刘桂珍
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：上海生物制品研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 甲醇酵母分泌表达重组人干扰素α1b纯化工艺的建立被引量：2
- 2004年
- 建立适合大规模、低成本生产重组人干扰素α1b(Recombinanthumaninterferon α1b ,rhIFN α1b)的纯化工艺。采用高效分泌表达rhIFN α1b的甲醇酵母工程菌发酵 ,收集离心后的上清液 ,超滤脱盐 ,经离子交换柱和分子筛柱层析纯化。纯化的rhIFN α1b的纯度为 98%以上 ,比活性 2 .4× 10 7IU/mg ,活性回收率 14 % ,相对分子质量 1980 0和等电点 5 .0。经检测 ,rhIFN α1b蛋白N 端 15个氨基酸序列与正常对照完全符合。该纯化工艺简便 ,时程短 ,重复性好 。
- 吴腾捷徐帆洪孙九如路煜叶凡史晓明刘桂珍郭盛淇
- 关键词：甲醇酵母纯化工艺
- 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测HIV-1感染被引量：1
- 2000年
- 为了解决窗口期和发病期的 HIV- 1感染者中，抗体产生不足和 (或 )由于病毒大量复制中和了血液中的抗体，用检测抗体的常规方法难以确认，这一个困扰临床和防疫工作者的难题，我们建立了用逆转录-聚合酶链反应检测 HIV- 1感染者血清中病原体的方法。其优点为： (1)敏感性强，检测结果无假阴性反应； (2)扩增 HIV- 1的 gag,pol和 env三个基因区的保守基因片段，且每个片段都做巢式扩增，并规定扩增出两个片段才能确认，特异性为 100％； (3)所用的引物不仅能检测出中国的 HIV- 1流行株，也能检出非洲的 HIV- 1流行株； (4)使用了 RNA提取试剂盒，可直接利用筛选试验剩余的血清作标本，标本用量少 (200μ L)，方法相对较简便。
- 戴玉琳钟平刘桂珍张晓航
- 关键词：HIV-1艾滋病抗体RT-PCR
- 甲醇酵母分泌表达重组人干扰毒α1b纯化工艺的建立
- 建立合适大规模、低成本生产重组人干扰素α1b(Recombinant Human Interferon-α1b,rhIFN-α1b)的纯化工艺.采用高效分泌表达rhIFN-α1b的甲醇酵母工程菌发酵,收集离心后的上清液,...
- 吴腾捷徐帆洪孙九如路煜叶凡史晓明刘桂珍郭盛淇
- 关键词：甲醇酵母纯化工艺
- 文献传递
- 甲醇酵母分泌表达重组人干扰素a1b纯化工艺的建立
- 建立适合大规模、低成本生产重组人干扰素alb(Recombinant humaninterferon-alb-alb)的纯化工艺。采用高效分泌表达rhIFN-alb 的甲醇酵母工程菌发酵,收集离心后的上清液,超滤脱盐,经...
- 吴腾捷徐帆洪孙九如路煜叶凡史晓明刘桂珍郭盛淇
- 关键词：甲醇酵母纯化工艺
- 文献传递
- HCV C区基因片段的克隆、表达及纯化被引量：1
- 2001年
- 目的研究 ＨＣＶ Ｃ区片段在大肠杆菌中的表达及纯化工艺。方法采用 ＲＴ－ＰＣＲ技术，从ＨＣＶ感 染者血清中克隆Ｃ区基因片段，插入ｐＥＴ２８ａ（＋）质粒中，并在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中表达。采用亲和层析或 Ｓａｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－２００柱层析纯化抗原。结果两种纯化工艺的收率分别为５８ｍｇ／Ｌ和９５ｍｇ／Ｌ发酵液。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示纯 度分别为９８％和９０％。ＥＬＩＳＡ检测纯化抗原具有较好的抗原性和特异性。结论两种纯化工艺简便，重组蛋白纯 度高，可用于ＥＬＩＳＡ试验。
- 朱为刘桂珍史晓明宣维平钟平
- 关键词：HCVRT-PCR
