齐建国
- 作品数：17 被引量：10H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 利用正义和反义技术研究着丝粒/动粒复合体蛋白CENP-B在细胞周期调控中的作用被引量：1
- 2005年
- 为研究着丝粒/动粒复合体蛋白(centromere/kinetochore complexprotein-B,CENP-B)高表达和低表达在细胞周期调控中的作用,将全长CENP-BcDNA基因(cenpb)构建到pBI-EGFP真核表达载体上,获得正义和反义cenpb真核表达重组质粒,并转染HeLa-Tet-Off细胞.结果表明,正义质粒转染导致细胞产生巨型着丝粒/动粒复合体,细胞分裂几次后发生凋亡;转染反义质粒至HeLa-Tet-Off细胞,克隆筛选获得稳定表达反义cenpb的细胞株HACPB.HACPB细胞着丝粒/动粒复合体小、数量多,CENP-B表达量低;细胞周期延长,恶性表型降低,裸鼠致瘤能力降低,G2/M期向下一周期的G1期过渡发生延迟.细胞周期蛋白相关激酶(cyclin-dependentkinases,CDKs)、细胞周期蛋白、细胞周期蛋白相关激酶抑制剂(CDKinhibitors,CKIs)等的表达在某时相发生特异的变化.这些结果说明,CENP-B是维持着丝粒/动粒复合体正常结构和功能的必需组分,并参与细胞周期调控.
- 罗松林海燕齐建国王永潮
- 关键词：CENP-B细胞周期调控
- 人免疫缺陷病毒早期蛋白Nef的表达、纯化及免疫原性研究
- 2008年
- 目的:通过原核细胞表达人免疫缺陷病毒(HIV)Nef抗原,制备特异抗血清,为Nef抗原检测提供技术方法。方法:以HIV Botswana毒株基因组为模板,用PCR法获得Nef蛋白编码基因,将其克隆到pET30a载体中,在大肠杆菌中表达Nef融合蛋白;用纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠获得抗血清,用真核表达的Nef抗原对其特异性进行分析。结果:构建的Nef融合基因在大肠杆菌中获得表达,相对分子质量约为36×103,免疫BALB/c小鼠获得针对融合蛋白的高效价抗血清,ELISA抗体滴度为1∶6400;免疫荧光和Western blot检测表明,该抗血清能特异地与重组痘苗病毒表达的Nef抗原反应。结论:在大肠杆菌中表达了HIV Nef融合蛋白,制备了Nef融合蛋白的高效价小鼠免疫血清,该血清能特异性识别HIV Nef抗原,为HIV Nef抗原检测提供了技术方法。
- 陆柔剑齐建国邓瑶王世峰王文玲辛伟李仁清阮力
- 关键词：人免疫缺陷病毒原核表达抗血清
- 反义p42对HeLa细胞分裂和增殖的影响
- p42蛋白是UPP通路(泛素蛋白水解酶复合体通路)中26S蛋白水解酶复合体19S帽状调节复合物的一个亚基,也是19S调节复合物依赖的蛋白水解酶调节子(modulator)的一个组成成分。为了探讨人p42基因对细胞增殖及分...
- 刘国霞罗松齐建国王谦彭安曾灵芳王永潮
- 关键词：P42泛素蛋白水解酶中心体
- 文献传递
- 泛素与EB病毒核抗原1融合基因的DNA免疫研究被引量：3
- 2004年
- 构建了EB病毒核抗原1(EBNA1)基因的表达质粒pCI-EBNA1和泛素(ubiquitin,Ub)与EBNA1融合基因的表达质粒pCI-Ub-EBNA1。间接免疫荧光和Westernblot分析表明,两重组质粒转染HeLa细胞后均能瞬时表达。两种质粒DNA肌肉注射免疫Balb/C小鼠后,分别检测小鼠血清抗EBNA1的抗体和特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应,比较单基因与融合基因DNA免疫所诱生免疫应答的强度。结果显示:二者诱生抗体的效率无明显差别,但泛素的融合使得针对EBNA1的特异性CTL反应明显增强。
- 王卫东齐建国谷淑燕桑建利
- 关键词：EBNA1融合基因核抗原DNA免疫泛素单基因
- 咖啡因增强抗癌药物对肝癌细胞毒性的作用
- 采用肝癌细胞系SMMC-7721为实验材料,用抗癌药物顺铂与咖啡因分步联合处理细胞,然后对细胞的生长及形态进行了观察,结果发现,如果用顺铂或咖啡因单独处理细胞,会不同程度的对细胞产生影响,但去除药物后,多数细胞在正常培养...
