谢晓斌
- 作品数:48 被引量:171H指数:8
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- 发文基金:广东省医学科学技术研究基金广东省自然科学基金广州市卫生局医药卫生科技项目更多>>
- 相关领域:医药卫生文化科学生物学更多>>
- 胰岛素样生长因子-I及其受体在糖尿病足溃疡的表达及意义被引量:4
- 2010年
- 目的探讨胰岛素样生长因子-I(Insulin—likegrowthfactor-I,IGF-I)与其受体两亚基(α,B)在非糖尿病正常皮肤和单纯糖尿病患者皮肤,以及糖尿病足患者足溃疡创面中的分布和表达特征,旨在阐明其表达水平变化与糖尿病足溃疡创面的内在联系。方法按照病例入选标准收集30例糖尿病足患者,23例单纯糖尿病患者,以及25例非糖尿病正常人,取足部皮肤组织标本,经固定脱水,石蜡包埋,切片后备用。采用免疫组织化学SP法检测所有取材组织中IGF-I、IGF-IRα和IGF-IRB蛋白定位及含量。在400倍光镜下观察免疫组化结果。结果在非糖尿病正常皮肤和单纯糖尿病患者皮肤,以及糖尿病足溃疡创面皮肤中IGF—I、IGF—I Rα和IGF—IRβ都有阳性表达,但变化规律不尽相同。IGF—I的阳性细胞率单纯糖尿病组较正常对照组表达减弱(P〉0.05),糖尿病足溃疡组较单纯糖尿病组表达进一步减弱(P〉0.05)。IGF—IRα和IGF—IRβ的阳性细胞率单纯糖尿病组较对照组表达减弱(P〉0.05),糖尿病足溃疡组较单纯糖尿病组表达进一步减弱(P〉0.05)。结论糖尿病患者创面IGF-I的缺乏或不足可能与糖尿病所引发的内皮细胞损害有关,与糖尿病足部溃疡经久不愈有直接关系。创面IGF-IRα和IGF—IRβ表达减少,和生物活性的降低,影响细胞因子引起的信号传递和核内目的基因表达,导致创面修复失控形成慢性难愈性溃疡。
- 秦庆新肖正华谢晓斌
- 关键词:胰岛素样生长因子-I胰岛素样生长因子-I受体糖尿病足溃疡
- CDA-Ⅱ抑制肺腺癌细胞增殖及C-erbB2表达的实验研究
- 2011年
- 目的:研究细胞分化剂CDA-Ⅱ(cell differentiation agent-Ⅱ)抑制人肺腺癌细胞A549增殖及对癌基因C-erbB2表达的影响。方法:不同浓度的CDA-Ⅱ作用人肺癌细胞A549,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率;RT-PCR和Western blot检测经CDA-Ⅱ作用后A549细胞C-erbB2表达的改变。结果:CDA-Ⅱ能明显抑制肺腺癌细胞增殖,且抑制效应呈剂量依赖性。C-erbB2在CDA-Ⅱ抗人肺癌细胞A549增殖中表达下调。结论:CDA-Ⅱ可有效抑制人肺癌细胞A549增殖,该作用可能与抑制C-erbB2的信号传导通路有关。
- 王红艳涂永生谢晓斌
- 关键词:人肺癌A549细胞增殖C-ERBB2
- 晚期糖基化终产物水平及其受体的表达与妊娠期糖尿病围生儿结局关系的研究被引量:4
- 2012年
- 目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇血清晚期糖基化终产物(AGEs)水平与围生儿结局间的关系,并观察晚期糖基化终产物受体(RAGE)蛋白在胎盘组织中的蛋白表达。方法:选择孕24~28周来我院产前检查被诊断患有GDM的孕妇100例为研究对象(GDM组),另选择同孕期、相应年龄的正常妊娠妇女50例作为正常对照组。检测GDM组孕妇治疗前、后和同孕期正常对照组孕妇的空腹血糖、糖化血红蛋白(HbA1c)和AGEs水平。分娩后立即收集两组胎盘低温保存,用于分析组织中RAGE蛋白的表达。并收集母婴临床信息,根据GDM组围生儿结局分为GDM围生儿正常组和GDM围生儿异常组。结果:①GDM组治疗前孕妇血清AGEs水平、HbA1c和空腹血糖值均明显高于同孕期正常对照组(P<0.05,P<0.01)。②GDM组经干预治疗后其空腹血糖和HbA1c水平与同孕期正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);但血清AGEs水平仍然高于正常对照组(P<0.01)。