齐岩
- 作品数：34 被引量：86H指数：5
- 供职机构：中国牧工商(集团)总公司更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家高技术研究发展计划广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 转OsMAPK4基因烟草的抗旱性研究与遗传分析被引量：8
- 2007年
- 以低温处理的水稻辽盐241植株叶片总RNA为模板,用OsMAPK4基因特异引物通过RT-PCR扩增出OsMAPK4基因,构建了由E12启动子调控的OsMAPK4基因植物表达载体pBME12。通过农杆菌介导法将OsMAPK4基因导入烟草,筛选获得25株转基因植株。抗旱性研究结果表明,OsMAPK4基因的超量表达提高了T1代转基因植株的抗旱性。卡那霉素抗性在T1代转基因植株中的分离情况表明,大多数转基因株系符合单基因遗传规律。
- 李杰齐岩李莹刘西燕冀好布套朱延明柏锡才华
- 关键词：转基因烟草抗旱性
- H9N2亚型禽流感病毒广东分离株的全基因克隆及序列分析被引量：6
- 2010年
- 本研究以一株2006年广东省分离的H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/Guangdong/HL/2006(H9N2)(简称Ck/GD/HL/06)为研究对象,用RT-PCR法扩增病毒基因组各片段(包括5′端和3′端的非编码区序列),将扩增片段进行克隆、测序并与参考毒株的相应序列进行比较分析,绘制各基因片段的系统发生树。分析结果表明,Ck/GD/HL/06株的HA基因同1997年中国香港鸭源毒株Dk/HK/Y280/97(H9N2)在同一进化分支,从HA的糖基化位点、受体结合位点等综合分析,该毒株HA基因未发生明显的变异,符合我国大陆H9亚型禽流感病毒的特点。HA的226位氨基酸残基为亮氨酸(Leu),具有同哺乳动物SAα,2-6受体结合的特性。Ck/GD/HL/06的PB1、PA和NP基因,同2004年越南分离的人源高致病性H5N1亚型流感病毒A/VietNam/1203/2004(H5N1)株(简写A/VN/1203/04)的核苷酸序列一致性分别是93.8%、95%和96.8%,在先前的研究中未见有类似特性毒株的报道,而这种特性H9N2亚型AIV的出现,是否会增加在重组过程中产生新的高致病性H5N1亚型AIV的可能性,是值得我们关注的一个问题,也提醒在我国华南地区应更加重视防控H9N2亚型AIV,做好长期对H9N2亚型AIV监控及分子流行病学调查的工作。
- 齐岩袁润余张贺楠亓文宝单芬胡玥李小康焦培荣廖明
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型全基因
- 检测鹅细小病毒抗体的重组原核表达检测抗原及制备方法
- 本发明提供的是一种检测鹅细小病毒抗体的重组原核表达蛋白抗原及其制备方法。本产品制备过程包括：(1)设计扩增GPV－VP3基因的特异性引物；(2)通过PCR扩增获得VP3基因片段；(3)对VP3基因进行克隆、测序鉴定；(4...
- 王君伟布日额李宝臣马波贺云霞李惠昕齐岩田丽红
- 文献传递
- OsMAPK4基因的克隆、序列分析及其植物表达载体的构建被引量：2
- 2005年
- 以低温处理的耐盐水稻辽盐241植株叶片总RNA为模板,用OsMAPK4基因特异引物通过RT-PCR扩增出1500bp的片段,并将该片段克隆至pUC18上。序列分析结果表明,该克隆序列与GenBank上的OsMAPK4基因序列同源性达99.4%,氨基酸同源性达99.1%。进一步将OsMAPK4基因分别克隆至植物表达载体卡盒pBCE12和pBC29A上,构建了分别由E12启动子、rd29A启动子调控的OsMAPK4基因植物表达载体pBME12和pBM29A。通过冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中,为农杆菌介导法转化植物,分析OsMAPK4基因的功能奠定了基础。
- 李杰朱延明齐岩代翠红柏锡
- 关键词：基因克隆植物表达载体
- 鹅细小病毒不同毒株VP3基因的序列分析比较被引量：16
