曹廷明
- 作品数:41 被引量:40H指数:4
- 供职机构:首都医科大学附属北京胸科医院更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 11种结核分枝杆菌抗原皮肤试验反应效果评价被引量:2
- 2021年
- 目的评估11种结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)抗原用于MTB致敏后豚鼠皮肤试验反应的效果。方法选取18只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级豚鼠(雌性,体质量250~300g),按接种剂量分为高(5μg)、中(0.5μg)、低(0.1μg)3组,每组6只。采用MTB标准株(H37Rv,ATCC27294)致敏豚鼠,致敏成功后豚鼠背部去毛皮内注射结核菌素纯蛋白衍生物(TB-PPD)、重组结核杆菌融合蛋白(EC)和11种MTB抗原(包括重组抗原Rv3872、MPT64、Rv1985c、Rv0222、Rv3117、Rv3120、Rv2346c、Rv3619c、Rv3425、Rv1738和Rv2626c),各0.1ml。分别于注射24h和48h后观察皮肤试验反应,测量硬结平均直径[(横径+纵径)/2],以硬结平均直径≥5mm为阳性。分析11种MTB抗原皮肤试验反应与TB-PPD和EC的差异。结果抗原注射24h后,剂量为5μg时Rv3120、Rv3619c的皮肤试验反应阳性率分别为9/9和8/9;剂量为0.5μg时EC、MPT64的皮肤试验反应均为阳性。TB-PPD(5IU)及EC(0.5μg剂量)、MPT64(0.5μg剂量)、Rv3120(5μg剂量)和Rv3619c(5μg剂量)皮肤试验反应24h硬结平均直径[中位数(四分位数)]均大于反应48h[硬结平均直径分别为:9.00(7.00,11.00)mm和6.50(5.50,8.25)mm、13.00(12.75,14.25)mm和9.00(8.00,9.75)mm、9.50(8.50,12.50)mm和8.50(5.50,9.50)mm、8.50(6.25,9.25)mm和5.00(0.00,5.50)mm、6.50(5.50,8.25)mm和3.50(1.50,4.75)mm],差异均有统计学意义(Z值分别为-2.494、-2.677、-2.207、-2.673、-2.670;P值分别为0.013、0.007、0.027、0.008、0.008)。皮肤试验反应24h时,MPT64(0.5μg剂量)、Rv3120(5μg剂量)和Rv3619c(5μg剂量)与TB-PPD(5IU)硬结平均直径接近,差异均无统计学意义(H值分别为-0.496、0.819和1.714,P值分别为1.000、1.000和0.865);MPT64(0.5μg剂量)与EC(0.5μg剂量)皮肤试验反应情况接近,差异无统计学意义(H=2.288,P=0.221);Rv3120(5μg剂量)和Rv3619c(5μg剂量)硬结平均直径均小于EC(0.5μg剂量),差异均有统计学意义(H值分别为3.795和4.690,P值分别为0.001和0.000)。结论M
- 段惠娟褚洪迁孔成成戴广明曹廷明孙照刚
- 关键词:分枝杆菌结核抗原皮肤试验
- KNCN蛋白在结核诊断试剂中的应用
- 本发明属于结核病诊断领域,具体的涉及一种KNCN重组蛋白在结核诊断中的应用,所述KNCN重组蛋白有能够特异、高效的捕获多种结核抗原的特性,本发明利用KNCN蛋白可以同时捕获结核患者标本中几种或十几种结核抗原的性能,通过重...
- 曹廷明盛钢孙照刚褚洪迁戴广明孙宏张婧芳
- 与人类蛋白NRF1相互作用的结核蛋白及其应用
- 本发明公开了与人类蛋白NRF1相互作用的结核蛋白及其应用。本发明提供了人类蛋白NRF1在如下任一中的应用:(A1)诊断结核病;(A2)制备用于诊断结核病的产品。本发明利用基于MTB结核分枝杆菌蛋白质组芯片的蛋白‑蛋白互作...
