徐威
- 作品数：22 被引量：26H指数：2
- 供职机构：浙江大学医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省卫生厅优秀青年人才基金浙江省科技厅重点资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 代谢组学在重型肝炎研究中的应用初探
- 目的:中国是病毒性肝炎发病区,每年死于肝病的患者超过50余万,重型肝炎以其高病死率而严重危害着人的健康。但重型肝炎的发病机制、病理生理、诊断和预后的判断尚缺少有效的手段。中小分子物质在重型肝炎发病过程中意义重大,但近来没...
- 盛国平虞科徐威刘小丽曹红翠程翼宇李兰娟
- 文献传递
- SV40LT抗原介导的人源性肝细胞系的构建
- 目的:建立人源性永生化肝细胞系,为生物人工肝和肝细胞移植等提供合适的细胞源.方法:利用SV40LTag基因和真核表达载体pcDNA3.1(-)经脂质体转染至来源于25岁男性脑死亡者供肝的原代培养细胞,使其永生化,进一步鉴...
- 李兰娟李君曹红翠徐威俞云松盛吉芳陈亚岗
- 关键词：肝细胞系永生化脂质体转染RT-PCR
- 文献传递
- SV40LT抗原介导的人源性肝细胞系的构建被引量：2
- 2004年
- 目的 :建立人源性永生化肝细胞系 ,为生物人工肝和肝细胞移植等提供合适的细胞源。方法 :利用 SV4 0 L Tag基因和真核表达载体 pc DNA3.1(- )经脂质体转染至来源于 2 5岁男性脑死亡者供肝的原代培养细胞 ,使其永生化 ,进一步鉴定其形态学特征和生物学功能。结果 :经 G4 1870 0～ 30 0μg/ ml筛选 ,4 2天后获一抗 G4 18永生化肝细胞系。该细胞系呈单层贴壁、上皮细胞样形态生长 ,体外培养可无限传代 ,具有分泌 AL B、ALT、AST及 LDH的功能 ,超微结构观察发现 ,转染肝细胞具有原代培养肝细胞的大多数典型特征 ,如较大的细胞核、胞浆内含有丰富的糖原颗粒、大量的线粒体和粗面内质网等。经 RT- PCR和 Western blot检测 ,转染肝细胞的 ALB m RNA阳性和细胞色素 P4 5 0 2 E1阳性。结论 :新建人源性肝细胞系与原代培养肝细胞具有类似的形态学特征和生物学功能。
- 李兰娟李君曹红翠徐威俞云松盛吉芳陈亚岗
- 关键词：原代培养肝细胞原代培养细胞PCDNA3脂质体转染超微结构观粗面内质网
- 人肝再生增强因子的克隆、表达、纯化及结构分析
- 肝脏是再生能力很强的人体器官,有多种细胞因子参与调节这一过程,对肝再生调控因子的研究一直是一个热点,迄今己发现包括肝细胞生长因子(GHF)、转化生长因子-α(TGF-α)、表皮生长因子(EGF)、胰岛素等二十余种来自肝内...
- 盛吉芳俞海英李君周林福曹红翠徐威李兰娟
- 关键词：酶切位点肝再生人肝再生增强因子种属特异性组氨酸标签急性肝损伤
- 文献传递
- SV40LT抗原介导的人源性肝细胞系的构建被引量：12
- 2004年
- 目的 建立人源性肝细胞系 ,为生物人工肝和肝细胞移植等提供合适的细胞源。方法 利用SV4 0LTag基因和真核表达载体pcDNA3.1( - )经脂质体转染至来源于 2 5岁男性脑死亡者供肝的原代培养细胞 ,使其永生化 ,进一步鉴定其形态学特征和生物学功能。结果 经G4 1870 0～30 0 μg/ml筛选 ,4 2d后获一抗G4 18肝细胞系。该细胞系呈单层贴壁、上皮细胞样形态生长 ,体外培养可无限传代 ,具有分泌白蛋白 (ALB)、丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天冬氨酸氨基转移酶 (AST)及乳酸脱氢酶 (LDH)的功能 ,超微结构观察发现 ,转染肝细胞具有原代培养肝细胞的大多数典型特征 ,如较大的细胞核、胞浆内含有丰富的糖原颗粒、大量的线粒体和粗面内质网等。经逆转录聚合酶链反应(PCR)和蛋白质印迹检测 ,转染肝细胞的ALBmRNA阳性和细胞色素P4 5 0 2E1阳性。
