佟强
- 作品数：5 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南京医科大学更多>>
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- 干扰SKP1基因对帕金森病细胞模型凋亡及泛素蛋白酶体系统的调控机制被引量：4
- 2022年
- 目的探讨干扰S期激酶相关蛋白1(S-phase kinase associated protein 1,SKP1)基因对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导致帕金森病(Parkinson's disease,PD)细胞模型凋亡及泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)降解α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)机制的影响。方法将SH-SY5Y细胞分为对照组、MPP+组、SKP1干扰组、SKP1干扰+MG132(UPS抑制剂)组,对照组细胞正常培养,后三组细胞先用MPP+(0.5 mmol/L)孵育24 h作为PD模型细胞,SKP1干扰组转染慢病毒SKP1-siRNA,SKP1干扰+MG132组转染慢病毒SKP1-siRNA后加入MG132(0.5μmol/L)干预24 h。采用RT-PCR和Western blot检测细胞中SKP1、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein l light chain 3,LC3)、溶酶体相关膜蛋白2(lysosome-associated membrane protein,LAMP2)、α-syn、泛素激活酶E1(ubiquitin activating enzyme E1,UBE1)、parkin、p27的基因和蛋白表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡与细胞周期水平,CCK-8法检测细胞增殖水平;采用免疫共沉淀法探究SKP1与p27的相互作用。使用SPSS 23.0软件进行统计学分析,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD检验。结果RT-PCR和Western blot结果显示,四组细胞的自噬相关蛋白及泛素相关蛋白LC3、LAMP2、α-syn、UBE1、parkin、p27的mRNA(F=99.155,43.028,138.464,28.200,22.009,28.147,均P<0.05)和蛋白(F=245.517,157.634,315.920,2336.472,477.429,2350.201,均P<0.05)表达水平均差异有统计学意义。SKP1干扰组LC3、LAMP2、α-syn、p27的mRNA和蛋白表达水平均低于MPP+组(均P<0.05),UBE1、parkin的mRNA和蛋白表达水平均高于MPP+组(均P<0.05);SKP1干扰+MG132组LC3、α-syn、p27的mRNA和蛋白表达水平均高于SKP1干扰组(均P<0.05),UBE1、parkin的mRNA和蛋白表达水平均低于SKP1干扰组(均P<0.05)。流式细胞术和CCK-8法检测结果显示,四组间细胞凋亡率和细胞抑制率均差异具有统计学意义(F=2749.420,171.508,均P<0.05)。SKP1干扰组细胞凋亡率�
- 孙振杰佟强高琪卢婷陈泉田向阳孙波
- 关键词：帕金森病泛素-蛋白酶体系统Α-突触核蛋白
- PPARβ/δ激活在帕金森病中的保护作用及机制研究
- 帕金森病(Parkinson’s disease, PD)是一种以运动障碍为主要临床表现的慢性神经变性疾病,严重影响患者的生活质量。PD常见于中老年人,在老年人群中的患病率随着年龄增加而增长,伴随着我国老龄化的进程,现已...
- 佟强
- 关键词：帕金森病内质网应激替米沙坦
- AT<sub>1</sub>R拮抗剂对Alzheimer病动物学习记忆及tau蛋白磷酸化影响的研究
- AT1R拮抗剂对Alzheimer病动物学习记忆及tau蛋白磷酸化影响的研究阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)是以进行性记忆损害、认知障碍和行为改变为主要表现的慢性神经退行性疾病,是老年痴呆中最常...
- 佟强
- 关键词：水迷宫TAU蛋白
- CacyBP/SIP介导的Parkin依赖型线粒体自噬对DA能神经元凋亡及细胞周期的调控作用被引量：2
- 2022年
- 目的探讨钙周期素结合蛋白(CacyBP/SIP)介导的Parkin依赖型线粒体自噬对多巴胺(DA)能神经元凋亡及细胞周期的调控作用。方法将SH-SY5Y细胞分为模型组、对照组、CacyBP/SIP组, 其中模型组细胞用1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+, 0.5 mmol/L)处理24 h, 对照组及CacyBP/SIP组细胞分别模型组细胞基础上进一步转染空载慢病毒或CacyBP/SIP-sgRNA慢病毒。采用Western blotting实验检测各组细胞中CacyBP/SIP、微管相关蛋白1轻链3(LC3)、溶酶体相关膜蛋白2(LAMP2)、磷酸酶张力蛋白诱导激酶1(Pink1)、Parkin、P53、Bcl-2、Bax的蛋白表达水平, 采用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡水平及细胞周期情况, 采用免疫荧光单染法检测各组细胞中LC3、LAMP2的表达情况, 采用免疫荧光双染法检测各组细胞中CacyBP/SIP与Parkin的共表达情况。结果与模型组、对照组比较, CacyBP/SIP组CacyBP/SIP、LAMP2、Pink1、Parkin蛋白的表达明显减少, LC3-Ⅱ/Ⅰ值明显降低, LC3-Ⅱ、LAMP2的免疫荧光染色强度明显降低, Bcl-2蛋白表达明显减少, Bax蛋白表达明显增加, Bcl-2/Bax值明显降低, 细胞凋亡率明显提高, P53蛋白的表达明显增加, G1期细胞占比明显增加, CacyBP/SIP与Parkin共表达的免疫荧光染色强度明显降低, 差异均有统计学意义(P<0.05)。结论敲除CacyBP/SIP基因后, Parkin蛋白降低导致细胞阻滞于G1期, 并介导Parkin依赖型线粒体自噬功能降低, 从而导致细胞凋亡水平提高。
- 朱礼刚孙波佟强陈泉田向阳杨艳史沛芹孙振杰
- 关键词：帕金森病钙周期素结合蛋白细胞周期
- AT1R拮抗剂对Alzheimer病动物学习记忆及tau蛋白磷酸化影响的研究
- AT1R拮抗剂对Alzheimer病动物学习记忆及tau蛋白磷酸化影响的研究阿尔茨海默病(Alzheimer disease, AD)是以进行性记忆损害、认知障碍和行为改变为主要表现的慢性神经退行性疾病,是老年痴呆中最常...
- 佟强
- 关键词：水迷宫TAU蛋白
- 文献传递
