张永波
- 作品数：13 被引量：47H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金重庆市卫生局医学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 粒细胞集落刺激因子及其受体在儿童肾母细胞瘤中的表达
- 2012年
- 目的检测粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)及其受体(G-CSFR)在儿童肾母细胞瘤中的表达。方法收集我院2009年1月至2011年6月确诊的肾母细胞瘤患者手术标本27例。应用免疫组织化学方法检测肿瘤标本的G-CSF、G-CSFR的表达和分布情况。结果肾母细胞瘤标本中粒细胞集落刺激因子和其受体的表达率分别是62.96%、66.67%。其中,G-CSF和G-CSFR在同一样本中均阳性表达者16例(59.26%),均阴性表达者8例(29.63%)。G-CSF阳性和G-CSFR阴性表达1例(3.70%),G-CSF阴性和G-CSFR阳性表达2例(7.41%)。G-CSF和GCSFR的表达与性别、年龄、临床分期和病理分型均无相关性(P>0.05)。结论 G-CSF,G-CSFR在儿童肾母细胞瘤中高表达,无论性别、年龄、临床分期以及病理类型,均应检测肿瘤G-CSF、G-CSFR表达,对于G-CSFR阳性表达的患者,建议使用G-CSF时,应慎重考虑其对肿瘤的影响。
- 张永波何大维何文飞卞则栋吴鑫易钦君魏光辉
- 关键词：粒细胞集落刺激因子粒细胞集落刺激因子受体肾母细胞瘤
- C57BL／6j小鼠异种移植瘤模型的建立被引量：7
- 2011年
- 目的建立C57BL／6j小鼠人神经母细胞瘤移植瘤模型。方法取对数生长期SK—N—SH细胞1×10^7个ml，分别接种3d、7d、3周、4周、5周、6周、7周C57BIM6j系小鼠及6周BALB／C系裸鼠，观察小鼠成瘤率、相对肿瘤体积（RTV）、相对肿瘤增长速率（K）、相对肿瘤倍增时间（Td）、宿主存活时间及移植瘤病理学情况。结果C57BL／6j各年龄段及BALB／C持续成瘤率分别为：100％、100％、90％、70％、60％、0％、0％、100％。3周龄C57BL／6i与BALB／C比较RTV、K、．rd及存活时间均差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在C57BIM6j小鼠体内成功建立人类异种移植瘤模型，3周龄为最适宜接种时间点。
- 何文飞何大维马超赵丹张永波卞则栋
- 关键词：移植瘤动物神经母细胞瘤
- 没食子酸拮抗环磷酰胺损伤睾丸支持细胞波形蛋白的研究被引量：3
- 2012年
- 目的观察没食子酸（GA）拮抗环磷酰胺干扰睾丸支持细胞波形蛋白（Vimentin）分布表达的作用。方法用SK—N．SH细胞株建立3周龄C57BL／6j小鼠移植瘤模型，实验随机对照组：（1）荷瘤鼠磷酸盐缓冲液（PBS）组（PBS组），每只荷瘤鼠腹腔注射PBS0．5ml，阴性对照；（2）荷瘤鼠环磷酰胺组（cP组），每只荷瘤鼠腹腔注射cP75mg／kg，2次／周，连续2周，阳性对照。（3）非荷瘤正常鼠组（Nc组），用于检测小鼠生殖功能对照；实验组：（1）没食子酸组（GA组），每只荷瘤鼠腹腔注射GA250mg／kg，1次／2d，连续2周；（2）荷瘤鼠没食子酸加环磷酰胺组（GA＋CP组），GA在cP给药前24h给药，每只荷瘤鼠给药剂量、方式、时间同GA、CP组，每组10只C57BL／6j小鼠。比较各组睾丸绝对质量及脏器系数，分别应用免疫组织化学、逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）、Westernblot检测睾丸支持细胞Vimentin分布、mRNA和蛋白水平变化。结果CP治疗后睾丸脏器系数与PBS组比较显著降低（P〈0．05），GA干预后升高（P〈0．05）。单用GA治疗后与PBS组差异无统计学意义（P〉0．05）；cP治疗后睾丸支持细胞Vimentin分布紊乱，mRNA及蛋白表达与PBS组比较显著下调（P〈0．01），GA干预后睾丸支持细胞Vimentin分布与PBS组类似，mRNA和蛋白表达较cP组显著上调（P〈0．01），与PBS组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论GA拈抗环磷酰胺干扰睾丸支持细胞Vimentin正常分布表达作用，可作为环磷酰胺损伤生殖功能的干预药物。
