周玮
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
- 供职机构：浙江大学医学院附属邵逸夫医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省医药卫生科学研究基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 表达GFP基因的溶瘤腺病毒对大肠癌细胞的体外杀伤作用
- 2009年
- 目的:研究在端粒酶启动子驱动下表达绿色荧光蛋白(GFP)及5型腺病毒早期基因(E1A)基因的腺病毒Ad/hTERT-GFP-E1对大肠癌细胞的杀伤作用及其可能的机制。方法:将不同滴度Ad/hTERT-GFP-E1感染大肠癌及正常细胞,以巨细胞病毒(CMV)启动子驱动下表达GFP基因的腺病毒Ad/CMV-GFP作为载体对照,通过半数组织培养感染量(TCID50)法测定病毒滴度及体外复制能力,然后用MTT法及细胞克隆形成试验评价该病毒在体外对肿瘤细胞及正常细胞的杀伤作用,并对病毒感染后的细胞进行原位凋亡检测。结果:Ad/hTERT-GFP-E1能够在DLD1细胞内持续复制,GFP的表达能够对病毒的感染和复制起到监测作用;MTT结果显示该病毒对于结直肠肿瘤细胞有显著杀伤作用,而对于正常细胞没有明显的杀伤作用;对病毒感染后的DLD1进行细胞凋亡检测发现Ad/hTERT-GFP-E1所引起的凋亡率显著高于对照组(P<0.01)。结论:溶瘤腺病毒Ad/hTERT-GFP-E1能够选择性地在肿瘤细胞内复制并杀伤肿瘤细胞,其机制与细胞凋亡的途径有关。
- 周玮朱洪波何超黄学锋方炳良
- 关键词：末端转移酶腺病毒病毒疗法
- Bcl-XL小分子干扰RNA逆转人结肠癌获得性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的耐药被引量：7
- 2008年
- 目的探讨Bcl-XL小分子干扰RNA（siRNA）在逆转人结肠癌细胞获得性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）耐药中的作用。方法以Bcl-XL siRNA转染获得性TRAIL耐药的人结肠癌DLD1-TRAIL／R细胞24h，并用TRAIL蛋白处理，通过细胞计数和流式细胞仪检测细胞的存活率，并通过Western blot法检测各种凋亡相关蛋白的活化情况。结果Bcl-XL siRNA能有效下调DLD1-TRAIL／R细胞中Bcl-XL蛋白的表达水平，并且能够有效地逆转其对TRAIL蛋白的耐药。DLDl-TRAIL／R细胞经过Bcl-XLsiRNA和TRAIL蛋白共同处理2h后，其细胞凋亡率〉50％；共同处理4h后，其细胞存活率〈40％；而对照组和TRAIL蛋白处理组的细胞凋亡率和生存率无明显变化（P〈0．05）。Western blot法检测结果表明，经Bcl-XL siRNA与TRAIL蛋白联合处理后，DLDl-TRAIL／R细胞中caspase-8、caspase-9、Bid、caspase-3以及多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶（PARP）均明显活化，细胞色素C的释放显著增加。结论Bcl-XL siRNA能够有效逆转结肠癌细胞获得性TRAIL耐药，这将为治疗肿瘤耐药提供一种新的思路。
- 朱洪波黄学锋胡静姿周玮陈薇陈琳琳何超
- 关键词：BCL-XL小分子干扰RNA耐药
- Ad/Bcl-XL shRNA对结直肠癌原代肿瘤模型抑瘤作用初步研究被引量：1
- 2014年
