级结构。结果共纯化了3批样品,纯化的rhIFNβ1a平均蛋白浓度为0.284 0 mg/ml,平均比活可达1.06×108IU/mg,纯度达95%以上,蛋白质平均回收率为58.36%,蛋白质相对分子质量为20 445.0,等电点约为6.6,免疫活性良好,二级结构与国家标准品基本一致。结论成功纯化了rhIFNβ1a,并检测了其理化性质,为建立大规模制备rhIFNβ1a的生产工艺和制造检定规程,实现产业化奠定了基础。
- 李柳萍杨胥微黄志斌喇文军王妍
- 关键词：中国仓鼠卵巢细胞纯化生物活性