- 曹廷明吕翎娜张宗德
- 文献传递
- 血清结核分枝杆菌复苏因子抗体检测方法在肺结核诊断中的应用价值被引量:6
- 2014年
- 肺结核是一种慢性传染病,在患病过程中针对MTB各种抗原可产生多种特异性抗体,因此,血清学检测已成为肺结核诊断的辅助方法,近几年免疫学诊断逐渐引起人们的重视,人们更加关注从MTB分泌蛋白中寻找具有诊断价值的特异性抗原.MTB复苏因子(Rpf)蛋白质是迄今发现的第1个能使休眠MTB恢复生长繁殖能力的分泌型蛋白,可引起较强的免疫应答[1-2].我们将复苏因子抗体作为肺结核诊断的标志物,结合已成熟应用的肺结核辅助诊断的免疫印迹法建立了血清MTB复苏因子IgG抗体(RpfE-Ab)检测的新方法,并探讨其在肺结核诊断中的应用价值.
- 邢爱英刘忠泉杜博平孙琦贾红彦魏荣荣刘洋曹廷明杜凤娇古淑香张宗德
- 关键词:肺结核诊断血清学检测抗体检测结核分枝杆菌慢性传染病免疫学诊断
- Rv0253蛋白在分离结核分枝杆菌中的应用
- 本发明公开了Rv0253蛋白在分离结核分枝杆菌中的应用。本发明的发明人基于<Image file="DDA0002387124080000011.GIF" he="54" imgContent="drawing" img...
- 曹廷明孙照刚潘丽萍吕翎娜贾红彦褚洪迁戴广明张宗德
- 文献传递
- 与人类蛋白SMAD2相互作用的结核蛋白及其应用
- 本发明公开了与人类蛋白SMAD2相互作用的结核蛋白及其应用。本发明提供了人类蛋白SMAD2在如下任一中的应用:(A1)诊断结核病;(A2)制备用于诊断结核病的产品。本发明利用基于MTB结核分枝杆菌蛋白质组芯片的蛋白‑蛋白...
- 曹廷明吕翎娜张宗德
- 结核分枝杆菌Rv1512基因的特异性和克隆表达被引量:2
- 2011年
- 目的鉴定结核分枝杆菌Rv1512基因的特异性,克隆表达该基因并获得其重组蛋白。方法设计Rv1512基因的特异性引物,并鉴定其特异性。构建pET30a(+):Rv1512重组质粒,阳性克隆转化入大肠杆菌BL21。经Ni+-NTA层析柱纯化融合蛋白,通过SDS-PAGE鉴定该蛋白及其纯度。结果结核分枝杆菌Rv1512基因的特异性被证实;经测序分析证实Rv1512原核表达质粒构建正确,SDS-PAGE结果显示在40 kD处呈现单一蛋白条带。结论结核分枝杆菌Rv1512基因具有较好的特异性;成功构建表达载体pET30a(+):Rv1512并获得重组蛋白,为辅助诊断结核分枝杆菌的感染奠定基础。
- 曹廷明贾红彦杜凤娇刘洋刘忠泉马玙张宗德
- 关键词:结核分枝杆菌特异性重组蛋白质
- C5orf24蛋白在结核诊断试剂中的应用
- 本发明属于结核病诊断领域,具体的涉及一种C5orf24重组蛋白在结核诊断中的应用,本发明利用C5orf24蛋白可以同时捕获结核患者标本中多种结核抗原能力的基础上,通过重组C5orf24蛋白病表达纯化,以此来检测捕获结合抗...
- 曹廷明孙照刚褚洪迁戴广明盛钢
- 结核分枝杆菌Rpf-DNA疫苗对Mtb感染小鼠免疫保护作用的研究
- 2012年
- 目的评价Mtb复苏因子DNA疫苗(resuscitation-promoting factor DNA,Rpf-DNA)对Mtb感染宿主的免疫保护作用。方法构建复苏因子D(Rpf D-DNA)和复苏因子E(Rpf E-DNA)质粒疫苗,180只BALB/c小鼠(4周龄)分为6组,每组30只,分别用空质粒、Rpf D-DNA质粒、Rpf E-DNA质粒、BCG、生理盐水免疫,H37Rv标准株气溶胶感染。检测血清复苏因子(Rpf)抗体、IFN-γ;RpfD、E刺激淋巴细胞后进行淋巴细胞增殖、细胞杀伤实验;检测细胞上清IFN-γ、IL-12、IL-2;对肺组织进行病理学检测和细菌负荷(CFU)计数。结果 (1)疫苗免疫组血清Rpf D、Rpf E抗体水平:Rpf D组0.32±0.1,Rpf E组0.39±0.1,BCG组0.02±0.01,空质粒组0.01±0.0,生理盐水组0.09±0.04,空白对照组0.03±0.01,RpfD组与RpfE组抗体水平与BCG组、空质粒组、生理盐水组、空白对照组比较差异有显著统计学意义,F值分别为Rpf D:45.6,43.2,45.1,45.7;Rpf E:51.6,53.6,51.0,52.2;P值均<0.01。