- 何文飞何大维张永波卞则栋吴鑫魏光辉
- 关键词：睾丸支持细胞没食子酸环磷酰胺波形蛋白
- 没食子酸抑制人神经母细胞瘤增殖作用的实验研究被引量：17
- 2011年
- 目的研究没食子酸抑制小鼠模型中人神经母细胞瘤增殖的作用以及对化疗药物的协同作用。方法建立人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株免疫活性C57BL/6j小鼠移植瘤模型,随机分配成4组,每组10只:①PBS荷瘤对照组,按PBS0.5ml/只,腹腔注射,作为阴性对照;②没食子酸组,按250mg/kg,1次/2d给药,连续2周;③环磷酰胺组,按75mg/kg给药,每周2次,连续2周,作为阳性对照;④没食子酸+环磷酰胺组,没食子酸在环磷酰胺给药前24h给药,没食子酸与环磷酰胺独立给药,剂量和时间同前。药物均9:00腹腔注射给药,每周监测相对肿瘤体积(RTV),治疗时间共2周,次日处死小鼠,称体质量和瘤质量(Wt)、计算抑瘤率(IR),BrdU标记检测移植瘤细胞增殖。结果没食子酸组、环磷酰胺组、没食子酸+环磷酰胺组在2周的移植瘤瘤质量分别为(4559.0±677.7)、(2117.0±749.6)、(637.7±319.6)mg,平均抑瘤率分别为36.94%、70.72%、91.18%,与PBS组比较差异有显著性(P<0.01),没食子酸+环磷酰胺组瘤质量与环磷酰胺组比较差异有显著性(P<0.01)。各给药组肿瘤增殖指数分别为0.1229±0.0219、0.1076±0.0156、0.0413±0.0130,与PBS组肿瘤增殖指数(0.2308±0.0759)比较差异有显著性(P<0.01),同时没食子酸+环磷酰胺组与没食子酸组或环磷酰胺组比较差异有显著性(P<0.01)。结论没食子酸具有抑制人神经母细胞移植瘤增殖、协同环磷酰胺抗肿瘤生长的作用。
- 何文飞何大维马超赵丹张永波卞则栋
- 关键词：没食子酸人神经母细胞瘤环磷酰胺
- 氟他胺诱导大鼠隐睾生殖母细胞残留模型被引量：5
- 2011年
- 目的:观察胚胎期氟他胺(Flu)对SD大鼠睾丸生殖细胞发育的影响,建立研究隐睾生殖母细胞(Go)发育缺陷机制及治疗的模型。方法:36只SD孕鼠随机分为Flu组(n=20)、玉米油组(n=8)和空白对照组(n=8)3组,Flu组和玉米油组于妊娠12～21 d(GD12-21)分别给予Flu 25 mg/(kg.d)和1 ml/(kg.d)皮下注射,在出生后1 d(PD1)、PD10、PD20、PD80收集标本,观察睾丸形态学、组织学的差异,免疫组化及RT-PCR检测神经母细胞粘附分子(NCAM)表达。结果:Flu诱导隐睾发生率为43.9%(29/66)。PD20、PD80隐睾睾丸质量、脏器系数较对照组有显著性差异;PD10 Flu诱导睾丸组织中可见Go迁移障碍,滞留于管腔中央,Flu诱导PD20、PD80隐睾组织中仍可见迁移障碍的Go位于管腔中央;免疫组化检测结果显示迁移障碍的Go胞膜阳性表达NCAM,且PD10、PD20睾丸RT-PCR检测结果显示Flu诱导隐睾组织中NCAM的mRNA表达高于对照组。结论:Flu成功诱导大鼠隐睾Go残留模型,可以用于研究隐睾生殖母细胞发育缺陷的机制及治疗。
- 马超何大维赵丹何文飞张永波魏光辉
- 关键词：隐睾动物模型氟他胺
- 人偏肺病毒A与B基因型对小鼠致病性的观察
- 目的 人偏肺病毒(Human metapneumovirus hMPV)是2001年首次被分离的呼吸道病毒病原,可导致各年龄组人群呼吸道感染,以儿童感染为主,严重者威胁生命造成死亡,不仅如此,hMPV感染还与哮喘发生、发...
