方旭
- 作品数：21 被引量：188H指数：9
- 供职机构：大连医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人骨形态发生蛋白2在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化被引量：6
- 2009年
- 背景:骨形态发生蛋白是一类调节骨组织发育的生长因子,其中骨形态发生蛋白2诱骨活性最强,在骨组织工程研究中需要大量的骨形态发生蛋白2。目的:克隆表达骨形态发生蛋白2基因,并进行蛋白表达及蛋白纯化定量。设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-05/07在宝生物工程(大连)有限公司开放实验室完成。材料:表达载体pET28aVector及相应的宿主细胞E.coliBL21(DE3)购于Novagen公司;分子伴侣质粒pTF16、pGro7、pKJE7购于宝生物工程(大连)有限公司。方法:利用基因重组技术,优化并人工合成骨形态发生蛋白2基因,亚克隆至含T7启动子的原核表达载体pET28a中,构建表达载体pET-BMP。将重组质粒pET-BMP与3种含分子伴侣质粒共转入宿主菌E.coliBL21(DE3)中,用IPTG进行诱导表达。菌体经超声波破碎,镍柱亲和层析纯化并定量。主要观察指标:①3种表达质粒的表达及可溶性检测及表达上清的westernblotting检测。②pET-BMPg的纯化。结果:在表达宿主菌中,骨形态发生蛋白2基因获得了高效表达,其中一组为可溶性表达,表达产物经亲和层析纯化后,可溶性表达量达12.18mg/L培养基。结论:人骨形态发生蛋白2基因能在pET表达系统中得到高效可溶性表达。
- 孙传秀赵文志何盛为方旭米立东杜广宇张路
- 关键词：骨形态发生蛋白2基因表达
- 颈椎前路手术的并发症及其处理被引量：15
- 2007年
- 目的:探讨颈椎前路手术的并发症及其处理方法。方法:2000年5月至2006年5月共行颈椎前路手术523例,手术方式采用环锯减压+cage或植骨+带锁钢板固定278例;椎体次全切除或颈前路开槽减压+钛网植骨+带锁钢板固定245例。术后随访403例,随防内容包括症状及体征的改善情况,并每月进行一次颈椎X线检查。结果:随访6个月至6年,平均2年10个月,81例患者出现并发症。其中猝死2例,喉头痉挛、气管痉挛,堵塞呼吸道可能为其死亡原因;术后切口皮下血肿3例,经床头紧急清除血肿后呼吸困难解除;颈脊髓或神经根损伤6例,经脱水治疗后恢复满意;喉返神经损伤1例,喉上神经损伤3例,3个月内基本恢复正常;切口感染2例,经抗感染、换药治疗后愈合;脑脊液漏2例,经局部适度加压后愈合;钢板螺钉松动钛网移位1例,经再次手术取出钢板,重新放置钛网植骨,钢板重新固定,3个月后植骨融合;植骨未愈合2例,均再次手术植骨钢板固定,3个月后植骨融合;内置物下沉、椎间高度丢失13例,经颈领固定,3-6个月内均获得椎间融合;相邻节段退变19例,无症状未特殊处理;颈部疼痛27例,给予口服非甾体药物,21例患者疼痛缓解。结论:颈椎病前路手术可发生多种并发症,应积极预防及进行相应的处理。
- 方旭赵文志郑连杰
- 关键词：颈椎病手术并发症
- 振动应力刺激骨髓间充质干细胞修复兔骨缺损被引量：3
- 2011年