- 李君李兰娟曹红翠徐威俞云松盛吉芳陈亚岗
- 关键词：介导蛋白质印迹法脂质体
- 人工肝治疗急性肝衰竭动物模型代谢物组学研究
- 2014年
- 目的本实验采用以CC/MS为基础的代谢物组学为理论,结合现代生物质谱技术,对急性肝衰竭动物模型及其生物人工肝治疗效果进行研究。方法本实验选择杜洛克猪作为肝衰竭动物模型,生物人工肝用肝细胞来自中华实验小型猪。实验分为3组:对照组、生物人工肝组和假手术组。对3组实验动物进行12、18、24、36 h时间点的血样采集,并冻存于-80℃超低温冰箱,直至样品前处理。另外,通过GC/MSr质谱检测对所有样品进行分析,并对所得到的经标准化的数据在数学处理软件MATLAB 7.0进行PCA分析。结果通过PCA分析,对照组因动物发生急性肝衰竭在短期内死亡,而生物人工肝组生存时间显著延长。结论急性肝衰竭猪动物模型具有很好的稳定性,可以反映人体肝衰竭过程的病理过程。
- 盛国平虞科杜维波徐威潘小平刘小丽章益民陈月美程翼宇李兰娟
- 关键词：人工肝急性肝衰竭动物模型代谢物组学
- SV40介导的永生化人源性肝细胞表型鉴定
- 目的对本实验室已经建立的SV40介导的永生化人源性肝细胞系HepLL进行生物学特性及表型鉴定. 方法以正常肝脏组织、肝癌组织作为对照,用免疫组织化学、过碘酸-Schiff糖原染色、逆转录PCR、蛋白质印迹等方法对永生化H...
- 李兰娟盛国平李君章益民俞海英曹红翠徐威盛吉芳
- 关键词：永生化肝细胞免疫组化逆转录PCR蛋白质印迹
- 代谢组学在肝脏损伤和人工肝治疗中的应用
- 目的:急性肝衰竭作为一种复杂的多系统疾病,在短期内出现凝血功能异常和肝性闹病,且在短期内引起死亡。大量中小分子物质参与该肝衰竭的病理过程,同时,对疾病的预后也有很重要的预示作用。但由于缺少合适的检测和研究手段,目前对这些...
- 盛国平虞科杜维波潘小平徐威刘小丽程翼宇李兰娟
- 文献传递
- 脂质体介导SV40LT基因转染构建羊水染色体核型分析质控细胞系研究被引量：1
- 2018年
- 目的:研究羊水染色体核型分析质控细胞系的构建方法。方法:以T4DNA连接经BamHⅠ单酶切的SV40LTag-pcDNA和pcDNA3.1 (-) DNA,重组SV40LTag-pcDNA3.1(-)克隆,以脂质体介导法将重组克隆转染至染色体结构异常的羊水细胞,以G418筛选阳性克隆,观察细胞系的传代生长特性及其作为染色体核型分析质量评估的可行性。结果:构建了染色体核型为46,XY,t(8; 19)(q24.3;q13.1)的羊水细胞系,传至第15代的细胞系经染色体核型分析,其核型与原代细胞一致。结论:染色体结构异常的羊水细胞转染SV40LT基因后可转化为无限扩增且染色体核型稳定的细胞系,从而制成羊水细胞染色体核型分析的质控细胞系。
- 翁炳焕徐威苏岚沈敏沈敏虞晓鹏虞晓鹏
- 关键词：脂质体转染细胞
- 重型肝炎预后相关的低相对分子质量蛋白质谱分析被引量：1
- 2007年
- 目的通过对比重型肝炎患者血清中的低相对分子质量蛋白质谱,分析其与病情严重程度及预后的关系。方法28例重型肝炎患者根据疾病转归的不同分为存活组和死亡组,利用表面增强激光解吸离子化飞行时间串联质谱技术检测患者血清中相对分子质量位于1000～10000之间的蛋白质指纹图谱,筛选出两组图谱的差异峰,再结合人工神经网络技术建立重型肝炎的预后预测模型。结果比较重型肝炎存活组与死亡组的血清蛋白质指纹图谱,发现质量电荷比为4095、2860、5179、3954等38个峰的峰强度在两组间的差异有统计学意义(P<0.05)。利用这些差异峰建立的预测模型对重型肝炎预后的预测正确率达85.7%,在该预测模型中,权重最大的5个峰的质量电荷比依次为4095、5198、3954、5354、4967。结论重型肝炎存活组与死亡组患者血清中低相对分子质量蛋白质有明显差异,这些差异蛋白与患者疾病的预后相关。
- 刘小丽李兰娟盛国平徐威徐亮
- 关键词：肝炎病毒性预后蛋白质组学相对分子质量
