黄晶星
- 作品数:4 被引量:10H指数:1
- 供职机构:福建师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金福建省发展和改革委员会项目更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生化学工程更多>>
- RGD-拖丝蛋白基因的构建及其在毕赤酵母中的分泌表达
- 2009年
- 根据天然拖丝蛋白的高度重复性序列,引入与细胞黏附有关的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)三肽序列,以毕赤酵母偏好的密码子化学合成RGD-拖丝蛋白基因单体,通过"头尾相连"的多聚化策略,倍加成16聚体与32聚体基因.分别将这两种多聚体与分泌型表达载体pPIC9K连接,转化毕赤酵母GS115,用G418筛选毕赤酵母重组菌.通过甲醇诱导表达,培养液上清的SDS-PAGE分析表明RGD-重组拖丝蛋白获得分泌型表达.
- 黄晶星李敏
- 关键词:毕赤酵母分泌表达
- 高分子量RGD-蛛丝蛋白重组体的构建、高密度发酵及纯化被引量:9
- 2007年
- 蜘蛛丝是自然界综合性能优良的天然蛋白质纤维之一,因其具有良好的生物相容性和可降解性在生物医学领域具有潜在的应用前景。在本室已经构建的RGD-蜘蛛拖丝蛋白基因16多聚体基础上,通过首尾相连、倍加等方法进一步多聚化,得到RGD-蜘蛛拖丝蛋白基因32和64多聚体,分别将这两种多聚体与原核高效表达载体pET-30a(+)连接,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS,得到的32多聚体表达重组子命名为pNSR32,64多聚体表达重组子命名为pNSR64。通过酶切、琼脂糖电泳鉴定及对目的片段的测序均与理论值相符。将32和64多聚体基因序列注册GenBank,序列号分别为DQ469929和DQ837297。重组体pNSR32和pNSR64经IPTG诱导表达,SDS-PAGE图谱显示表达产物分子量分别为102kD和196.6kD,与天然蛛丝蛋白分子量接近并与理论值相吻合。高分子量的蛛丝蛋白在原核生物成功实现高效表达,在国内外尚未见报道。在此基础上对pNSR32工程菌进行高密度发酵,建立了简单高效的目的蛋白纯化工艺。
- 阮超然黄晶星魏梅红李敏
- 关键词:RGD蛛丝蛋白高密度发酵纯化
- 蛋白质类医用高分子微生物合成的研究进展
- 2008年
- 蛋白质类医用高分子是一类重要的功能高分子材料,在生物医学领域有着广泛的应用。随着现代生物技术特别是分子生物学技术的发展,微生物合成医用高分子材料已成为可能。微生物合成除了大规模、低成本的特点外,还可对蛋白质高分子进行分子设计,从而赋予其新的材料性能,以满足不同的需要。该文综述了蛋白质类医用高分子(胶原与明胶、弹性蛋白、丝蛋白)微生物合成的研究进展,指出微生物合成的原理方法及应用现状,并对其发展前景进行了展望。
- 黄晶星李敏
- 关键词:微生物合成分子生物学技术分子设计
- RGD-拖丝蛋白基因的构建及其在毕赤酵母中的分泌表达
- 蜘蛛丝是自然界在长期进化过程中产生的奇迹。蜘蛛丝柔韧性和弹性都很好,耐冲击力也很强,无论是在干燥状态或是潮湿状态下都有很好的性能,是一种目前己知弹性和强度最高的天然蛋白质纤维。蜘蛛丝特别是大囊状腺分泌的拖丝,具有优异的机...
- 黄晶星
- 关键词:蜘蛛丝RGD毕赤酵母分泌表达生物材料
- 文献传递