- 2003年
- 分别将GPV 4个分离株通过PCR技术 ,从病毒基因组DNA中扩增出病毒衣壳蛋白VP3完整基因片段 ,并与PMD18_T质粒载体连接 ,转化到感受态大肠秆菌TG1中 ,提取重组质粒经PCR鉴定和酶切鉴定后 ,对插入片段进行序列测定及分析。结果表明 :VP3基因全长 16 0 5bp ,编码 5 34个氨基酸。不同毒株主要结构蛋白VP3基因同源性较高(95 .6 4 %～ 99.81% )。但强弱毒株间也存在一定差异。
- 李宝臣齐岩马波王君伟
- 关键词：鹅细小病毒VP3基因克隆
- 不同病变型J亚群禽白血病病毒LTR启动子序列分析及活性比较被引量：7
- 2010年
- 从ALV-J中国地方分离株SCAU-HN06株（血管瘤病变型）、NX0101株和JS-nt株（骨髓瘤病变型）病毒的细胞培养物提取前病毒DNA,通过PCR扩增各毒株的LTR并克隆,随后进行测序分析。与国内外ALV-J参考毒株LTR序列比较发现：国内地方分离株与英国ALV-J原型株HPRS-103和美国ALV-J原型株ADOL-7501的LTR核苷酸序列相似性为88.0%~97.2%;LTR中的U5区及R区具有较高的保守性,而U3区内存在较大差异。将不同病变型ALV-J的LTR片段分别插入pCAT-basic载体CAT报告基因5＇端。用所得的重组报告基因表达质粒转染DF-1细胞,48h后通过测定转染细胞中的CAT表达量来评价LTR启动子的活性。结果表明,SCAU-HN06株与骨髓瘤病变型ALV-J（JS-nt株,NX0101株）LTR启动子活性差异不显著。
- 张贺楠齐岩史伟伟梁艺瑜刘红波曹伟胜廖明
- 关键词：J亚群禽白血病病毒长末端重复序列启动子活性
- 新城疫病毒HN基因主要抗原位点区段的原核表达被引量：2
- 2009年
- 利用生物软件对新城疫病毒GD/GM/03/Ch的血凝素神经氨酸酶（HN）蛋白进行抗原特性分析,选定169-267位氨基酸、318-405位氨基酸和448-571位氨基酸3个区域作为多肽表位候选区域.用含新城疫病毒HN基因的重组质粒为模板,设计引物通过PCR扩增获得HNa、HNb和HNc 3个抗原结构域基因片段,分别经双酶切定向克隆到原核表达载体pBT上进行表达,并构建了pBT-HNa-b-c串联重组质粒进行表达,经过SDS-PAGE和W est-ern-b lot分析,验证了表达产物具有反应原性.
- 罗晶璐齐岩任涛
- 关键词：新城疫病毒HN基因抗原位点原核表达
- 鸭卵黄免疫球蛋白的提纯及兔抗鸭IgY(H+L)HRP标记抗体的制备被引量：5
- 2007年
- 孙凌霜齐岩王彬史楠王君伟
- 关键词：免疫抗体卵黄免疫球蛋白提纯免疫系统
- H5亚型禽流感病毒HA1基因在Sf9昆虫细胞中的表达及其抗原性检测被引量：5
- 2006年
- 利用pBlueBacHis2杆状病毒载体在昆虫细胞Sf9中表达H5亚型禽流感病毒(AIV)的 HA1基因。Western-blotting证明HA1在昆虫细胞中得到了表达,其产物具有抗原性;且不与 H7、H9 AIV的抗血清发生交叉反应,具有良好的特异性。Dot-ELISA结果显示,表达蛋白可以在非变性条件下与相应抗体作用,同样具有良好的抗原性。试验结果证明,表达的H5亚型AIV的 HA1蛋白,为检测禽类体内是否感染H5亚型AIV和监测免疫禽类血清H5抗体水平提供了优良的检测抗原。
- 齐岩孙凌霜王彬孙进华王君伟师东方
- 关键词：禽流感病毒HA1基因杆状病毒真核表达
- H9N2禽流感病毒HA2基因重组杆状病毒的表达被引量：2
- 2006年
- 从pMD18-T-HA阳性质粒扩增了H9N2亚型禽流感病毒的HA2基因,将扩增到的 HA2基因克隆至昆虫杆状病毒转移载体pBlueBacHis2A中。将其与杆状病毒共转染于Sf9昆虫细胞,经蚀斑筛选纯化重组杆状病毒,用其感染Sf9昆虫细胞,并优化表达条件。SDS-PAGE和 Western-blotting分析表明,表达产物的分子质量约为27 ku。Dot-ELISA分析表明,表达的HA2 融合蛋白可与鸡抗H9N2亚型血清发生特异性反应,而与H5和H7亚型抗血清间无交叉反应。
- 王彬唐志芬齐岩孙凌霜王君伟
- 关键词：禽流感病毒H9N2亚型重组杆状病毒抗原性