- 背景:研究证实,力学因素可调控、诱导骨髓间充质干细胞定向分化为骨细胞,提高分化效率。目的:观察振动应力刺激对兔骨缺损微环境中骨髓间充质干细胞移植修复肱骨骨缺损成骨分化能力的影响。方法:24只兔按随机数字表法分为非振动单纯骨基质明胶组、非振动骨基质明胶+骨髓间充质干细胞复合植入组、振动骨基质明胶+骨髓间充质干细胞复合植入组,每组8只,建立兔肱骨骨缺损模型。振动组兔置于振动平台,以0.3G的加速度,25Hz,正弦波型,1次/d,30min/次,持续4周施加振动刺激。结果与结论:造模4周后,大体观察结果显示,振动组骨痂生长良好,组织学切片显示其新生骨量较多,可见大量成骨细胞,骨缺损与断端形成骨性连接;振动组Ⅰ型胶原蛋白、RUNX2mRNA表达水平明显高于非振动组。提示振动应力刺激可促进骨缺损微环境中骨髓间充质干细胞的成骨分化能力,提高Ⅰ型胶原蛋白、RUNX2mRNA表达水平,从而加速骨缺损修复的进程。
- 张路赵文志何盛为方旭米立东孙雪刚杜广宇孙传秀
- 关键词：骨缺损RUNX2
- 建立全腰椎有限元接触模型被引量：47
- 2010年
- 目的应用自编软件和HyperMesh软件并结合接触理论建立全腰椎有限元模型。方法以正常自愿者全腰椎节段螺旋CT扫描图像的基础,利用自编软件和HyperMesh软件,生成全椎体的骨性有限元模型,补充建立终板、关节突软骨、椎间盘及韧带等结构,建立全腰椎有限元分析模型。引入接触理论处理上下关节突之间的面-面接触问题。结果所建模型几何外型较真实,组织结构更完整,外观表现更细腻。生理载荷下的模拟结果与体外生物力学实验结果更加吻合。结论利用自编软件和HyperMesh软件可以提高有限元模型建立的速度和准确度,引入接触理论可提高有限元模型的可靠性和真实性。
- 苏晋赵文志陈秉智李斌何盛为方旭
- 关键词：有限元分析腰椎
- 小腿严重开放性骨折伴广泛软组织缺损的治疗
- 2009年
- 目的探讨小腿严重开放性骨折伴广泛软组织缺损的治疗经验。方法本组所有病例均于入院后行清创术，同时行骨折复位固定治疗，根据全身情况及创伤局部条件，择期行软组织缺损的修复。其中清创后骨折外支架固定25例，内固定5例，牵引1例。采用31例11种组织瓣移植修复小腿软组织缺损，皮瓣最小8cm×4cm，最大22cm×15cm。结果组织瓣移植后成活30例，失活1例。软组织缺损得以修复。骨折随访10个月-6年，28例于伤后2．5—8个月愈合（平均4．5个月），延迟愈合2例，骨不连1例，均经再手术治愈。结论对小腿严重开放性骨折伴软组织缺损，采用外固定支架固定骨折，同时采用显微外科技术，以组织瓣移植修复软组织缺损可取得良好的效果。
- 孙传秀赵文志何盛为方旭米立东杜广宇张路
- 关键词：组织瓣小腿开放性骨折软组织缺损
- 老年尿毒症患者股骨颈骨折的手术治疗被引量：1
- 2011年
- 目的探讨老年尿毒症合并股骨颈骨折患者行人工股骨头置换术的疗效。方法对21例老年尿毒症合并股骨颈骨折行人工股骨头置换。结果 20例获得3～36个月随访,平均18个月。Harris评分:优8例,良9例,可2例,差1例。结论对于尿毒症合并股骨颈骨折的老年患者,经周密的围手术期处置与治疗,行人工股骨头置换术可取得满意效果。
- 米立东赵文志何盛为方旭张路孙传秀杜广宇孙雪刚
- 关键词：尿毒症股骨颈骨折围手术期外科手术
- 记忆合金聚髌器与张力带钢丝治疗髌骨粉碎性骨折疗效比较被引量：1
- 2008年
- 目的比较记忆合金聚髌器与张力带钢丝内固定治疗髌骨粉碎性骨折的临床疗效。方法回顾性分析自2002年6月至2007年6月的84例髌骨粉碎性骨折手术治疗的患者，其中48例采用记忆合金聚髌器内固定治疗，另36例采用张力带钢丝内固定治疗。比较两种技术的临床疗效。结果本组病例全部获得随访6～24个月。根据胥少汀综合评分法评分，记忆合金聚髌器组优良率为91．6％，克氏针张力带钢丝组优良率为86．1％，两组结果无显著性差异（P〉0．05）；临床康复时间，记忆合金聚髌器组平均8周，克氏针张力带钢丝组平均10．5周，两组结果有显著性差异（P〈0．05）。结论治疗髌骨粉碎性骨折采用记忆合金聚髌器内固定治疗疗效满意，采用张力带钢丝内固定治疗可以获得与记忆合金聚髌器内固定治疗相似的疗效，但临床康复时间较长。
