李文
- 作品数:8 被引量:21H指数:3
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- 沉默癌胚抗原相关细胞黏附分子1基因抑制SHG44人胶质瘤细胞增殖并促进其凋亡被引量:4
- 2015年
- 目的采用RNA干扰技术(RNAi)沉默癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)基因的表达,观察沉默效果及沉默CEACAM1表达后对SHG44人胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法设计并化学合成针对CEACAM1的3对小干扰RNA(siRNA),脂质体法瞬时转染SHG44细胞。流式细胞术(FCM)检测转染效率,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测siRNA转染前后SHG44细胞中CEACAM1 mRNA的表达,Western blot法检测CEACAM1蛋白的表达。CCK-8法检测SHG44细胞细胞增殖活性,annexin V-FITC/PI染色结合FCM检测SHG44细胞凋亡,Western blot法检测cleaved caspase-3和裂解型多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(cleaved PARP)的变化。结果 CEACAM1 siRNA转染效率达85%。与空白对照组和阴性对照组比较,qRT-PCR及Western blot结果显示,3组特异性siRNA转染48 h后,在mRNA和蛋白水平上CEACAM1的表达均降低,以CEACAM1-siRNA3效果最明显。siRNA组SHG44细胞的增殖能力较正常对照组明显下降,凋亡细胞比例增加。沉默CEACAM1表达可以上调cleaved caspase-3和cleaved PARP的表达。结论沉默CEACAM1基因表达可有效抑制SHG44胶质瘤细胞的增殖,促进细胞凋亡。
- 许刚柱李文张鹏丁志斌赵慧张俊锋王茂德
- 关键词:胶质瘤凋亡
- siRNA下调CEACAM1基因表达对人胶质瘤SHG44细胞增殖和凋亡的影响被引量:2
- 2014年
- 目的探讨靶向癌胚抗原相关细胞黏附分子l(CEACAM1)基因的小干扰RNA(small interfering,siRNA)对人胶质瘤细胞SHG44增殖及凋亡的影响。方法化学合成3条针对CEACAM1基因的特异性siRNA,采用脂质体法转染SHG44细胞;采用蛋白质印迹法分别检测siRNA转染后SHG44细胞中CEACAM1蛋白及cleaved Caspase-3的表达情况。分别采用细胞计数法及FCM法检测CEACAM1-siRNA对SHG44细胞增殖及凋亡的影响。前期实验分为5组:正常对照组(细胞未经任何处理),阴性对照组(转染非特异性siRNA),CEACAM1-siRNA1组,CEACAM1-siRNA2组和CEACAM1-siRNA3组。根据Western blot结果,选择一种沉默效果最佳的siRNA沉默CEACAM1基因的表达,进行后续试验。后期实验分为3组:正常对照组(细胞未经任何处理)、阴性对照组(转染非特异性siRNA)、CEACAM1-siRNA组(转染沉默效果最佳CEACAM1-siRNA)。结果与正常对照组和阴性对照组比较,Western blot结果显示,3个特异性siRNA转染48 h后,CEACAM1蛋白的表达均降低,以CEACAM1-siRNA3组抑制效果最明显(P<0.01)。后续实验中CEACAM1-siRNA组SHG44细胞的增殖受到抑制,凋亡率增加(P<0.05),并且沉默CEACAM1表达可以上调cleaved Caspase-3的表达(P<0.05)。结论 CEACAM1-siRNA能下调SHG44细胞中CEACAM1蛋白的表达,抑制SHG44细胞的增殖,诱导细胞凋亡,CEACAM1基因可能参与了脑胶质瘤的生物学行为。
- 李文张鹏许刚柱张俊锋王辉盛旭东王茂德
- 关键词:胶质瘤RNA干扰增殖凋亡
- 后颅窝肿瘤术后并发远隔部位急性硬膜外血肿临床分析被引量:2
- 2014年
- 目的探讨后颅窝肿瘤术后并发远隔部位急性硬膜外血肿的形成原因及防治措施。方法针对2006年1月—2013年6月发生的后颅窝肿瘤切除术后并发远隔部位急性硬膜外血肿6例,总结分析其临床资料。结果 5例行开颅手术清除血肿,1例采取保守治疗,6例均痊愈出院。3个月后随访,除1例呈中度残疾,其余5例均恢复良好。结论注意采取相应预防措施,术后密切观察,及时诊断并行手术治疗,是改善预后的关键。
- 李文许刚柱尚红利王茂德牟健张俊锋卢文超
- 关键词:脑肿瘤硬脑膜外血肿
- 一种颅骨钻孔引流手术引流管
- 一种颅骨钻孔引流手术引流管,由多个部分组成,所述引流管包括:引流管主体、阻尼管、折弯管主体、主引流口、副引流口、冲流管和冲流口,本实用新型的有益效果在于:通过所述颅骨钻孔引流手术引流管的结构组成,不仅能够在手术中使引流管...
