- 猪DNA免疫调节分子新技术研究
- 高荣王泽洲李江凌吕学斌武梅李瑛孟民杰李惠刘锐曾凯章欢沈翼吴凯源付满良席隆一陶凤杨毅陈茜谢曌赵钟钟王颖玉徐志刚程驰
- 1、课题来源与背景：该项目是在国家自然科学基金“白细胞介素2和6的基因改组研究”，四川省重点科技攻关项目“新型动物抗病融合基因的研究和应用”，“多功能新型高效抗动物感染DNA分子制剂的研制”、四川省科技厅“新型抗感染免疫...
- 关键词：
- 关键词：养猪动物养殖
- CpG壳聚糖纳米颗粒对小鼠乙型肝炎疫苗免疫应答的影响被引量：1
- 2008年
- 为探索高效安全的分子免疫增强剂,本实验设计合成含11个CpG基序的寡聚核苷酸(CpG ODN),制备壳聚糖纳米颗粒包裹CpG ODN,研究新型CpG ODN壳聚糖纳米颗粒(CpG-CNP)对人乙型肝炎疫苗的免疫佐剂效应。在肌注乙型肝炎疫苗免疫6周龄昆明小鼠的同时,肌注接种裸CpG ODN 30 pmol/只(A1组)和CpG-CNP 5pmol/只(A2组),口服CpG-CNP 30 pmol/只(B组),并设生理盐水空白疫苗对照组(C组)。在接种后每周采血,Sandwich ELISA检测实验小鼠IL-2、IL-4、IL-6、IgG、IgA和IgM水平以及特异性抗体(HbsAb)含量和免疫细胞数量的变化。结果发现各实验组小鼠的白细胞介素、血清免疫球蛋白、乙肝特异抗体和外周血免疫细胞均较对照组显著增多(P<0.05);CpG-CNP肌注组小鼠血液的免疫球蛋白、特异性乙肝表面抗体和白细胞介素含量、淋巴细胞和单核细胞数量较A1组和B组显著增加(P<0.05)。CpG-CNP口服组与裸CpG肌肉注射组无显著差异(P>0.05)。这些表明CpG-CNP不仅能高效诱导小鼠对乙肝疫苗的体液免疫应答,同时也显著增强其细胞免疫应答;CNP包裹可提高CpG的免疫刺激效应,减少CpG剂量,提示新CpG-CNP肌注或口服可用于HBV的免疫预防。
- 彭蓉黄杰吴凯源杨肖李栋付满良武梅章欢章华兵程驰高荣
- 关键词：CPG乙型肝炎疫苗免疫小鼠
- 新型CpG免疫刺激分子的构建及其免疫活性研究
- 为探索安全高效的新型动物分子免疫增强剂,本实验设计了一新型CpG寡聚脱氧核苷酸/(oligodeoxynucleotide,ODN/),包含11个CpG基序,同时设计一对引物,在其两端引入PstⅠ酶切位点。应用PCR技术...
- 付满良
- 关键词：疫苗免疫应答
- 文献传递
- 猪白细胞介素－6基因抗感染免疫增强剂的制备和应用
- 该发明所属技术领域：1.生物技术，2.分子免疫学。本发明克隆了成华猪白细胞介素－6基因，并构建了其真核表达质粒(VPIL－6)，以分子量为150000、脱乙酰度95％以上的壳聚糖制备了壳聚糖纳米颗粒，提供了利用壳聚糖纳米...
- 高荣孟民杰武梅王泽州李江凌吕学斌李惠吴凯源付满良杨毅章欢
- 文献传递
- 猪白细胞介素－4、6融合基因抗病制剂
- 本发明公开猪白细胞介素－4、6融合基因抗病制剂的制备和应用技术。先克隆猪白细胞介素基因4和6，再融合猪白细胞介素－4、6基因，构建融合基因的真核表达质粒(VPIL46)，用离子交联法制备壳聚糖纳米颗粒分子包装质粒：将质粒...