- 周真崔玉霞张永波秦弦李荣培刘平窦颖王莉佳赵晓东赵耀
- 关键词：人偏肺病毒基因型
- 胚胎期氟他胺暴露对SD大鼠支持细胞增殖和成熟的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨胚胎期暴露于氟他胺(Flu)对SD雄性仔鼠睾丸支持细胞的影响。方法:将妊娠的SD大鼠随机分为Flu组和正常组,Flu组自妊娠后第12～21日每日皮下注射25 mg/kg Flu以建立生殖发育障碍模型,正常组不作任何处理。分别在雄性幼仔出生后第13日(PD 13)、PD15、PD 17随机颈椎脱臼法处死幼仔鼠,收集雄仔鼠睾丸组织。免疫组织化学检测雄仔鼠BrdU并计算支持细胞增殖指数,Real-time PCR检测各组雄仔鼠SGP-2基因的表达。结果:随着生长发育,正常组和Flu组雄仔鼠睾丸支持细胞增殖指数均呈下降趋势,PD 17正常组支持细胞增殖已经停止,Flu组PD 13、PD 15、PD 17支持细胞增殖指数升高,明显高于正常组(P<0.05)。PD13 Flu组支持细胞SGP-2 mRNA表达量较正常组无明显差异(P>0.05);PD 15、PD 17 Flu组支持细胞中SGP-2 mRNA表达量明显低于正常组(P<0.01)。结论:胚胎期Flu暴露导致支持细胞增殖期延长、成熟延迟,这可能是导致其生殖细胞发育障碍的重要原因之一。
- 赵丹何大维张永波何文飞魏光辉
- 关键词：支持细胞细胞增殖
- 胚胎期氟他胺暴露对睾丸Connexin43基因表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨胚胎期雄激素受体阻滞剂氟他胺（flutamide，Flu）暴露对睾丸间隙连接蛋白43（Connemn43，Cox43）基因表达的影响。方法在胚胎期12～21d，给予SD孕鼠氟他胺25mg·kg-1·d-1皮下注射。应用免疫组织化学法和Real—timePCR技术，分析出生后13、15、17、20dSD幼鼠睾丸Cox43mRNA表达及蛋白质定位分布情况。结果出生后（postnatalday，PD）13、15d，Flu暴露组睾丸Cox43mRNA和蛋白表达均明显低于正常对照组及玉米油对照组（P〈0．01）；PD17Flu暴露组与正常对照组及玉米油对照组相比，睾丸Cox43mRNA表达差异无统计学意义（P〉0．05），而生精小管基底膜精原细胞层有Cox43蛋白异常表达分布；PD20Flu暴露隐睾组Cox43mRNA表达明显低于正常对照组（P〈0．05）、玉米油对照组（P〈0．05）和非隐睾组（P〈0．01），并且PD20Flu暴露各组生精小管基底膜精原细胞层均有Cox43蛋白异常分布。结论胚胎期Flu暴露导致睾丸Cox43mRNA转录下降，生精小管内Cox43蛋白表达分布异常。
- 赵丹何大维马超何文飞张永波魏光辉
- 关键词：氟他胺间隙连接蛋白43雄激素受体睾丸
- Piwil2重编程人成纤维细胞形成肿瘤干细胞的初步研究被引量：9
- 2013年
- 目的初步观察精原干细胞自我更新基因Piwil2重编程人成纤维细胞的细胞形态及功能特征变化,建立Piwil2调控肿瘤干细胞发生过程的细胞实验模型。方法将携带Piwil2-GFP标记和空载目的基因GFP标记的慢病毒载体分别感染原代培养的小儿包皮成纤维细胞,筛选建立稳定表达Piwil2-GFP和GFP成纤维细胞系,观察细胞形态变化及肿瘤球形成过程,分析细胞染色体核型,进行裸鼠体内成瘤实验,RT-PCR、免疫组织化学进一步鉴定重编程后细胞的干细胞特征及三胚层分化的相关标志物。结果转染后第5天,Piwil2-GFP成纤维细胞开始由长梭形逐渐转变为圆形,第14天出现集落样生长状态,挑选集落重悬后培养形成类似"肿瘤球"样克隆,其细胞染色体核型呈超二倍体的异质性改变。"肿瘤球"样克隆裸鼠体内移植2周时100%形成肿瘤,肿瘤组织学及免疫组化鉴定为表达多种外胚层、中胚层及内胚层肿瘤标志物的恶性肿瘤,RT-PCR显示细胞及裸鼠肿瘤表达干细胞多能基因Oct-4、Nanog、Sox2,以及三胚层特征标志物。结论Piwil2重编程人成纤维细胞后的细胞具有干细胞及多潜能分化特性,以及显著的肿瘤细胞异质特性。
- 吴鑫何大维张永波蔡春红魏光辉
- 关键词：成纤维细胞肿瘤干细胞
- 粒细胞集落刺激因子及其受体在儿童神经母细胞瘤中的表达研究被引量：3
- 2012年
- 目的检测粒细胞集落刺激因子(G-CSF)及其受体(G-CSFR)在儿童神经母细胞瘤中的表达情况。方法收集2009年1月-2011年6月确诊的神经母细胞瘤患儿手术标本25例。应用免疫组织化学法检测肿瘤标本中G-CSF和G-CSFR的表达,分析G-CSF,G-CSFR的表达与患儿年龄、性别及肿瘤临床分期的相关性。结果神经母细胞瘤标本中,G-CSF和G-CSFR阳性表达率分别为68%、72%。其中,G-CSF与G-CSFR均呈阳性者12例(48%),均呈阴性者2例(8%);一致性检验显示,G-CSF与G-CSFR同时检测均为阳性的标本无一致性(Kappa=-0.0456,P=0.8187)。G-CSF阳性与G-CSFR阴性者5例(20%),G-CSF阴性与G-CSFR阳性者6例(24%)。G-CSF和G-CSFR的表达与性别、年龄及临床分期无显著相关性(P>0.05)。结论无论性别、年龄及临床分期,G-CSF和G-CSFR在儿童神经母细胞瘤中均高表达,对于G-CSFR阳性表达的神经母细胞瘤患者,外源性应用G-CSF应慎重考虑其对肿瘤的影响。
- 吴鑫何大维张永波何文飞卞则栋易钦君魏光辉
- 关键词：粒细胞集落刺激因子神经母细胞瘤免疫组织化学