- 许刚柱李文盛旭东张俊锋张鹏卢文超
- 文献传递
- RNA干扰抑制癌胚抗原相关细胞黏附分子1表达对人脑胶质瘤SHG44细胞化疗敏感性的影响被引量:10
- 2019年
- 目的采用RNA干扰技术,研究人脑胶质瘤SHG44细胞对化疗敏感性的影响。方法用脂质体法转染人脑胶质瘤SHG44细胞株,通过RT-PCR检测癌胚抗原相关细胞黏附分子1(carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1,CEACAM1)mRNA的变化,CCK-8法检测在化疗药物替莫唑胺(temozolomide,TMZ)作用下转染CEACAM1 siRNA后SHG44细胞增殖情况,分析凋亡情况。结果与正常对照组及阴性对照组比较,siRNA干扰组SHG44细胞CEACAM1基因mRNA表达受到抑制(P<0.01),经不同浓度TMZ作用后,siRNA干扰组SHG44细胞的增殖抑制明显被增强(P<0.01),而且SHG44细胞对TMZ的IC50降低(P<0.05),细胞凋亡率增加(P<0.01)。结论合成的针对CEACAM1基因的特异性siRNA能够抑制SHG44细胞中CEACAM1基因的表达,并能提高胶质瘤细胞的化疗敏感性。
- 盛旭东李文张俊锋王辉许刚柱
- 关键词:RNA干扰癌胚抗原相关细胞黏附分子1胶质瘤化疗敏感性
- RNA干扰技术下调CEACAMl基因表达对胶质瘤血管生成的影响被引量:3
- 2014年
- 目的:利用RNA干扰技术下调胶质瘤细胞中癌胚抗原相关细胞黏附分子1( CEACAM1)基因的表达情况,探讨胶质瘤细胞CEACAM1表达变化后其培养上清液诱导人脐静脉内皮细胞( HUVEC)增殖、血管生成的情况及其可能机制。方法设计并化学合成针对CEACAM1的3对siRNA,脂质体法瞬时转染SHG44细胞,收集细胞培养上清液作为条件培养基。分别采用RT-PCR检测RNA干扰后细胞中CEACAM1及血管内皮生长因子( VEGF) mRNA表达的变化情况,ELISA法检测上清液中VEGF蛋白的含量。 MTT比色法及Transwell侵袭实验检测共培养刺激后HUVEC增殖及迁移能力的变化,体外血管生成实验检测体外血管生成能力。结果与正常对照组和阴性对照组相比,转染CEACAM1-siRNA后胶质瘤细胞中CEACAM1 mRNA的表达水平下调(P<0.01),以CEACAM1-siRNA3组最为显著。 RNA干扰后SHG44细胞VEGF mRNA及上清液中的VEGF蛋白含量均减少,HUVEC的增殖受到抑制,迁移及体外血管生成能力下降。结论 CEACAM1-siRNA能够下调SHG44细胞中CEACAM1 mRNA的表达,并通过减少VEGF分泌,从而影响HUVEC的增殖、迁移和体外血管生成能力。
- 许刚柱李文张鹏王辉盛旭东王茂德
- 关键词:癌胚抗原相关细胞黏附分子1RNA干扰胶质瘤脐静脉内皮细胞血管生成
- siRNA沉默CEACAM1基因对人胶质瘤SHG44细胞生物学行为的作用被引量:1
- 2014年
- 目的探讨CEACAM1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对胶质瘤SHG44细胞增殖、体外迁移和侵袭能力的影响。方法设计并化学合成针对CEACAM1的3对siRNA,脂质体法瞬时转染SHG44细胞。Western blot检测转染后细胞中CEACAM1、β-catenin和Cyclin D1蛋白表达水平变化。CCK-8法检测转染后的细胞增殖情况,流式细胞仪检测转染后细胞周期的变化。通过Transwell小室迁移和侵袭实验,观察下调CEACAM1对SHG44细胞体外迁移和侵袭能力的影响。结果三组特异性siRNA转染48 h后,Western blot的结果显示,3个siRNA转染组CEACAM1蛋白水平均低于正常对照组和阴性对照组(P<0.01),以CEACAM1-siRNA3干扰效果最为明显。后续实验表明,与两个对照组相比较,CEACAM1-siRNA组的细胞增殖减慢,β-catenin和Cyclin D1表达水平明显减少(P<0.05)。Transwell小室迁移和侵袭实验表明CEACAM1下调后的SHG44细胞迁移和侵袭能力较正常对照组及阴性对照组明显降低(P<0.05)。结论 CEACAM1-siRNA能有效抑制人胶质瘤SHG44细胞CEACAM1蛋白的表达,并抑制细胞增殖,降低细胞的体外迁移及侵袭能力。
- 许刚柱张鹏李文赵慧吴涛张俊锋王茂德
- 关键词:CEACAM1胶质瘤生物学行为
- 硫酸镁对急性颅脑损伤患者预后影响的系统评价被引量:2
- 2014年
- 目的系统评价硫酸镁治疗急性颅脑损伤患者的疗效及其对预后的影响。方法采用Cochrane系统评价方法,计算机检索1990-2013年PubMed、Ovid、Springer、Cochrance libarary、万方、维普、CNKI等数据库中应用硫酸镁治疗急性颅脑损伤的随机对照试验,并应用RevMan 5.0软件进行Meta分析。结果共有13篇随机对照试验的文献纳入研究,累积纳入病人共1297例。Meta分析显示:硫酸镁治疗组与对照组比较,两组死亡率之间的差异无统计学意义RR=0.75,95%CI[0.51,1.10],P=0.14;而GOS评分之间的差异有统计学意义WMD=0.46,95%CI[0.08,0.85],P=0.02。结论现有研究表明:硫酸镁并不能明显降低患者的病死率,但可以提高患者的GOS评分。
- 许刚柱李文盛旭东卢文超王茂德
- 关键词:颅脑损伤硫酸镁META分析