高娟
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
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- 副猪嗜血杆菌抗体间接ELISA检测方法的建立与应用被引量：9
- 2011年
- 本试验采用121℃高压处理副猪嗜血杆菌4型和5型耐热蛋白,混合作为包被抗原,建立了检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。通过对试验条件进行筛选优化,确定了最佳反应条件:抗原包被浓度为10μg/mL,37℃包被2h;封闭液选择含20g/L脱脂奶粉的PBST,封闭30min;血清的稀释度为1∶80;抗原抗体反应时间为45min;酶标二抗稀释度为1∶12000,作用时间为30min;底物显色时间为15min。特异性、重复性和敏感性试验及对200份送检血清的检测结果表明,建立的间接ELISA方法特异性和重复性良好,敏感性比间接血凝试验高,对已知阴阳性血清的临床样本检测结果与国外ELISA试剂盒一致,可用于副猪嗜血杆菌的血清抗体检测和血清流行病学调查。
- 郑念广谭实勇何玲夏芳高娟罗满林
- 关键词：副猪嗜血杆菌抗体间接酶联免疫吸附试验
- 犬IFN-α优化基因的真核表达及抗病毒活性的研究被引量：2
- 2012年
- 本研究根据酵母系统密码子的偏嗜性,对成熟蛋白基因核苷酸序列进行密码子偏嗜性改造,利用毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαC来表达犬IFN-α成熟蛋白基因。并采用非洲绿猴肾细胞(Vero)-水疱性口炎病毒(VSV)系统以细胞病变抑制法为基础来测定重组犬α干扰素的效价,同样方法测定了表达产物对PRV和CDV的抑制作用。本试验实现了犬α干扰素在酵母中的高表达,表达量高达58 mg/L,SDS-PAGE检测大小约为24 ku,比预测分子质量大,推测发生了糖基化。表达产物具有较强的种属特异性,在Vero细胞上对PRV具有较高的抗病毒活性,达到了3.6×107U/L,对CDV也有很好的抑制作用。本研究为犬IFN-α以后的临床应用研究奠定基础。
- 张淑琼高娟曾思遥蒋再学陈瑞爱罗满林
- 关键词：酵母表达抗病毒活性
- 猪圆环病毒2型ORF1和ORF3 TCE的原核表达及其免疫效应的研究
- 抗原表位(epitope)又称抗原决定簇(antigenic determination)，是指抗原分子上的一个免疫活性区，具有特殊结构和免疫活性的化学基团，是具有刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞并能够被其识别的部位。按照...
- 高娟
- 关键词：猪圆环病毒2型原核表达免疫效应
- 猪圆环病毒2型ORF1和ORF3T淋巴细胞抗原表位的克隆与原核表达
- 2013年
- 根据Stevenson筛选出来的3个具有活性的T淋巴细胞抗原表位(T lymphocyte epitope,TCE)合成tce基因(180 bp),成功插入到pMD18-T Simple载体中,筛选获得重组质粒,命名为pMD-TCE.将tce酶切产物亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒,命名为pET-TCE.用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE检测,结果显示合成基因在pET-32a(+)中获得了高效融合表达,其表达蛋白相对分子质量约为25 000,Western-blot分析结果表明,获得的融合蛋白可与猪圆环病毒2型(PCV2)阳性血清发生特异性反应,具有良好的免疫原性.
- 高娟王艳玲蒋再学竺薇罗满林
- 关键词：猪圆环病毒2型原核表达
- 重组猪α干扰素发酵工艺的研究
- 为了使重组猪α干扰素(PoIFN-α)大规模生产工业化,在摇瓶中研究了种子液培养时间、接种量、PH、温度以及甲醇的终浓度对生产PoIFN-α的影响,进一步在发酵罐条件下对诱导表达时间进行了优化。结果表明:种子液培养时间是...
- 高娟唐明森王艳玲蒋再学竺薇罗满林
- 关键词：重组猪Α干扰素巴斯德毕赤酵母摇瓶发酵发酵工艺发酵罐
- 文献传递