- 孙传秀赵文志何盛为方旭米立东杜广守张路
- 关键词：记忆合金张力带钢丝髌骨粉碎性骨折内固定
- 人工股骨头置换与内固定治疗高龄股骨转子间骨折疗效的比较被引量：16
- 2010年
- 目的:比较人工股骨头置换与内固定治疗高龄股骨转子间骨折并探讨其临床适应证。方法:以"人工髋关节,转子间骨折,内固定"为中文关键词;"Hip replacement,Intertrochanteric Fractures,Internal Fixations"为英文关键词。采用计算机检索1969-01/2009-10相关文章。纳入与有关生物材料与组织工程材料相关的文章;排除重复研究或Meta分析类文章。以10篇文献为重点进行了讨论。临床验证选择大连医科大学第二附属医院骨外科收治的168例75岁以上不稳定型股骨转子间骨折的患者,分别采用人工股骨头置换和内固定方法治疗。分别对两组患者的手术时间、失血量、术后并发症、卧床时间、髋关节功能恢复结果、住院时间进行比较。结果:高龄股骨转子间骨折临床上多以采用内固定为主,对是否行人工股骨头置换仍存在争议。目前,人工髋关节假体材料主要有钴合金和钛合金、聚乙烯、多孔聚砜类物、多缩醛类树脂、碳素等材料。主要采取的固定方式有:骨水泥型假体、生物型假体、骨水泥型与生物型假体互补及现代骨水泥技术。经临床验证,人工股骨头置换在手术时间、置换后并发症、卧床时间、住院时间均好于内固定方法(P<0.05);置换后1,3,6个月髋关节功能恢复优于内固定方法(P<0.05),置换后12个月两种方法差异无显著性意义(P>0.05)。结论:人工股骨头置换治疗高龄不稳定型股骨转子间骨折具有置换后恢复好、能早期负重、并发症少等近期疗效好的优点,其远期并发症有待观察和进一步研究解决。,
- 杜广宇赵文志何盛为方旭米立东孙传秀张路孙雪刚
- 关键词：股骨转子间骨折关节置换内固定假体材料
- 兔骨保护素全长基因的获取被引量：2
- 2012年
- 获得兔骨保护素(OPG)基因并分析序列。从兔肱骨中提取总RNA,逆转录形成cDNA,用5′RACE策略扩增OPG基因,经琼脂糖凝胶电泳鉴定,并测序及进行序列分析。兔OPG基因全长1 540bp,编码400个氨基酸,与人OPG氨基酸序列相比,同源性为89%,而与大鼠等其它动物的同源性则在85%左右。5′RACE法成功获得了兔OPG基因的真实序列,为OPG基因的功能研究奠定了良好基础。
- 孙传秀赵文志何盛为方旭
- 关键词：骨保护素RACE全长CDNA序列
- 人工椎间盘植入术后颈椎邻近节段生物力学变化的有限元分析被引量：19
- 2010年
- 目的研究人工椎间盘植入术后邻近节段的运动范围及椎间盘应力改变。方法将接触问题引入生物建模,建立正常全颈椎有限元模型,模拟C5/6椎间植骨融合和C5/6人工间盘植入,分析两种状态下其相邻节段的运动范围及椎间盘的应力改变。结果(1)所建立模型包含了韧带、关节囊及其他软组织结构,而且真实细腻,准确度高;(2)椎间植骨融合术后邻近椎间隙运动范围增加,相应椎间盘应力明显增大,上位节段髓核与纤维环的应力约增加70%,而下位节段髓核与纤维环应力约增加40%;(3)人工间盘植入后颈椎运动范围除仅后伸受限(P(0.05)外,邻近节段椎间盘应力增加不超过10%。结论植入的颈椎人工间盘可在一定程度上降低相邻椎体节段的应力,且有利于改善颈椎的活动度。
- 李斌赵文志陈秉智苏晋何盛为方旭
- 关键词：颈椎生物力学植骨融合
