阳勇
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
- 供职机构:南华大学附属第二医院更多>>
- 发文基金:湖南省自然科学基金湖南省高等学校科学研究项目湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学更多>>
- 靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因siRNA表达载体裸鼠成瘤抑制作用被引量:2
- 2013年
- 目的探讨靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因siRNA表达载体对人肝癌细胞株裸鼠成瘤的抑制作用。方法将设计并合成构建好的靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的psuper.retro.neo-VEGF-siRNA表达载体转入HepG2细胞,通过G418抗性筛选出稳定株(HepG2/psuper.retro.neo-VEGF-siRNA,实验组),同时设对照组(HepG2/psuper.retro.neo组)和空白组(HepG2组)。分别移植BALA/c裸鼠成瘤,计算各组鼠成瘤潜伏期和接种20 d后瘤重,Western-blotting检测肿瘤组织中VEGF的表达变化,免疫组织化学SP法检测瘤组织内微血管密度(MVD)。结果实验组、对照组和空白组裸鼠成瘤潜伏期分别为(9.2±1.2)、(3.9±0.7)和(3.8±0.9)d;接种20 d后3组平均瘤重分别为(194±57)、(566±86)和(626±96)g;瘤组织VEGF蛋白表达水平分别为(0.075±0.012)、(0.198±0.009)和(0.205±0.008);MVD分别为(13.6±2.8)、(34.3±2.9)和(35.3±3.5),实验组与对照组和空白组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论合成和构建的靶向人肝癌HepG2 VEGF基因干扰质粒具有抑制人肝癌细胞裸鼠成瘤和血管生成的作用。
- 黄秋林刘璇阳勇曹超戴小明韩东雷俊悦
- 关键词:肝癌微血管密度
- 靶向VEGF-siRNA抑制人肝癌细胞HepG2裸鼠成瘤的实验研究
- 阳勇
- 文献传递
- 靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体构建及体外抑制作用被引量:6
- 2009年
- 目的:构建靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体并在体外检测其对VEGF基因表达的抑制作用.方法:设计合成靶向HepG2细胞VEGF基因的siRNAcDNA序列并与pSUPER载体连接,构建VEGF siRNA表达载体,经酶切鉴定和测序确认后,脂质体2000介导VEGF siRNA转染HepG2细胞.RT-PCR及Western blot检测VEGF siRNA表达载体转染的HepG2细胞中VEGF基因表达.结果:通过双酶切鉴定和测序分析,成功构建了靶向HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体.RT-PCR和Western blot法检测转染VEGF siRNA表达载体的HepG2细胞VEGF mRNA及VEGF165表达下调,其抑制率分别为65%和74%.实验组中的HepG2中VEGF mRNA表达较阴性对照组、空载体组表达量显著下降(0.304±0.062vs0.896±0.061,0.884±0.074,P<0.05).结论:成功构建了靶向肝癌HepG2细胞VEGF基因的siRNA表达载体,且该载体在体外能有效抑制HepG2细胞VEGF基因表达.
- 黄秋林于永政阳勇吕忠诚
- 关键词:血管内皮细胞生长因子肝癌