蔡成松
- 作品数：16 被引量：48H指数：4
- 供职机构：杭州师范大学临床医学院附属医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金杭州市医药卫生科技计划项目杭州市科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学交通运输工程自动化与计算机技术更多>>
- 结核潜伏感染和活动性结核病患者血浆外泌体mRNA表达谱分析
- 2024年
- 目的了解结核潜伏感染(LTBI)和活动性结核病(ATB)患者血浆外泌体差异mRNA表达,为鉴别诊断LTBI与ATB提供参考。方法选择杭州师范大学附属医院确诊的ATB患者21例和LTBI患者16例,使用外泌体提取纯化试剂盒分离血浆外泌体,通过透射电镜观察其大小形态,采用免疫印迹法鉴定;提取血浆外泌体总RNA进行高通量测序;鉴定差异表达mRNA,并进行基因本体论(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析;筛选差异表达倍数最大的mRNA,另选取ATB患者5例和LTBI患者3例,采用实时荧光定量PCR法进行临床样本验证。结果高通量测序结果显示,与ATB患者比较,LTBI患者血浆外泌体有2875个差异表达mRNA,其中1873个表达下调,以M6PR的差异表达倍数最大;表达上调1002个,以RGPD5的差异表达倍数最大。GO富集分析和KEGG通路分析结果显示,差异表达mRNA主要富集于丝氨酸蛋白激酶激活、rRNA结合等分子功能,以及人巨细胞病毒感染、胰腺癌、子宫内膜癌、胰岛素信号通路和FoxO信号通路等。临床样本验证结果显示,LTBI患者血浆外泌体M6PR相对表达量(0.954±0.212)较ATB患者(2.168±0.226)下调,RGPD5相对表达量(2.126±0.200)较ATB患者上调(0.588±0.129)(均P<0.05)。结论LTBI患者和ATB患者血浆外泌体中mRNA表达存在差异,M6PR和RGPD5可考虑作为区分LTBI与ATB的潜在生物标志物。
- 高锦杜孝康项海燕范超明蔡成松潘峰
- 关键词：活动性结核病外泌体MRNA高通量测序
- 杭州地区HIV抗体阳性的静脉药瘾者B19V-DNA阳性率高于普通人群
- 我们使用ELISA和q-PCR方法对杭州市戒毒所182名HIV抗体阳性的静脉药瘾者和103名健康志愿者的血浆标本进行B19V-IgG、IgM和DNA的检测,HIV抗体阳性的静脉药瘾者的B19V-IgG、IgM和DNA检出...
- 蔡成松
- 关键词：B19病毒静脉药瘾者HIV阳性基因型
- 应用基因芯片技术筛选乳腺癌多药耐药相关基因的初步研究被引量：1
- 2013年
- 目的应用基因芯片分析技术,筛选乳腺癌多药耐药细胞系相关基因,探讨乳腺癌化疗耐药机制。方法阿霉素持续递增作用于MCF-7细胞株,建立多药耐药细胞系MCF-7/ADM;利用Human Expr 12x135K Arr Del芯片检测MCF-7/ADM与MCF-7的差异表达基因,并利用荧光定量PCR验证差异最为显著的基因。结果不同的细胞系中筛选出差异有显著性意义的基因1520个,其中MDR1、p170、p65皆为耐药途径中较为关键的几个蛋白,p170与p65主要表现在蛋白活性的差异上,MDR1的高表达则是耐药株的显著特征。结论乳腺癌耐药涉及多种途径、多个基因,基因芯片分析技术可为乳腺癌多药耐药细胞系相关基因提供全面的技术分析。
- 潘峰洪理泉於王骐蔡成松柯强郑高明徐立群
- 关键词：基因芯片阿霉素乳腺癌耐药
- 基于形态学线索提示人细小病毒感染的病例诊断
- 蔡成松楼洪萍陈兆军
- 白细胞减少患者人细小病毒B19感染的临床分子流行病学研究被引量：5
- 2017年
- 目的 了解白细胞减少患者人细小病毒B19（HPVB19）感染的流行状况.方法 杭州师范大学附属医院2015年1月至2016年6月前来就诊的患者,将外周血白细胞计数〈3.5×10^9/L作为入组标准,同时选取健康体检者为健康对照组.ELISA检测两组患者HPVB19 IgG和IgM,荧光定量PCR检测两组HPVB19 DNA.计数资料使用χ2检验,计量资料使用t检验.结果 共有79例患者纳入研究,男32例,女47例,年龄24～62岁;对照组126名,男55名,女71名,年龄28～67岁.白细胞减少患者的HPVB19 IgG、IgM和DNA检出率分别为34.2%、5.1%和3.8%,而健康对照组分别为36.5%、0和0,两组HPVB19 IgM和DNA检出率比较差异均有统计学意义（χ2值分别为6.507和4.856, P值分别为0.011和0.028）.对3例HPVB19 DNA阳性者进行测序分析,发现其中1例VP1/VP2序列区2个核苷酸多态性位点可以造成第153位（L/H）和219位（N/Y）氨基酸突变.系统进化分析发现2例HPVB19属于1a基因型,1例属于1b基因型.结论 白细胞减少患者的HPVB19现症感染率（HPVB19 IgM、DNA阳性）明显高于健康对照组;临床上在评估白细胞减少患者输注血制品时应检测HPVB19.
