叶丽霖 作品数:6 被引量:18 H指数:3 供职机构: 南京医科大学附属淮安第一医院 更多>> 发文基金: 江苏省淮安市科技支撑计划项目 江苏省卫生厅面上基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
高三尖杉酯碱诱导K562细胞自噬及其机制的研究 目的观察高三尖杉酯碱(Homoharring-tonine,HHT)对慢性髓细胞白血病急红变细胞株K562的细胞自噬诱导效应以及自噬效应对细胞毒作用的影响。 方法采用MTT法检测HHT对K562细胞的增殖抑制作用;采用流... 叶丽霖关键词:高三尖杉酯碱 K562细胞 细胞自噬 细胞毒作用 BCL-2 文献传递 结直肠癌奥沙利铂耐药相关蛋白的筛选与鉴定 被引量:2 2013年 目的:采用蛋白质组学技术筛选结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中对化疗药物奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)耐药的相关蛋白,以期为CRC的个体化治疗提供生物标志物。方法:建立L-OHP耐药细胞株HT-29/L-OHP,提取细胞总蛋白,采用二维凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)和基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption-ionization time-of-flight tandem masss pectrometry,MALDI-TOF-MS)筛选并鉴定与亲本HT-29细胞差异表达的蛋白,并应用蛋白质印迹法对鉴定获得的部分蛋白进行验证。结果:建立CRC亲本细胞株HT-29和L-OHP耐药细胞株HT-29/L-OHP蛋白的2-DE图谱,共获得表达差异2倍以上的蛋白质点38个,经MALDI-TOF-MS分析,有37个得到鉴定,与亲本细胞相比,表达上调的有17个,表达下调的20个;蛋白质印迹法检测结果显示,多聚胞嘧啶结合蛋白1[poly(C)-binding protein-1,PCBP1]和TUBB2A(tubulin beta-2A)蛋白在HT-29/L-OHP细胞中表达上调,膜联蛋白A3(annexin A3,ANXA3)和磷酸化应激诱导蛋白(stress-induced-phosphoprotein 1,STIP1)表达下调,与MALDI-TOF-MS的实验结果相一致。结论:筛选获得37个与CRC对L-OHP耐药的相关蛋白,为进一步研究CRC对L-OHP耐药机制提供了有力的实验依据。 宗明珠 冯婉婷 杜楠 叶丽霖 陶善东 付宪华 何敬东 周建伟关键词:结直肠肿瘤 肿瘤 电泳 质谱分析法 奥沙利铂 HT-29细胞 高三尖杉酯碱对K562细胞NF-κB和BCL-2蛋白表达的影响 被引量:5 2013年 本研究旨在探讨高三尖杉酯碱(HHT)对K562细胞增殖、凋亡及BCL-2和NF-κB蛋白表达的影响。不同浓度HHT作用K562细胞后用MTT法、流式细胞仪、Western blot等方法分别检测细胞增殖、凋亡、BCL-2及NF-κB蛋白表达水平。结果表明,HHT作用48 h,浓度依赖性抑制K562细胞增殖,IC50为43.89 ng/ml。HHT 10 ng/ml作用48 h,K562细胞凋亡率明显增高;细胞周期阻滞于G0/G1期;BCL-2和NF-κB蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.05)。结论:HHT对K562细胞有显著的增殖抑制、细胞周期阻滞和凋亡诱导作用,抑制NF-κB和BCL-2表达可能是其抗CML的机制之一。 叶丽霖 曹维克 史玉叶 邓之奎 陶善东 吉萍 付宪华 宗明珠 李玉峰关键词:高三尖杉酯碱 K562细胞 BCL-2 NF-ΚB 高三尖杉酯碱诱导K562细胞凋亡的时间节律性及其机制研究 被引量:6 2014年 本研究旨在观察高三尖杉酯碱(HHT)作用于K562细胞后不同时间点凋亡率的变化及其机制。HHT 10ng/ml作用K562细胞后,用MTT法检测不同时间点的细胞增殖活力,Western blot法检测caspase-3凋亡蛋白表达;流式细胞术检测BCL-2蛋白表达;应用透射电子显微镜观测细胞自噬。结果表明,HHT 10 ng/ml处理后的前5 d,K562细胞增殖活性逐渐下降,但在第6天以后增殖活性又逐渐上升;同时激活型caspase-3蛋白从第1天至第7天逐渐增高,而在第8天明显降低(P<0.05);BCL-2蛋白表达水平则呈现先降低后升高(P<0.05)的特点。细胞自噬体在HHT作用第8天明显增多。结论:HHT作用后,K562细胞凋亡水平变化呈现先升高后下降的特点,其机制与HHT作用后期K562细胞自噬水平升高有关。 卢雪莹 曹维克 叶丽霖 邓之奎 张晓慧 李玉峰关键词:高三尖杉酯碱 K562细胞 CASPASE-3 BCL-2 干扰素-α联合高三尖杉酯碱对K562细胞增殖及β-catenin基因表达的影响 被引量:3 2012年 本研究探讨干扰素-α(IFN-α)联合高三尖杉酯碱(HHT)对K562细胞增殖、凋亡、细胞周期及β-环联蛋白(β-catenin)基因表达的影响。用IFN-α、HHT单药或两药联合处理后,K562细胞的增殖、凋亡、细胞周期及β-catenin mRNA表达水平分别用MTT法,流式细胞术及RT-PCR方法检测。结果显示,单用HHT能明显抑制K562细胞增殖,诱导凋亡,使细胞阻滞在G0/G1期,β-catenin表达下调,呈时间和剂量依赖性,而IFN-α无此作用。HHT组的β-catenin表达水平为0.5576±0.0373,低于空白对照组(0.9369±0.0142)。IFN-α联用HHT组β-catenin表达较单用HHT组下调更显著(0.3737±0.0529 vs 0.5576±0.0373,P<0.05)。HHT联合IFN-α对正常人骨髓单个核细胞未见明显毒性作用。结论:IFN-α联用HHT可明显增强后者的抗K562细胞作用,而β-catenin表达下调可能为其作用机制之一。 史玉叶 曹维克 刘小宁 邓之奎 郭华 冯婉婷 叶丽霖 朱家斌 李玉峰关键词:干扰素-Α 高三尖杉酯碱 Β-CATENIN K562细胞 细胞自噬与肿瘤耐药的研究进展 被引量:5 2013年 细胞自噬(简称自噬)是广泛存在于真核细胞中的生命现象〔1〕,它与细胞的正常生长、分化、凋亡以及多种疾病的发生、发展密切相关。细胞自噬对肿瘤的生长具有双重影响:一方面,能保护正常细胞抑制肿瘤细胞的生长;另一方面,能促进肿瘤细胞的生长。研究发现,自噬的发生与肿瘤的耐药密切相关,抑制自噬可能成为一种有效地肿瘤治疗策略。 叶丽霖 李玉峰关键词:细胞自噬 肿瘤 肿瘤耐药 肿瘤治疗