- 目的:建立预测药物敏感性的结直肠癌原代肿瘤模型,并在该模型中进一步评价Ad/Bcl-XL shRNA对结直肠癌的抑制作用。方法:采用结直肠癌手术标本的新鲜组织建立原代肿瘤模型。建模后利用Ad/Bcl-XL shRNA瘤内注射进行后续的抗肿瘤治疗,同时以Ad/GFP和PBS作为对照。治疗后测量肿瘤大小,监测治疗对肿瘤的杀伤作用及正常脏器的毒性作用,并观察裸鼠存活时间。结果:共接种了22例结直肠癌肿瘤标本,有3例标本成瘤,分别命名为NO.9、NO.15和NO.18,它们在形态学上与患者原始肿瘤基本一致。Ad/Bcl-XL shRNA治疗后结果显示,其在3例原代肿瘤模型中均能显著抑制结直肠肿瘤的生长。在NO.9模型中,Ad/Bcl-XL shRNA治疗组的肿瘤体积为(351.4±108.4)mm3,Ad/GFP组和空白对照组则分别为(666±103.6)和(677.3±252.6)mm3,H=8.06,P=0.018;在NO.15模型中,Ad/Bcl-XL shRNA治疗组肿瘤体积为(240.4±83.3)mm3,Ad/GFP组和空白对照组则分别为(474.4±44.4)和(559.9±118.4)mm3,F=19.409,P<0.001;在NO.18模型中,Ad/Bcl-XL shRNA治疗组肿瘤体积为(230.5±187.9)mm3,Ad/GFP组和空白对照组则分别为(619±139.7)和(668.7±246.6)mm3,F=8.966,P=0.003。后续的TUNEL分析显示,Ad/Bcl-XL shRNA诱导肿瘤细胞的凋亡,其凋亡率达到10.98%,明显高于空白对照组的1.52%和Ad/GFP组的1.47%,H=9.38,P=0.009。同时结果还显示,Ad/Bcl-XL shRNA治疗后显著延长了荷瘤裸鼠的存活时间,在模型NO.9中,空白对照组、Ad/GFP组以及Ad/Bcl-XL shRNA组的平均存活时间分别为31、31.4和58d,P=0.009;在模型NO.15中,3组的平均存活时间分别为75.3、84.3和99d,P=0.014;在模型NO.18中,3组的平均存活时间分别为33.4、33.6和72.8d,P=0.046。结论:Ad/Bcl-XL shRNA在结直肠癌原代肿瘤模型中具有明显的抗肿瘤作用,提示其可能是一种潜在的治疗结直肠癌的方法。
- 胡静姿王晓炜周玮戴胜
- 关键词：移植瘤SHRNA
- 基于免疫基因组学的结肠腺癌患者预后风险模型的建立被引量：4
- 2020年
- 目的探索影响结肠腺癌患者预后的免疫基因,构建结肠腺癌患者的预后风险模型。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中获取结肠腺癌患者的RNA-seq数据及临床病例资料。根据组织样本分为肿瘤组与对照组,筛选出差异表达的免疫基因。通过Cox回归分析筛选出与结肠腺癌患者预后相关的免疫基因,并构建预后风险评分模型。计算每例结肠腺癌患者的风险评分,根据中位风险评分将其分为高风险组和低风险组,通过Kaplan-Meier分析及受试者工作特征(ROC)曲线对免疫基因预后风险模型的预测效能进行评价,并对免疫基因预后风险模型与免疫细胞浸润的相关性进行分析。结果肿瘤组与对照组共存在220个差异表达的免疫基因,COX回归分析显示其中CXCL5(CX-C motif chemokine ligand 5)、IGHV5-51(immunoglobulin heavy variable 5-51)、IGKV1-33(immunoglobulin kappa variable 1-33)、CHGA(chromogranin A)、UCN(urocortin)、VIP(vasoactive intestinal peptide)和NR3C2(nuclear receptor subfamily 3 group C member 2)等7个免疫基因与预后相关。构建的免疫基因预后风险评分模型为:风险评分(RS)=0.0050×CXCL5+0.0013×IGHV5-51+0.0221×IGKV1-33+0.0083×CHGA+0.3097×UCN+0.0551×VIP–0.2255×NR3C2。