徐智圣
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
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- 嗜盐古菌蛋白酶SptA的C端延伸区功能及分泌机制研究
- 嗜盐蛋白酶SptA是嗜盐古菌Natrinema sp.J7-2分泌的一种胞外丝氨酸蛋白酶,其前体由信号肽、N端前肽、催化功能区及C端延伸区组成。本研究利用缺失突变将SptA的C端延伸区进行截短,并在嗜盐古菌宿主中进行表达...
- 徐智圣杜欣唐伟唐兵唐晓峰
- 文献传递
- 嗜盐古菌蛋白酶SptA的C端延伸区功能及分泌机制研究
- 本研究利用缺失突变将SptA的C端延伸区进行截短,并在嗜盐古菌宿主中进行表达。对各重组酶的性质表征结果表明,C端延伸区并非SptA分泌和正确折叠所必需,但C端延伸区的缺失会导致SptA酶活性降低以及更容易发生自降解。同时...
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- 关键词：嗜盐古菌蛋白酶基因缺失分泌机制
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- 嗜盐古菌蛋白酶基因sptA和F7sptA在大肠杆菌中表达产物复性的初步研究
- 我们从嗜盐古菌Natrinema sp.J7及其突变菌株F7中分别克隆得到了蛋白酶基因sptA和F7sptA,它们编码的SptA和F7SptA酶原均由信号肽、N端前肽、成熟酶区和C端延伸区组成。序列分析显示酶原F7Spt...
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- 嗜盐古菌蛋白酶SptA的c端延伸区功能及分泌机制研究
- 嗜盐蛋白酶SptA是嗜盐古菌Natrinema sp.J7-2分泌的一种胞外丝氨酸蛋白酶,其前体由信号肽、N端前肽、催化功能区及C端延伸区组成。本研究利用缺失突变将SptA的C端延伸区进行截短,并在嗜盐古菌宿主中进行表达...
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- 家蚕抗菌肽CD高效表达及其抗BmNPV感染作用被引量：5
- 2006年
- 通过大肠杆菌JM109诱导家蚕,提取其脂肪体总mRNA后,通过RT-PCR得到cDNA,根据GenBank上家蚕抗菌肽CecropinD的cDNA序列,设计并合成引物,然后PCR扩增得到CecropinD肽基因并克隆到pGEM-T载体中,经过EcoRΙ和XhoI酶切,连接并将CecropinD肽基因插入pET32a表达载体中。用重组质粒pET32a-ecropinD转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下,融合蛋白Trx-CecropinD以可溶形式得到高效表达,经SDS-PAGE检测显示分子量为23kDa与预期大小相符,表达量约为总蛋白的30%。融合蛋白经Ni2+柱纯化后通过肠激酶切割后释放为Trx(18kDa)和CecropinD(5kDa),最后通过超滤管分离得到重组抗菌肽。通过抑菌实验测得重组CecropinD对于革兰氏阴性及阳性菌均有抑菌活性。并将重组CecropinD与家蚕病毒BmNPV作用混合4h后,一起投喂家蚕,发现病毒感染力有明显降低,说明其有抗病毒感染作用。
- 李伟灿孟小林徐进平王健鲁伟徐智圣
- 关键词：抗菌肽活性表达
