张茂林
- 作品数:120 被引量:460H指数:9
- 供职机构:吉林大学人兽共患病研究所人兽共患病教育部重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 动物狂犬病基因疫苗的研究被引量:2
- 2000年
- 本研究首先将狂犬病病毒糖蛋白(RGP)基因分别插入到真核表达载体pcDNA3(缩写为pcD),pSV40-dhfr,pGFP-C1,pIRES中的启动子下游,构建了4个重组真核表达质粒,分别命名为pcRG,pSRG,GFRG,pIR。再以鼠IL-2基因分别替代pIRES和pIR中的neo基因,得到两个质粒pIL和pIMR。经多酶切鉴定,所构建的6个质粒均正确。5种含RGP基因的重组质粒在BHK-21细胞和新生小鼠脑内均可表达 RGP。在 BHK细胞上以96小时表达量达最高,而新生小鼠脑内以 72小时的表达量最高,且脑内的RGP表达量高于BHK细胞上的表达量。在pcRG质粒转染的BHK细胞中用间接免疫荧光也检测到RGP存在。进一步发现,在相同时间内,以CMV为启动子的重组质粒(pcRG,pSRG,GFRG,pIR、pIMR)的表达量相近,它们均高于以SV40为启动子的pSRG的表达量。 应用上述质粒在不同包裹条件下免疫小鼠,在国内首次对其诱导的细胞和体液免疫的动态变化进行了检测,发现除不含RGP 基因的对照质粒(pcD和pIL)外,构建的所有重组质粒免疫鼠的特异性淋巴细胞转化值、 CD4+ T、 CD8+ T、 CTL?
- 张茂林扈荣良余兴龙涂长春钱爱东荣爱红刘红丽刘思国殷震
- 关键词:狂犬病病毒糖蛋白基因基因疫苗细胞免疫体液免疫
- 狂犬病减毒疫苗的粘膜免疫效应高效化研究
- 狂犬病是由狂犬病病毒引起的一种中枢神经系统感染性的人兽共患病,病死率高达100%。目前全球每年约有3~5万人死于该病,发展中国家在其中占80%以上。在发达国家人的狂犬病病例已很少,动物狂犬病也主要流行于野生动物及蝙蝠。在...
- 张茂林刘红丽余兴龙涂长春扈荣良邹啸环郭学军殷震
- 文献传递
- 猪瘟病毒E2基因在大肠杆菌中的高效表达及检测猪瘟病毒抗体间接ELISA方法的建立
- 猪瘟病毒(ClassicaI Swine Fever Virus,CSFV)是黄病毒科,瘟病毒属的成员[1]。CSFV引起猪具有高度传染性的疾病,并导致巨大的经济损失。猪瘟(CSF)是影响我国养猪业最严重的传染病之一,血...
- 余兴龙徐兴然陈义祥张茂林涂长春
- 文献传递
- 质粒DNA拓扑学结构对基因疫苗生物学特性的影响被引量:3
- 2004年
- 利用不同拓扑学结构的质粒 ,分别转化 E.coli感受态细胞、转染 SK6 - 6细胞和免疫小鼠 ,比较了不同拓扑学结构质粒对转化效率、转染率和对免疫应答水平的影响。结果显示 ,超螺旋占 5 0 %比例的猪瘟病毒 E2基因表达质粒p CDSW转化 E.coli感受态细胞的效率比开环的 p CDSW高 8倍 ,超螺旋比例占 80 %的 p VAXE2 IL- 2质粒比酶切线性化质粒转化率高 2 2倍 ;以荧光蛋白基因为报告基因 ,超螺旋比例占 80 %的荧光蛋白真核表达质粒转染真核细胞的效率是线性化质粒的 12倍 ;以猪瘟病毒主要保护性抗原 E2基因表达质粒 ,分别制备成超螺旋和开环形式占优势的质粒 ,免疫昆明鼠 ,抗体检测结果显示 。
- 李作生余兴龙张茂林乔红伟程从升徐兴然扈荣良涂长春
- 关键词:质粒DNA基因疫苗生物学特性猪瘟病毒
- 纳米氧化亚铜的水热法制备及其可见光催化性能被引量:5
- 2021年
- 为研究简单方便的纳米氧化亚铜制备方法,使用硫酸铜、硫化钠和氢氧化钠为原料,通过碱性条件下的共沉淀反应,获得CuS·7Cu(OH)_(2)前驱体.在水热条件下,CuS·7Cu(OH)_(2)内部发生氧化还原反应,Cu_(2+)被完全还原成Cu^(+),合成出纯净纳米Cu_(2)O.利用XRD、SEM和TEM研究产物的物相组成、颗粒形貌和颗粒大小,并探究实验条件对产物Cu_(2)O晶粒大小的影响.此外,以甲基橙作为模拟有机污染物研究纳米Cu_(2)O的光催化活性及其稳定性.实验结果表明,在可见光的照射下,所制备的纳米Cu_(2)O表现出较好的光催化效率,且稳定性良好.Cu_(2)O选用产品2 h内可以降解大约83%的甲基橙(20 mg·L-1),6次循环实验后,其光催化降解效率仅降低2.1%.