血清IFN-γ:Rpf D组(43.9±24.8)pg/ml,Rpf E组(45.9±21.0)pg/ml,BCG组(21.0±11.0)pg/ml,空质粒组(7.9±4.9)pg/ml,生理盐水组(4.7±2.1)pg/ml,空白对照组(5.8±4.7)pg/ml,Rpf D、Rpf E质粒组与BCG组比较差异有统计学意义(F值分别为Rpf D:10.2;Rpf E:12.4;P值均<0.05),与空质粒组、生理盐水组、空白对照组比较差异有显著统计学意义,F值分别为Rpf D:15.6,17.8,17.3;Rpf E:17.5,21.1,20.7;P值均<0.01。(2)淋巴细胞增殖实验CCK-8:Rpf D组176.0±4.2,Rpf E组183.0±4.3,BCG组101.0±1.1,空质粒组100.0±6.8,生理盐水组104.0±8.4,空白对照组116.0±2.2,RpfD、RpfE质粒组与BCG组、空质粒组、生理盐水组、空白对照组比较差异有统计学意义,F值分别为Rpf D:9.5,10.1,10.0,9.0;Rpf E:11.2,12.9,11.7,10.3;P值均<0.05。细胞杀伤实验:Rpf D组32.0±3.2,Rpf E组30.0±4.2,BCG组16.0±5.9,空质粒组3.3±1.5,生理盐水组6.7±0.5,空白对照组7.3±3.5,Rpf D、Rpf E质粒组与BCG组、空质粒组、生理盐水组、空白对照组比较差异有统计学意义,F值分别为Rpf D:8.
- 邢爱英刘忠泉刘洋贾红彦李自慧郑晓静曹廷明杜凤娇杜博平古淑香张宗德
- 关键词:分枝杆菌细菌蛋白质类细胞因子类
- 实时荧光定量PCR检测不同结核标本及其联合玻璃珠磨菌法检测价值的初步研究被引量:7
- 2022年
- 目的:探索实时荧光定量PCR(qRT-PCR)联合玻璃珠磨菌法对检测不同临床标本中结核分枝杆菌菌载量的优化作用。方法:回顾性搜集2008年1月1日至2016年12月31日首都医科大学附属北京胸科医院住院和门诊诊治的疑似结核病患者11570份不同临床标本的qRT-PCR检测结果并进行分析,主要包括痰液1487份、脓液273份、脑脊液1391份、气管(支气管)肺泡灌洗液41份和血液4650份等。再通过建立伪随机函数的方法从中选取82份临床诊断为肺结核的痰液标本,对其进行玻璃珠(直径0.3 mm)振荡磨菌前后qRT-PCR定量检测效果分析。结果:11570份不同临床标本的总检测阳性率为12.16%(1407/11570)。其中,气管(支气管)灌洗液的检出率最高[36.59%(15/41)],以门诊患者来源的阳性率最高[43.48%(10/23)];其次是脓液标本[35.53%(97/273)],以住院患者来源的阳性率最高[36.26%(95/262)];痰液标本位居第三[30.33%(451/1487)];其他标本阳性率介于10.43%(485/4650)~15.03%(209/1391)之间。对选取的82份痰标本行5 min的玻璃珠磨菌处理后,qRT-PCR检测的核酸浓度[44.45(9.05,71.62)×10^(7)拷贝/ml]较处理前[4.03(1.87,5.92)×10^(7)拷贝/ml]明显提高,差异有统计学意义(Z=2.120,P=0.016)。其中,有28份(34.15%)痰标本提高了菌株数量级,尤其是21份含菌量为10^(2)拷贝/ml的临床痰标本经振荡研磨后有14份(66.67%)提升到了10^(3)拷贝/ml菌量数量级,使阳性检出率由磨菌处理前的60.98%(50/82)提高到磨菌处理后的78.05%(64/82)。结论:qRT-PCR对灌洗液、脓液和痰液标本中结核分枝杆菌的检出率高,在其他标本中检出率低。采用玻璃珠振荡磨菌处理后可提高临床标本的阳性检出率。
- 戴广明王芬曹廷明褚洪迁黄海荣孙照刚
- 关键词:分子诊断技术