- 桑建利齐建国王永潮
- 文献传递
- 泛素与EB病毒核抗原1的融合表达载体的构建及表达
- 2006年
- 成功构建了EB病毒核抗原1(EBNA1)氨基端融合有泛素(ub iqu itin,Ub)的真核表达质粒pC I-Ub-EBNA1。间接免疫荧光分析表明,该重组质粒瞬时转染HeLa细胞后能有效表达。
- 王卫东齐建国
- 关键词：泛素EBNA1基因融合
- 一种新的钙依赖性的蛋白激酶基因CP4的克隆及其表达研究
- 2002年
- 在利用人ACA (Anti Centromere/KinetochoreAutoantibody)血清研究拟南芥ACA相关蛋白的过程中克隆了钙依赖性的蛋白激酶基因家族的一个不典型基因 ,称为CP4 ,GenBank注册号为AF130 2 5 2。Southern杂交结果表明 ,拟南芥基因组中至少存在两种以上等位形式的CP4。原位杂交结果表明 ,CP4mRNA在拟南芥的花和根中高表达 ,在果实和叶片中没有表达。此外还构建了CP4的高效表达载体 ,为进一步研究CP4的功能打下了基础。
- 王世峰罗松林海燕赵晖梁华齐建国王跃王永潮
- 关键词：拟南芥基因组蛋白激酶基因钙依赖性血清克隆
- 咖啡因对肝癌细胞系SMMC-7721细胞周期检验点的影响
- 为了研究咖啡因对细胞周期检验点的作用,以人肝癌细胞系SWC-7721为实验材料,首先采用TdR双阻断法将细胞同步化,经流式细胞术分析鉴定,双阻断后释放3小时的细胞,为刚进入S期细胞,其同步率达96％,此时在培养基中加入D...
- 桑建利齐建国王永潮
- 文献传递
- IDl对细胞增殖、分化和调亡的影响
- Idl可通过与bHLH类转录因子形成无活性的异二聚体,对转录因子进行负调控。建立HMBA诱导MEL细胞分化模型,利用绿色荧光蛋白真核表达载体通过正反义转染战略研究作为泛素降解底物分化抑制蛋白Idl在细胞由增殖走向分化和凋...
- 李扬宋长城罗松宋小元齐建国王永潮
- 关键词：增殖分化凋亡
- 文献传递
- EB病毒核抗原1羧基端的原核表达、纯化及其免疫学特性被引量：1
- 2004年
- 为进一步研究EB病毒核抗原 1(EBNA1)的功能及提高EB病毒 (EBV)相关疾病辅助诊断的特异性 ,对EBNA1基因 3′端的部分片段进行了原核表达、纯化并初步研究其免疫学特性 .采用PCR法扩增了EBNA1基因编码区 ,经酶切鉴定、序列分析后 ,将其 3′端 5 73bp片段克隆至原核表达载体pET30a中 ,得到重组质粒pET30a SS5 80 .该重组质粒转化大肠杆菌BL2 1(DE3)感受态细胞并经异丙基 β D 硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导表达出分子量约 2 5kD的融合蛋白 (2 5 kDEBNA1) .该蛋白以包涵体和可溶形式存在 ,均可用Ni2 + 离子亲和柱纯化 .Western印迹结果显示 ,该蛋白能与鼻咽癌 (NPC)病人血清发生特异性反应 .纯化的 2 5kDEBNA1蛋白免疫BALB c小鼠后 ,经ELISA检测获得了高效价的多克隆抗体 .免疫印迹和间接免疫荧光结果显示制备的免疫小鼠血清能够与HeLa细胞中瞬时表达的EBNA1蛋白发生特异性反应 ,且特异性优于鼻咽癌病人血清 .以上结果表明成功构建了EBNA1羧基端的原核表达质粒 ,并在大肠杆菌中高效表达了 2 5kDEBNA1蛋白 。
- 王卫东齐建国谷淑燕桑建利
- 关键词：原核表达纯化抗原性免疫原性