- 张茂林张茂林
- 关键词:水热反应光催化
- T7 RNA多聚酶基因的克隆、序列测定及其在E.coli中的表达被引量:1
- 2003年
- 从 BL 2 1(DE3) E.coli菌株中以 PCR的方法扩增得到了与 T7RNA多聚酶 (T7RNA polymerase,T7pol)基因大小一致的 DNA片断。将 PCR产物纯化后直接克隆到 p GEM- T载体中 ,经酶切鉴定和 DNA序列分析表明克隆得到了正确的 T7pol基因。将 T7pol基因亚克隆入 p ET- 2 8b(+)中 ,构建得到原核表达质粒 p ET2 8T7。该质粒的 BL 2 1(DE3) p L ys S转化菌在 IPTG的诱导下可表达约 9880 0的蛋白 ,这与 T7pol的相对分子质量一致。将该质粒转化DH5 α、JM10 9、HB10 1、BL2 1(DE3)和 BL2 1(DE3) p L ys S等 5种不同的宿主菌 ,仅有转化 T7pol酶活性受到抑制的宿主菌 BL2 1(DE3) p L ys S才能得到转化子 ,而其余 4种 T7T7pol酶活性不受抑制的 E.coli宿主菌不能得到转化子。p ET2 8T7原核表达质粒这种仅能在 T7pol酶活性受到抑制的宿主菌中才能存活的现象说明本试验所克隆的 T7pol基因能正确表达出具有
- 余兴龙涂长春徐兴然张茂林张青婵李作生
- 关键词:基因克隆E.COLIPCRRNA病毒
- 狂犬病毒作为神经示踪剂的研究进展被引量:1
- 2011年
- 狂犬病毒是仅有的完全特异的示踪剂,因为它能逆向通过化学突触进行神经示踪且不改变神经细胞的代谢,可以逐级的,时间依赖的方式感染大量的突触联系的神经网络。根据狂犬病毒的特性解释该病毒作为神经示踪剂的优势,总结狂犬病毒跨神经进行示踪的方法,并对基因修饰的狂犬病毒的新兴技术进行讨论和展望。
- 宋艳李宁黄飞单晶辉张茂林段铭关振宏
- 关键词:狂犬病毒
- 一种新型纯化PE类重组毒素的方法
- 本发明涉及一种新型纯化PE类重组毒素的方法,属生物蛋白快速纯化检验领域,以切胶纯化的绿脓杆菌外毒素重组蛋白免疫小鼠制备单克隆抗体,筛选可在温和条件下进行抗原识别、洗脱的抗体,建立一种快速高效且不影响绿脓杆菌外毒素类重组毒...
- 柳增善宋杰任洪林卢士英李岩松周玉张茂林高世奇吴南玄
- 重组rPA基因在毕赤酵母细胞中的胞内表达研究被引量:15
- 2003年
- 目的构建含rPA全长基因的重组酵母胞内表达质粒pPIC9K rPA ,并在毕赤酵母中进行表达。方法用限制性内切酶BamHI和NotI将含有rPA全长基因的质粒pJZ1 6双酶切后 ,克隆至酵母表达载体pPIC9K中 ,构建酵母重组表达质粒。rPA基因经DNA序列测定准确无误。通过电穿孔法转染毕赤酵母菌GS1 1 5 ,PCR鉴定阳性酵母转化子 ,将rPA基因整合入酵母基因组DNA ,在毕赤酵母中实现了胞内非融合表达。表达产物进行SDS PAGE、Western blots以及溶纤维蛋白活性检测。结果表达产物以胞内包涵体的形式存在 ,未糖基化。SDS PAGE结果显示表达蛋白质的相对分子量约为 39kD。Western blots检测表明表达蛋白质能与单克隆抗体发生特异性反应。包涵体经 8mol L脲溶液溶解后 ,有明显的溶纤维蛋白活性。
- 黄坚龙青任启生宋新荣张茂林殷震
- 关键词:毕赤酵母
- 我国狂犬病流行状况分析及防治对策
- 目的总结和分析中国1950-2004年狂犬病流行情况,探讨造成流行回升的因素,分析目前防制过程中存在的问题,提出狂犬病的防制对策。方法收集全国狂犬病疫情监测资料及对部分省市的流行病学调查资料进行分析。结果建国后到现在我国...
- 罗明张茂林涂长春
- 关键词:狂犬病防制对策
- 文献传递