何蕴绍
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：中山大学达安基因诊断中心更多>>
- 发文基金：国家科技部专项基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 荧光定量RT-PCR检测AFP mRNA基因表达方法的建立被引量：5
- 2005年
- 目的 建立荧光定量RT PCR检测检测AFPmRNA基因表达的方法。方法 提取肝癌细胞株HepG2 的总RNA ,进行RT PCR扩增AFPmRNA特异性片段 ,纯化PCR产物并与pMD 18 T载体连接 ,构建重组质粒。结果 重组的质粒经酶切和测序鉴定 ,目的片段已插入 pMD 18 T载体内。 结论 成功建立荧光定量RT PCR检测AFPmRNA基因表达的方法。
- 张宴何东华何蕴绍
- 关键词：AFPMRNA荧光定量RT-PCR肝细胞癌
- 含漱液中冠状病毒的即时检测研究(一)被引量：1
- 2003年
- 目的 建立冠状病毒抗原早期快速诊断方法。方法 采集非典型肺炎病人 ( 16 3例 )、疑似病人 ( 2 8例 )、发热待查者 ( 17例 )、医学观察对象 ( 43人 )和正常人 ( 33人 )含漱液 ,应用实时荧光定量PCR(FQ -PCR)方法和试剂盒 ,进行冠状病毒抗原检测。结果 入院后 3d以内的非典型肺炎病例 93例 ,占 5 7.1%;入院第 4～ 2 0d 70例 ,占42 9%。 93例检出 5 3例冠状病毒抗原阳性者 ,总阳性率为 5 7 0 %;其中入院第 1d为 5 0 0 %,第 2d为 6 9 2 %,第 3d45 5 %。入院 4d后的 70例中检出 5名 ,阳性率仅为 7 1%。 2 8名疑似非典型肺炎患者含漱液阳性率为 3 4%;发热待查者、医学观察对象和正常人均未检出冠状病毒抗原阳性者。通过对含漱液中不同入院时间冠状病毒的检测 ,发现入院第 2d冠状病毒抗原阳性率最高 ,第 3d开始明显下降 ,第 4d以后已经达到很低的水平。结论 该检测方法度灵敏高 ,最低可检出 1个拷贝的基因 ;特异度高 ,能够满足临床诊断和医学观察对象和密切接触者筛查的要求 ;实时检测 ,准确定量 ,误差小 ;全封闭检测 ,杜绝产物污染导致的假阳性 ;单人份试剂包装 ,质量稳定 ,使用方便 ;符合卫生部和国家食品与药品监督管理局规定 ,可以大规模用于临床检验。
- 高星程钢何蕴绍林长樱刘海林贾明艳罗会英王如岗石维先丁立新韩丽丽黄芳
- 关键词：冠状病毒含漱液实时荧光定量PCR法
- Alzheimer病患者外周血HO-1基因表达水平的改变
- 2006年
- 目的建立荧光定量PCR方法检测A lzheim er病(AD)患者外周血中血红素加氧酶1(HO-1)基因的表达水平,并探讨其表达水平的改变与AD发病的关系。方法在HO-1的基因高保守区设计并合成特异性引物和荧光标记探针。将PCR扩增目的片段用AT克隆的方法克隆入T载体,重组质粒经筛选、鉴定后,作为阳性模板,用于标准曲线的制备和样品检测,并用该方法检测30例AD患者和23例正常老年人对照组外周血HO-1基因mRNA水平。结果应用重组质粒制作的定量曲线循环阈值与模板浓度具有良好的线性关系。AD组HO-1基因平均表达水平(7.04×105±5.96×105)cop ies/μg RNA高于对照组(1.62×105±3.31×105)cop ies/μg RNA(P<0.001)。结论建立了荧光定量PCR方法用于检测AD患者外周血HO-1基因的表达水平,具有较好的检测灵敏度和重复性。HO-1在AD患者外周血中的表达有所增加。
- 陈辉刘明杰汪华侨程刚何蕴绍
- 关键词：荧光定量PCRALZHEIMER病血红素加氧酶1基因表达
