严自正
- 作品数：34 被引量：266H指数：9
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国科学院科研项目“九五”国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程医药卫生更多>>
- 溜曲霉β-N-乙酰氨基己糖苷酶的化学修饰被引量：1
- 1992年
- 用几种蛋白质侧链修饰试剂对β-N-乙酰氨基己糖苷酶进行化学修饰,在一定条件下,当巯基、羟基、酪氨酸残基分别被 IAA 及 NEM、PMSF、NAI 修饰后,酶活力不受影响,说明这些基团与活力无关。当羧基、组氨酸及色氨酸残基分别被 EDC、DEP、NBS 修饰后,酶活力大幅度下降,说明这些基团或者参与了酶催化作用,或者位于酶活性位区附近。
- 李梅陶勇严自正张树政
- 关键词：溜曲霉乙酰氨基
- 麦芽四糖淀粉酶的晶体培养及初步衍射研究被引量：2
- 1997年
- 麦芽四糖淀粉酶是水解方式独特、其产物又具有较广泛应用价值的一种淀粉酶。应用悬滴汽相扩散法，用从产碱菌发酵培养液分离纯化得到的麦芽四糖淀粉酶成功地培养出了质量较好的单晶体。测得该种晶体属正交晶系，空间群为Ｐ２１２１２１，晶胞参数ａ＝４６．６Ａ。，ｂ＝６５．８Ａ。，ｃ＝１７０．９Ａ。，一个不对称单位含一个麦芽四糖淀粉酶分子。用ＭａｒＲｅｓｅａｒｃｈＩＰ面探测器收集了一套分辨率高于２．７Ａ。的衍射强度数据。
- 马建华王耀萍韩毅毕汝昌朱静严自正
- 关键词：淀粉酶麦芽四糖淀粉酶生物物理衍射
- 溜曲霉β-N-乙酰氨基己糖苷酶的催化特性
- 1992年
- 巳纯化的溜曲霉β-N-乙酰氨基己糖苷酶(表现出β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶和β-N-乙酰氨基半乳糖苷酶活力)水解对硝基酚-N-乙酰氨基葡萄糖苷和对硝基酚-N-乙酰氨基半乳糖苷,其 K_m 值分别为0.44和2.0mmol/L。V_(max)值分别为740.0和476.5μmol·min^(-1)·mg^(-1)。氨基葡萄糖、氨基半乳糖、GlcNAc 及 GalNAc 均为这两个酶的竞争性抑制剂,对β-GlcNAcase的 K_1 值分别为34.9、62.5、16.9及38.2mmol/L,而对β-GalNAcase 的 K_1值分别为24.1、75.0、50.0及131.8mmol/L。将 pNPGlcNAc 和 pNPGalNAc 等量混合为底物,其酶活力小于单独以 pNPGlcNAc 为底物的活力,大于以 pNPGalNAc 为底物的活力。两种底物以不同摩尔分数混合测活结果,用 Lineweaver-Burk 双倒数法作图,均为直线,求出表观 V′_(max),将各个 V′_(max) 对摩尔分数 f(从 f=0至 f=1)作图,没有出现最大值。由抑制作用及混合底物竞争动力学说明β-GlcNAcase 和β-GalNAcase 同存在于一个蛋白质,并共用一个活力部位。
- 陶勇严自正张树政
- 关键词：溜曲霉糖苷酶
- 酶法生产麦芽四糖的研究
- 碱菌麦芽四糖淀粉酶分别糖化番薯淀粉、玉米淀粉糯米淀粉、糖原糊精、番薯粉、玉米粉、大米粉及芭蕉粉，结果均产生麦芽四糖及微量的麦芽三糖和麦芽糖，淀粉水解限度为50～80℅，淀粉转化率在50℅以上，这表明可利用广泛的原料是生产...