③GDM围生儿异常组孕妇血清AGEs水平高于GDM围生儿正常组(P<0.05)。④Logistic回归分析显示AGEs是GDM围生儿结局异常的危险因子(OR=6.197,P<0.01,95%CI2.514~15.453)。⑤Western印迹法测定胎盘组织中RAGE蛋白表达水平,GDM围生儿异常组高于GDM围生儿正常组和正常对照组(P<0.01)。结论:高AGEs血症是GDM围生儿结局的一个不利因素,高AGEs水平可作为GDM围生儿结局异常的预测指标。
- 汤栩文林斯谢晓斌
- 关键词:晚期糖基化终产物妊娠期糖尿病胎盘围生儿
- 靶向人血管内皮生长因子-C基因的shRNA真核表达载体的构建与鉴定被引量:1
- 2010年
- 目的:构建靶向人血管内皮生长因子-C(VEGF-C)基因的shRNA真核表达载体并检测其对靶基因的沉默效应。方法:根据靶基因VEGF-C序列,设计、合成编码其shRNA的互补寡核苷酸序列,克隆至线性化的pSIREN-RetroQ载体中并对重组质粒进行酶切分析及测序鉴定;脂质体介导重组质粒转染乳腺癌MCF-7细胞株,荧光定量PCR及Westen-blot检测其对靶基因VEGF-C表达的影响。结果:酶切及测序鉴定重组质粒pSIREN-VEGF-C的序列正确;转染重组质粒后乳腺癌MCF-7细胞中VEGF-CmRNA及蛋白表达均明显下调,抑制率分别为95%及100%(P<0.05)。结论:成功构建了靶向人VEGF-C基因的shRNA真核表达载体,并在乳腺癌MCF-7细胞中高效、特异地发挥靶基因沉默作用。
- 谢晓斌陈小卫龙捷张雅洁
- 关键词:乳腺肿瘤血管内皮生长因子C短发夹RNA真核表达载体
- CXCR4启动子的条件复制型腺病毒对肺癌细胞的靶向杀伤作用
- 2015年
- 目的:构建CXCR4启动子的条件复制型腺病毒载体CRAd-CXCR4-GFP,探究CRAd-CXCR4-GFP对肺癌细胞的靶向杀伤效应。方法:PCR法扩增人CXCR4-E1A基因并克隆至穿梭质粒p DC316-GFP,将骨架质粒p BHG-lox-E1,3Cre和重组质粒p DC316-CXCR4-GFP共转染293细胞,产生重组腺病毒CRAd-CXCR4-GFP并扩增,扩增后进行PCR鉴定和腺病毒滴度测定;real-time PCR检测5种肺癌细胞株CXCR4的mRNA表达,筛选出表达最高的A549细胞;将CRAd-CXCR4-GFP和Ad-NULL分别转染A549细胞,检测两者转染后CXCR4启动子活性和腺病毒复制数;将CRAd-CXCR4-GFP和Ad-NULL分别转染A549细胞和16HBE细胞,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,CCK-8检测各组细胞活性。结果:成功构建重组质粒p DC316-CXCR4-GFP,与骨架质粒p BHG-lox-E1,3Cre共转染293细胞后第11天可见片状绿色荧光;PCR表明目的基因CXCR4-E1A已成功整合在重组腺病毒基因组中;测定重组腺病毒滴度为1×1013PFU/L;CRAd-CXCR4-GFP转染A549细胞后E1A的mRNA和E4表达较Ad-NULL组明显上升;与Ad-NULL组和空白对照组相比,CRAd-CXCR4-GFP组前4 d A549细胞凋亡率和活性无明显差异,第5天细胞凋亡率明显增加,细胞活性明显降低,各组间5 d内16HBE细胞的细胞凋亡率和细胞活性均无明显变化。结论:成功构建条件复制型腺病毒表达载体CRAd-CXCR4-GFP,该载体对肺癌细胞具有靶向杀伤作用。
- 李龙光李书华王红艳龙捷谢晓斌张雅洁
- 靶向VEGF-C shRNA对人乳腺癌MCF-7细胞生物学特性的影响
- 研究背景与目的:淋巴道转移是乳腺癌最常见的转移途径,也足判断患者预后的首要因素。随着对血管内皮生长因子C(VEGF-C)研究的深入,其诱导肿瘤淋巴管生成及促进肿瘤淋巴道转移已成为不争的事实[1]。我们前期研究表明[2],...