在结肠腺癌患者中,低风险组的总生存率高于高风险组(P<0.001),高风险组和低风险组的5年总生存率分别为49.4%和75.8%。ROC曲线显示AUC为0.741。免疫基因预后模型与B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、树突细胞、巨噬细胞及自然杀伤细胞等免疫细胞浸润相关。结论构建了结肠腺癌患者的免疫基因预后风险评分模型,系统评价和验证了该模型在结肠腺癌患者个体化治疗中的重要性,为寻找新的免疫治疗靶点提供了方向。
- 陈恩更陈力曹高扬王飞章玮周玮宋章法
- 关键词：结肠腺癌免疫基因个体化诊疗
- Bcl-XL小发夹RNA腺病毒载体的构建及其抗肿瘤作用被引量：1
- 2012年
- 目的:构建表达Bcl-XL小发夹RNA的腺病毒载体(Ad/Bcl-XL shRNA)并探讨其抗肿瘤作用。方法:构建、纯化重组腺病毒Ad/Bcl-XL shRNA。通过Western blotting、MTT分析验证它对Bcl-XL的下调及其杀伤肿瘤细胞的作用,并检测其处理后细胞凋亡信号的活化情况;在裸鼠皮下荷瘤模型中验证其体内抗肿瘤作用。结果:成功构建和纯化了Ad/Bcl-XLshRNA,它能显著下调结肠癌DLD1细胞Bcl-XL蛋白的表达;与Ad/GFP、PBS组相比,Ad/Bcl-XL shRNA组明显抑制人结肠癌细胞DLD1的生长[1 000 MOI时(60.6±4.8)%vs(99.0±2.6)%、100%;2 000 MOI时,(37.3±6.9)%vs(99.0±2.1)%、100%,P<0.01],但对正常人成纤维细胞无明显抑制作用(P>0.05);Ad/Bcl-XL shRNA组能有效诱导结肠癌细胞中凋亡信号casepase-9、casepase-3、PARP的活化。在裸鼠荷瘤模型中,与Ad/GFP、PBS组相比,Ad/Bcl-XL shRNA组显著抑制DLD1来源皮下肿瘤的生长[第29天时,(250.1±185.7)vs(880.0±286.1)、(911.0±389.1)mm3;P<0.01]。结论:Ad/Bcl-XLshRNA能显著抑制结肠癌细胞在体内外的生长,其在结肠癌治疗中具有潜在的应用价值。
- 胡静姿周玮王晓炜戴胜
- 关键词：重组腺病毒BCL-XLRNA干扰小发夹RNA
- 肠及肠系膜损伤CT分级系统对临床精准治疗的指导价值被引量：9
- 2019年
- 随着交通事故的大幅度增多,腹部创伤是较为常见的严重创伤,其发生率约占各种损伤的0.4%~1.8%,其中肠及肠系膜损伤(bowel and/or mesenteric injuries,BMIs)在腹部创伤中的发生率为1%~5%,位居腹部钝性损伤的第3位。由于BMIs常伴有颅脑、胸部、脊柱骨盆等损伤而容易掩盖腹部症状和体征,导致严重并发症和高病死率。早期发现、准确诊断和及时处理是挽救患者生命的关键。本研究回顾性分析了浙江大学医学院附属邵逸夫医院及浙江大学湖州医院2010年1月至2014年1月间70例闭合性BMIs患者的多层螺旋CT影像特征并整理出CT分级系统,并通过后期临床病例验证,以探讨肠及肠系膜损伤CT分级系统对临床精确制定治疗方案的指导价值。
- 周玮周玮胡红杰陈青青范兵魏云海
- 关键词：多层螺旋CT肠系膜损伤临床病例腹部钝性损伤腹部创伤
- 表达GFP基因的溶瘤腺病毒对大肠癌细胞的体外杀伤作用
- 目的研究在端粒酶启动子驱动下表达绿色荧光蛋白(GFP)及5型腺病毒早期基因(ElA)基因的腺病毒Ad/hTERT-GFP-E1对大肠癌细胞的杀伤作用及其可能的机制。方法将不同滴度Ad/hTERT-GFP-E1感染大肠癌及...
- 周玮朱洪波何超
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