李富骊
- 作品数：4 被引量：2H指数：1
- 供职机构：广州医学院第一附属医院更多>>
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- 靶向治疗肺癌双自杀基因HSV-TK/CD真核表达载体的构建
- 目的构建CEA启动子和CMV增强子调控表达的HSV-TK和CD基因双顺反子真核表达载体CMVE- pCEA-TK-IRES-CD。方法根据特异性引物PCR扩增获得CEA启动子(pCEA),巨细胞病毒的早期基因增强子(CM...
- 何建行李富骊邱源刘启才徐鑫熊信国
- 文献传递
- 靶向治疗肺癌双自杀基因HSV-TK/CD真核表达载体的构建被引量：2
- 2007年
- 背景与目的本研究构建CEA启动子和CMV增强子调控表达的HSV-TK和CD基因双顺反子真核表达载体CMVE-pCEA-TK-IRES-CD。方法根据特异性引物PCR扩增获得CEA启动子(pCEA),巨细胞病毒的早期基因增强子(CMVE)序列,用基因重组的方法替换载体PIRES-EGFP通用启动子pCMV,得到重组质粒CMVE-PCEA-IRES-EGFP,转染重组质粒到表达CEA的肺癌细胞株中进行绿色荧光蛋白检测,确定启动子能有效启动报告基因在CEA阳性的肺癌细胞中的表达。用PCR扩增得到目的基因HSV-TK和CD,将目的基因HSV-TK和CD亚克隆到载体CMVE-pCEA-IRES-EGFP上,得到自杀基因HSV-TK/CD双表达载体CMVE-pCEA-TK-IRES-CD。结果经酶切、PCR及DNA测序鉴定,双自杀基因真核表达载体CMVE-pCEA-TK-IRES-CD已成功构建,嵌合启动子CMVE-pCEA调控下能启动下游报告基因在CEA阳性的肺癌细胞株的表达。结论成功构建了嵌合启动子CMVE-pCEA启动的双自杀基因HSV-TK/CD真核表达载体,为下一步研究双自杀基因对于CEA阳性表达的肺癌的治疗奠定了基础。
- 李富骊何建行邱源刘启才徐鑫熊信国
- 关键词：内部核糖体进入位点真核表达
- 食管旷置治疗巨大食管气管瘘1例
- 2008年
- 病人男，21岁。13d前因交通事故而致全身多发伤。急诊行双下肢骨折内固定术及伤口缝合包扎，术后外伤恢复良好，但出现呼吸困难及进食呛咳等。气管镜及食管镜检查均示巨大食管气管瘘，从胸廓入口到隆凸上约1cm处，气管内可吸出大量脓性痰，乃行气管插管呼吸机维持通气。胸CT检查示双侧肺严重感染（图1），食管与气管共腔约7cm（图2）。经充分术前准备后于2037年2月在全麻下行手术治疗，
- 邵文龙殷伟强杨运有韦兵李树本李富骊何建行
- 癌胚抗原启动子控制基因靶向表达研究
- 2006年
- 目的构建由癌胚抗原(CEA)启动子控制报道基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达的重组表达质粒CMVE-pCEA-IRES-EGFP。了解CEA启动子靶向驱动的含目的基因的重组质粒的效率。方法构建重组质粒CMVE-pCEA-IRES-EGFP,以PCR,DNA测序及酶切进行鉴定。通过脂质体介导重组质粒CMVE-pCEA-IRES-EGFP体外分别转染A549细胞(CEA阳性)和16HBE(CEA阴性)细胞,进行绿色荧光蛋白检测分析基因表达的靶向性。结果CMVE-pCEA-IRES-EGFP分别用VSPⅠ,VSPⅠ/NheⅠ酶切后电泳分别出现大小约405bp,372bp和4110bp的片断,与预计各片断大小相符。以CMVE-pCEA-IRES-EGFP为模板PCR扩增得到CMV和CEA片段,分别连于T载体(pMD18-T)并测序,结果正确。嵌合启动子CMVE-pCEA能特异地驱动下游报告基因在CEA阳性肺癌细胞株绿色荧光表达阳性,而CEA阴性细胞株16HBE表达阴性。结论成功构建了嵌合启动子CMVE-pCEA驱动的CMVE-pCEA-IRES-EGFP重组质粒,并能在转染的CEA阳性细胞株中表达,为靶向启动双基因表达载体构件提供了实验依据。
- 邱源何建行李富骊刘启才陈汉章钟琰
- 关键词：肿瘤靶向表达