- 高荣武梅孟民杰李江凌王泽洲吕学斌李惠付满良吴凯源杨毅沈翼
- 文献传递
- 壳聚糖纳米颗粒包裹对鼠白细胞介素2基因表达和调节小鼠免疫效应的影响
- 本实验制备壳聚糖纳米颗粒(CNP),包裹小鼠白细胞介素2基因(mIL-2)真核表达质粒(VRMIL2),肌注接种21d昆明小鼠,观察mlL-2基因体内表达及其对免疫应答和免疫保护的影响。实验结果发现:CNP包裹VRMIL...
- 李惠高荣武梅付满良吴凯源杨毅王秀英王泽洲
- 关键词：免疫应答小鼠
- 文献传递
- CpG基序重组质粒增强小鼠免疫和抗病力的效应被引量：1
- 2007年
- 为研制安全高效免疫调节剂增强动物免疫抗病能力,本实验设计合成含11个CpG基序的寡聚核苷酸,重组构建含CpG的VR1012质粒(VR1C);制备壳聚糖纳米颗粒包裹重组质粒(CNP-VR1C),肌注接种3周龄昆明小鼠;接种后28天口服大肠杆菌攻毒观察小鼠天然免疫的变化和对强毒感染的抵抗力,Sandwich ELISA测定血清免疫球蛋白和白细胞介素含量。结果表明:CNP-VR1C能显著提高小鼠的天然免疫水平,增强对强毒感染的抵抗力,具有研制为高效安全分子免疫增强剂的应用潜力。
- 靳艳周传军付满良谢曌程驰杨毅章欢陈茜王颖玉赵钟钟王秀英武梅高荣
- 关键词：小鼠CPG基序天然免疫
- 猪白细胞介素－4基因抗病制剂的制备和使用技术
- 该发明所属技术领域：1.生物技术，2.分子免疫学。本发明克隆了藏猪白细胞介素－4基因，并构建了其真核表达质粒(VTPIL－4)，以分子量为150000、脱乙酰度95％以上的壳聚糖制备了壳聚糖纳米颗粒，提供了利用壳聚糖纳米...
- 武梅高荣李惠吴凯源付满良杨毅章欢刘狄广程驰李化
- 文献传递
- CpG DNA分子抗感染免疫制剂的制备和应用
- 该发明所属技术领域：1.生物技术，2.分子免疫学。本发明人工合成了能刺激猪、黄牛及牦牛等动物免疫细胞增殖活性的CpG寡聚核苷酸序列，并提供了包装此段CpG DNA分子以制备抗感染基因纳米颗粒制剂的方法，公开了该CpG纳米...
- 武梅高荣李惠付满良吴凯源杨毅章欢程驰刘狄广李化
- 文献传递
- 牦牛白细胞介素2(IL2)基因cDNA的分子克隆和表达研究(英文)被引量：3
- 2005年
- 目的克隆牦牛免疫基因并研究其免疫特性。方法以伴刀豆球蛋白A(Con A)激活的体外培养的牦牛血液淋巴细胞,提取激活淋巴细胞的总RNA,用RT-PCR方法,从中克隆出白细胞介素2 cDNA,连接到T载体上测序,并亚克隆到pGEX4T-1表达质粒,在大肠杆菌进行了重组表达,纯化融合表达YIL2产物,MTT比色法测定其体外刺激牦牛血液淋巴母细胞增殖的免疫活性。结果YIL2 cDNA序列分析显示:在其编码区442位点的一个碱基发生突变(由C突变为T),从而导致终止密码子(TAA)出现,使YIL2蛋白表达提前终止,与其它牛IL2蛋白相比少了8个氨基酸。MTT比色法测定结果表明重组牦牛IL2蛋白体外能显著促进牦牛淋巴母细胞的增殖。结论本实验成功克隆了牦牛IL2基因,其原核表达产物具有显著的免疫活性,这为研制新型免疫增强剂来提高牦牛对各种疾病的抵抗力,增强牦牛疫苗的免疫保护率奠定了基础。
- 付满良李惠武梅王丽焕吴凯源宁健可高荣
- 关键词：牦牛原核表达生物活性