- 谢晓斌
- 关键词:乳腺癌细胞生物学淋巴道转移肿瘤转移基因治疗
- 文献传递
- 探讨NOS-NO系统在糖尿病足患者发病机制中的作用被引量:1
- 2010年
- 30例DF患者,23例单纯糖尿病患者,以及25例非糖尿病正常人血浆标本和足部皮肤组织标本。进行血浆NO的测定,皮肤组织iNOS、eNOS采用免疫组化的方法进行观察。结果血浆NO浓度各组差异无显著性(P>0.05)。iNOS、eNOS表达。单纯糖尿病组较对照组表达减弱(P<0.05),DF病组较单纯糖尿病组表达进一步减弱(P<0.05)。结论DF患者血浆NO浓度有下降趋势,足部组织中iNOS、eNOS的表达明显降低,提示NOS-NO系统表达的下调与DF的发生发展有密切关系。
- 余绮玲陈定宇肖正华谢晓斌
- 关键词:一氧化氮
- 胰岛素样生长因子-Ⅰ受体与糖尿病足溃疡的相关性研究被引量:4
- 2010年
- 目的探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(Insulin-like Growth Factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)受体两亚基(α,β)在糖尿病足患者(DF组)足溃疡创面、单纯糖尿病患者(DM组)皮肤和非糖尿病患者(NC组)正常皮肤中的分布和表达特征,旨在阐明其表达水平变化与糖尿病足溃疡创面的内在联系。方法 DF组30例,DM组23例,NC组25例,用免疫组织化学观察其足部组织的IGF-ⅠRα、IGF-ⅠRβ的表达。结果在IGF-ⅠRα和IGF-ⅠRβ的阳性细胞率和表达强度上,DM组较NC组表达减弱(p<0.05),DF组较DM组表达进一步减弱(p<0.05)。结论糖尿病足患者足溃疡创面IGF-ⅠRα和IGF-ⅠRβ表达减少,提示IGF-ⅠRα和IGF-ⅠRβ的表达下调可能参与了糖尿病足的发病。
- 秦庆新肖正华谢晓斌
- 关键词:糖尿病足溃疡
- MDA-7基因的腺病毒载体构建及对肺腺癌A549细胞凋亡的影响被引量:3
- 2014年
- 目的构建一种由腺病毒AdMax包装系统表达目的基因——黑色素瘤分化相关基因-7(MDA-7)的复制缺陷型腺病毒,并初步探索其抗肿瘤活性。方法通过基因操作技术将目的基因(MDA-7)插入到5型腺病毒AdMax包装系统的E1A区域,构建复制缺陷型腺病毒Ad.hMDA-7-EGFP;同时构建对照病毒Ad.EGFP。病毒滴度计算按寇化法(Karber法)进行腺病毒感染性滴度(TCID50)测定。应用免疫组化染色法检测MDA-7在感染2种病毒的肺腺癌A549细胞中的表达状态;通过二苯甲亚胺-碘化丙啶(Hoechst33342-PI)双染色法及流式细胞仪检测2种病毒对肿瘤细胞杀伤的差异。结果成功构建携带目的基因的腺病毒载体,经聚合酶链反应(PCR)鉴定正确;MDA-7在感染Ad.hMDA-7-EGFP的肺腺癌A549细胞中表达,以相同感染复数(MOI)值感染Ad.EGFP时肺腺癌A549细胞中未检测到MDA-7表达;Ad.hMDA-7-EGFP对肿瘤细胞株杀伤能力明显高于Ad.EGFP。结论成功构建复制缺陷型腺病毒Ad.hMDA-7-EGFP,并证实MDA-7蛋白在肿瘤细胞中过表达,诱导肺腺癌A549细胞株发生凋亡。
- 李书华龙捷王红艳谢晓斌张雅洁
- 关键词:病毒复制基因疗法复制缺陷型腺病毒
- 急性髓细胞白血病免疫表型检测分析及临床意义被引量:4
- 2011年
- 目的探讨免疫表型检测对急性髓细胞白血病的诊断、治疗、预后的临床意义。方法采用流式细胞仪对急性髓细胞白血病患者的骨髓样本进行免疫表型检测。结果 58例急性髓细胞白血病患者主要表达CD117(91.4%)、CD33(89.7%)及CD13(74.1%),淋系抗原在急性髓细胞白血病患者中也有阳性表达(Ly+AML),其中CD7表达率最高,占22.4%;M3较少表达CD34及HLA-DR。结论白血病免疫表型检测对急性髓细胞白血病诊断有重要意义,伴有CD7+的AML患者CR率低于CD7-的AML患者。
- 陈小卫毛平王顺清许艳丽谢晓斌
- 关键词:白血病免疫表型流式细胞术