- 梁改芹严自正
- 关键词：酶法麦芽四糖
- 米曲霉在产脱氨酶过程中的超微结构动态被引量：2
- 1989年
- 腺苷酸脱氨酶(AMP deaminase,EC 3.5.4.6)催化5′一腺苷酸脱氨生成5′一肌苷酸。核酸经5′-磷酸二酯酶降解后,用AMP催化其中5′一腺苷酸使其生成5′一脱苷酸。产脱氨酶高活力米曲霉菌株(Aspergillus oryzae)AS3.800,在制作麸麯过程中,当米曲霉分生孢子颜色由浅黄变为绿色时,酶活力下降。现对培养1.5、2、2.5及3天的麸麯进行了电镜观察与脱氨酶活性测定,希望能找到米曲霉菌体发育过程与产酶之间的相关性。
- 王程严自正
- 关键词：米曲霉脱氨酶超微结构
- 生淀粉酶产生菌的分离和筛选被引量：17
- 1992年
- 从土壤及腐烂的淀粉质样品中分离到190株霉菌,由其中筛选到降解生淀粉能力(RDA)较强的Rhisopus sp.33,Aspergillus sp.6,Penieillium sp.127等三株菌。测定表明,其降解生玉米淀粉的RDA分别为14.4%,11.1%,20.1%o经纸层析鉴定,三株菌降解生淀粉的产物均为葡萄糖。
- 谢舜珍严自正张树政
- 关键词：生淀粉酶根霉曲霉青霉
- 海枣曲霉木聚糖酶Ⅲ糖组成及糖肽结合键研究被引量：2
- 1996年
- 海枣曲霉木聚糖酶Ⅲ经PAGE和SDS-PAGE后用Schiff’s试剂染色证明为糖蛋白。经硅胶薄层层析和毛细管气相色谱测定,每分子酶约含4个葡萄糖和1个甘露糖残基。 木聚糖酶Ⅲ经β-消除反应后在241nm处出现一个新的吸收峰。在N_2保护下用含NaBH_4的NaOH溶液处理后,其Ser和Thr减少,相对应丙氨酸增加,并出现α-氨基丁酸。估测酶分户中存在约3个O-糖苷键,糖残墓通过O-糖苷键连接于肽链中丝氨酸或苏氨酸上。
- 江均平严自正张树政
- 关键词：海枣曲霉真菌木聚糖酶
- 黑曲霉木聚糖酶的纯化与性质被引量：33
- 2000年
- 由凝胶电泳酶谱检测到黑曲霉１４９发酵液中存在两型木聚糖酶，依次为Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ．通过硫酸铵分级沉淀及ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ５０柱层析分别将Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ纯化到凝胶电泳均一。由ＳＤＳ一凝胶电泳和浓度梯度凝胶电泳测得Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ的分子量分别为３７ｋＤａ，７６ｋＤａ，２４ｋＤａ和２３ｋＤａ，Ｘ－Ⅰ具有亚基。二者的含糖量分别为２７６％和７．３％。Ｘ－Ⅰ和Ｘ－Ⅱ最适反应温度分别为５０℃和５５℃，ｐＨ为４６和５．２。在ｐＨ４．６～９．２和ｐＨ４．０～１０．０之间Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ活力稳定。５０℃保温２４ｈ，Ｘ－Ⅰ活力仍为１００％，而Ｘ－Ⅱ的活力已降为２．８％。ＨｇＣｌ２和ＡｇＮＯ３显著抑制Ｘ－Ⅰ、Ｘ－Ⅱ的活力。Ｘ－Ⅰ与Ｘ－Ⅱ水解不同来源的木聚糖，其产物有所不同。
- 陈红歌朱静梁改芹严自正贾新成张树政
- 关键词：黑曲霉木聚糖酶纯化纸浆漂白
- 焦曲霉右旋糖酐酶的纯化和性质被引量：6
- 1992年
- 用制备凝胶电泳从焦曲霉(Aspergilluts ussus)菌株的培养液中分离纯化了右旋糖酐酶(EC 3.2.1.11)。纯酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析为均一的,比活力为820 u/mg,提高20.5倍。酶作用最适 pH 为5.0—5.5,最适温度为50℃,在 pH 4.5—7.5和40℃以下稳定,在50℃保温30分钟酶活力损失55%。用 SDS-凝胶电泳测定酶的分子量为68000,用聚丙烯酰胺凝胶薄层等电聚焦电泳测得 pI 值为5.5。紫外吸收光谱在274nm 有最大吸收值,低谷在252 nm。纯酶只作用于α-1,6-葡萄糖苷键,水解右旋糖酐的产物为异麦芽糖、异麦芽三糖、葡萄糖和少量的较高聚合度的异麦芽寡糖,该酶为内切型的。作用于交联葡聚糖凝胶(Sephadex)时,随其交联度的增加酶作用能力减弱。纯酶作用于不同分子量的右旋糖酐(MW:2×10~4、1×10^(?)、4×10~4)的K_m值分别为0.30%、0.61%和0.70%。Hg^(2+)、Ag^+对酶完全抑制,Cu^(2+)、Mn^(2+)、Pb^(2+)、Be^(2+)、Fe^(3+)和 F^-对酶有一定的抑制作用,金属螯合剂 EDTA 对酶活性无影响,N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)对酶强烈抑制。
- 程秀兰孙晋武王海燕严自正张树政
- 关键词：纯化
- 酸性木聚糖酶产生菌的筛选及产酶条件被引量：39
- 1999年
- 从１５０株真菌中筛选到８株产木聚糖酶活力在１００Ｕ／ｍＬ以上的菌株，其中活力最高的为黑曲霉（编号１４９）（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｎｉｇｅｒ）。该菌株产酶较适培养基为：麸皮半纤维素４％，ＮａＮＯ３１％，麸皮１％，用不加（ＮＨ４）２ＳＯ４和尿素的Ｍａｎｄｅｌｓ氏营养盐液配制。２８℃～３０℃振荡培养６０ｈ，酶活力最高可达３７５．２Ｕ／ｍＬ。该酶最适作用ｐＨ为４６，在ｐＨ３～１１之间基本稳定。该菌株发酵液中含有木聚糖酶（相对活力１００）外还有淀粉酶（１８），甘露聚糖酶（０９８），β木糖苷酶（０９４）和纤维素酶（０１７）。
- 陈红歌朱静梁改芹严自正张树政
- 关键词：黑曲霉木聚糖酶发酵条件
