曲悦
- 作品数:10 被引量:36H指数:4
- 供职机构:辽宁医学院更多>>
- 发文基金:江西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 水产饲料中棉籽饼粕替代鱼粉的研究进展被引量:8
- 2004年
- 棉籽饼粕是我国除豆饼之外的重要饼粕类蛋白饲料,占全国各类饼粕总量的40%以上。棉籽(仁)饼粕粗蛋白含量较高,蛋白质品质上乘,富含磷、铁、镁等矿物元素。棉籽饼粕对水产动物的促生长效果较鱼粉差,改善效果的措施有采取有效措施去毒,培育低酚棉,改进制油工艺等。
- 高立海曲悦梁海平
- 关键词:水产饲料棉籽饼粕鱼粉替代物营养价值制油工艺
- 三肽囊素(Bursin)同功鸡源单链抗体噬菌体展示文库的构建和初步筛选
- 曲悦
- 关键词:三肽囊素抗独特型抗体单链抗体噬菌体抗体库
- 噬菌体展示三肽囊素(Bursin)模拟肽的研究Ⅰ.模拟肽制备及活性的初步鉴定
- 本研究分离纯化抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2),利用噬菌体环7肽库筛选抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2)结合肽,测定阳性克隆ssDNA序列,并与Bursin序列进行同源性分析,通过ELISA法检...
- 谌南辉赵明军邬向东曲悦王萍
- 关键词:三肽囊素噬菌体展示模拟肽单克隆抗体免疫调节
- 文献传递
- 鸡脾细胞总RNA的提取及其V_H、V_L基因的扩增被引量:4
- 2004年
- 由鸡脾脏淋巴细胞中提取总RNA,反围录合成cDNA第一链,以cDNA为模板,根据鸡抗体V_H、V_L基因中的5’端和J端序列,设计并合成体外扩增V_H、V_L基因的两对引物,进行RT-PCR,成功地扩增出V_H、V_L基因片段。为鸡源ScFv噬菌体库的构建打下基础。
- 曲悦邬向东谌南辉
- 关键词:脾细胞RNA提取聚合酶链反应
- 鸡源Bursin-ScFv噬菌体展示文库的构建及初步筛选被引量:1
- 2008年
- 本研究利用抗三肽囊素(Bursin)单克隆抗体免疫SPF来航鸡,获得产生抗独特型抗体的脾细胞,从中提取总RNA,经反转录合成cDNA第一链。以cDNA第一链为模板,根据来航鸡IgG抗体重链(VH)、轻链(VL)可变区基因FR设计引物,进行PCR扩增。在体外扩增出该抗体的可变区VH和VL基因(大小分别约为370和320 bp)。通过重叠延伸反应(SOE),以(Gly4Ser)3为连接肽,将VH和VL基因连接成为VH-Linker-VLScFv,将ScFv DNA与噬菌粒载体pHEN1的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13K07感染后,获得重组的鸡源抗三肽囊素独特型抗体全套单链噬菌体抗体库。并测得该库容量约为5×105,噬菌体中ScFv基因的插入率为80%,用辅助噬菌体援救后,得到滴度为1011PFU/mL的初级噬菌体抗体库。用抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2)进行4轮"吸附-洗脱-扩增"的淘筛,出现特异性富集。经ELISA、动物试验表明所筛选的5个阳性克隆可与抗Bursin单克隆抗体(2F9-4/HU2)特异性结合,并能促进抗体的生产。
- 邬向东曲悦谌南辉王萍何后军
- 关键词:三肽囊素抗独特型抗体可变区重链噬菌体抗体库
- 三肽囊素抗独特型抗体可变区基因库的建立被引量:1
- 2003年
- 利用抗bursin单克隆抗体免疫SPF来航鸡 ,获得抗独特型抗体的产生细胞 ,从中提取总RNA ,经反转录合成cDNA第一链。以cDNA第一链为模板 ,根据鸡抗体重、轻链基因设计引物 ,进行PCR扩增。在体外成功地扩增出该抗体的可变区重链和轻链基因。
- 邬向东曲悦袁汉英谌南辉
- 关键词:三肽囊素抗独特型抗体反转录PCR扩增家禽法氏囊
- 双低菜籽粕在动物生产中的应用被引量:11
- 2004年
- 高立海曲悦
- 关键词:菜籽粕植物蛋白质饲料资源饲用价值
- 噬菌体展示三肽囊素模拟肽的研究被引量:7
- 2005年
- 本研究分离纯化抗Bursin单克隆抗体(2F9_4/HU2),利用噬菌体环7肽库筛选抗Bursin单克隆抗体(2F9_4/HU2)结合肽,测定阳性克隆ssDNA序列,并与Bursin序列进行同源性分析,通过ELISA法检测其结合活性和竞争ELISA法检测其抗原性,以Busin为对照,验证阳性克隆(№4)在鸡体内的生物学效应。序列分析表明,“LNXT”短肽序列可能为结合抗Bursin单克隆抗体(2F9_4/HU2)的保守序列,但与Bursin无同源性;噬菌体(№1)在序列中含有K、H、G。ELISA和竞争ELISA检测,表明Bursin对阳性克隆1、4、5、6号和抗Bursin单克隆抗体(2F9_4/HU2)的结合有一定的抑制作用:生物学活性初步验证表明,阳性克隆(№4)与Bursin具有类似作用,能促进抗体产生,有望成为一种模拟Bursin新型的免疫增强剂。
- 赵明军谌南辉王萍曲悦
- 关键词:三肽囊素噬菌体展示模拟肽活性
- 三肽囊素(Bursin)同功单链抗体(ScFv)的构建研究 Ⅰ.鸡脾脏组织细胞总RNA提取方法研究被引量:1
- 2003年
- 分离纯净、完整的细胞总RNA对于分子克隆的实验十分重要 ,但自然界中RNA酶广泛存在且稳定性很高 ,RNA极易被RNA酶污染而降解。快速提取RNA可以减少RNA酶污染的机会而成为RNA提取的首选方法。选用 3种快速RNA提取法 (方法I、II、III) ,发现方法III最好 ,电泳可见 3个RNA条带清晰无降解 ,纯度也最高 ;方法II较差 ,虽然操作时间最短 ,但却易降解 ,而且电泳时多出一条明显的DNA条带 ;方法I也能提取到较好的RNA ,但纯度不如方法III。
- 邬向东曲悦谌南辉
- 关键词:组织细胞RNA酶
- 水产饲料中棉籽饼粕替代鱼粉的研究被引量:2
- 2004年
- 高立海曲悦梁海平
- 关键词:水产饲料棉籽饼粕鱼粉营养价值去毒