周瑜
- 作品数：3 被引量：14H指数：2
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- 慢病毒介导TGF-β3/BMP-2联合基因转染诱导兔骨髓间充质干细胞成软骨细胞分化被引量：6
- 2014年
- 目的重组慢病毒介导TGF-β3/BMP-2联合基因转染兔骨髓间充质干细胞,诱导其软骨细胞分化,与TGF-β3单基因转染诱导其软骨细胞分化的效率作比较。方法全骨髓贴壁法分离、培养骨髓间充质干细胞,流式细胞术检测细胞表面抗原,培养后通过重组慢病毒分别转染阴性对照(N组)、TGF-β3单基因(T组)、TGF-β3/BMP-2联合基因(TB组),培养14 d后,荧光显微镜下观察各组细胞形态,RT-PCR、Western blot分别检测SOX-9、蛋白多糖、Ⅱ型胶原在基因水平与蛋白水平的表达量。结果流式细胞术检测造血干细胞标志物(CD34,2.07%)、白细胞表面抗原(HLA-DR,1.73%)均为阴性,透明质酸受体(CD44,82.79%)为阳性,荧光显微镜观察诱导后细胞形态多为多角形、方形或者类圆盘状,RT-PCR、Western blot结果均示T组、TB组SOX-9、蛋白多糖、Ⅱ型胶原表达量均比空白对照组(C组)、N组高(P<0.05),且TB组表达量高于T组(P<0.01)。结论 TGF-β3/BMP-2联合基因转染骨髓间充质干细胞能诱导其成软骨细胞分化,且联合基因转染效率高于TGF-β3单基因转染。
- 周瑜夏长所王昌耀王敏迟静薇王英振
- 关键词：转化生长因子Β3骨形态发生蛋白质类软骨分化
- 双基因转染兔骨髓基质干细胞与胶原/羟基磷灰石复合修复骨缺损及对假体-骨界面整合的影响被引量：1
- 2013年
- 目的构建假体周围骨缺损模型,将慢病毒介导的骨形态发生蛋白2(BMP-2)和转化生长因子β3(TGF-β3)双基因转染兔骨髓基质干细胞(MSCs)与胶原/羟基磷灰石复合,后植入假体周围,观察其对假体-骨界面骨整合的影响。方法成年健康清洁新西兰白兔24只,雌雄不限,体重2.5～3.5kg,于两侧股骨髁间造成纵向骨缺损,植入光滑钛合金假体后保持骨假体周围2mm骨缺损,共48侧,实验组(左侧)及对照组(右侧)各24侧,采用压缩植骨技术,重建股骨髁假体周围骨缺损,分别植入组织工程骨(双基因组)、单纯胶原/羟基磷灰石(细胞组),打压紧密并完全覆盖植入体。于术后4、8、12周时麻醉法分别处死8只兔子,行大体观察、X线观察、组织形态计量学及生物力学测定评估组织工程化骨修复骨缺损的能力及对假体-骨界面骨整合的作用。结果术后4周,对照组、实验组X线表现无显著差别,假体周围主要为纤维结缔组织,假体骨结合强度分别为0.3388±0.7206,0.6845±0.7186,差异有统计学意义(P<0.01),假体骨接触率均为0;术后8周,实验组X线表现见假体周围有新骨形成,对照组、实验组假体骨结合强度分别为0.6468±0.7852,1.1824±0.0800,假体骨接触率分别为(5.93±0.60)%,(23.35±3.76)%,二者差异均有统计学意义(P<0.01);术后12周实验组X线表现见假体周围为骨组织,组织学所见植入体周围为连续性骨接触,对照组、实验组假体骨结合强度分别为1.4419±0.1021,2.7622±0.1802,假体骨接触率分别为(15.27±2.34)%,(39.76±1.85)%,假体结合强度与假体骨接触率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01)。对照组、实验组假体骨结合强度及假体骨界面骨接触率随着时间的延长而增大,术后8周与4周比较,术后12周与8周比较,数值均增高,有显著性差异(P<0.01)。结论组织工程化骨修复假体周围骨缺损,可促进假体周围新骨形成,提高假体-骨界面骨整合,改善假�
- 贺金晓王英振夏长所王昌耀周瑜沐菊赫天梁晔
- 关键词：骨形态发生蛋白质类转化生长因子Β3羟基磷灰石类骨整合骨缺损
- 线粒体分裂抑制剂改善大鼠海马神经元缺血再灌注损伤时的能量代谢障碍被引量：7
- 2014年
- 目的探讨线粒体分裂抑制剂（mdivi-1）在脑缺血再灌注损伤中对能量代谢的影响。方法将体外培养8d的Wistar大鼠海马神经元分为4组：正常对照组、赋形剂组、mdivi-1组、缺血再灌注损伤组，后两组利用海马神经元氧糖剥夺法建立缺血再灌注损伤模型，mdivi-1组建模前给予mdivi—1预处理40min。缺血6h再灌注20h后应用Western blotting检测各组海马神经元线粒体分裂蛋白1（Drp1）、B细胞淋巴癌／白血病-2（Bcl-2）和Bcl-2相关X蛋白（Bax）的表达水平，应用流式细胞术检测线粒体膜电位。应用酶标仪法检测三磷酸腺苷（ATP）含量及Na^＋．K^＋．ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性以及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性。结果与正常对照组比较，mdivi-1组和缺血再灌注损伤组Drp1（1．001±0．276；1．985±0．301）、Bax（2．752±0．786；4．225±1．107）表达水平明显升高，Bcl-2（0．749±0．128；0．336±0．109）表达水平明显降低，线粒体膜电位降低的细胞数（72．5％；92．7％）均升高，ATP含量[（74．129±5．773）μmoL／g蛋白；（36．986±5．945）μmoL／g蛋白]及NnKiATP酶活性[（4．348±0．451）U／mg蛋白；（1．709±0．477）U／mg蛋白]、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶活性[（1．955±0．287）U／mg蛋白；（1．123±0．181）U／mg蛋白]以及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性[（15．445±1．699）nmol/（min·mg）、（17．065±1．070）nmol／（min·mg）、（32．123±1．652）nmol／（min·mg）、（2．814±0．180）nmol／（min·mg）；（6．810±1．725）nmol／（min·mg）、（9．473±0．751）nmol／（min·mg）、（23．010±1．716）nmol／（min·mg）、（1．598±0．181）nmol／（min·mg）]均明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。与缺血再灌注损伤组比较，mdivi-1组Drpl、Bax表达水平明显减少，Bcl-2表达水平明显升高，线粒体膜电位降低
- 王敏李瑜王士雷贾长新周瑜王金英梁楠姚如永
- 关键词：脑缺血再灌注损伤能量代谢障碍细胞凋亡