- 冯春燕楼洪萍狄春红黄玲玲蔡成松
- 关键词：白细胞减少PARVOVIRUSB19
- microRNA-208在急性心肌梗死病人血清中的变化被引量：13
- 2013年
- 目的探讨血清中microRNA-208(miRNA-208)成为急性心肌梗死(AMI)心肌损伤标志物的可能性和意义。方法收集因急性胸痛发作入院的AMI患者60例和非AMI患者60例,分别在入院即刻和入院后2、4、8、12、24h,2、3、5和7天10个时间点采集血液,利用实时荧光定量PCR法和酶联荧光分析法等方法对血清中miRNA-208、肌红蛋白(Mb)和肌钙蛋白I(cTnI)进行测定,对结果进行统计分析;并对miRNA-208、Mb和cTnI在不同时点的敏感度和特异性进行比较。结果 AMI患者入院即刻血清中miRNA-208表达显著高于对照组(P<0.05),入院后miRNA-208逐渐升高,在入院后12h左右达到高峰;和Mb和cTnI相比,miRNA-208既具有Mb的高度敏感度,又具有cTnI的高度特异性。结论 miRNA-208表达升高可以反映AMI心肌损伤,可能是AMI早期诊断和治疗评估的一种新的检测标志物。
- 李祥云蔡成松潘峰刘玉华黄玲玲楼洪萍陈兆军
- miR-125b通过靶向结合ETV6调控Hs578T的侵袭转移被引量：2
- 2017年
- 目的研究miR-125b在乳腺癌中的表达,尤其是其对乳腺癌迁移侵袭的作用以及该过程所涉及的分子机制。方法 (1)用实时荧光定量PCR检测23对临床组织样本中miR-125b及靶基因ETV6的表达水平;(2)用实时荧光定量PCR、双荧光报告验证靶基因;(3)在细胞中瞬时转染miR-125b mimics,并用划痕、transwell迁移、侵袭及Western blot检测体外乳腺癌细胞的迁移侵袭能力及上皮间质转化的变化;(4)用靶基因敲减实验进一步验证靶基因的准确性。结果 (1)与正常组织相比,乳腺癌组织中miR-125b的表达显著降低(P<0.001),ETV6的表达显著增高(P<0.05);(2)ETV6为miR-125b的靶基因;(3)与对照相比,上调的miR-125b可显著抑制Hs578T的迁移和侵袭(P<0.001),并抑制EMT的发生;(4)敲减ETV6对Hs578T的作用与miR-125b过表达一致。结论 miR-125b在乳腺癌中低表达,miR-125b通过靶向结合ETV6 3’UTR抑制该基因的表达,从而抑制Hs578T的迁移、侵袭及上皮间质转化的发生。因此,miR-125b可作为抑癌基因发挥作用。
- 洪理泉潘峰姜慧芬张腊红刘玉华蔡成松华春珍罗贤孙晋华陈兆军
- 关键词：乳腺癌细胞细胞侵袭细胞迁移上皮间充质转化
- 杭州地区HIV抗体阳性的静脉药瘾者人细小病毒B19感染的流行病学研究被引量：1
- 2019年
- 目的研究HIV抗体阳性患者的人细小病毒B19的感染情况。方法使用ELISA和q-PCR方法对杭州市戒毒所182例HIV抗体阳性的静脉药瘾者和103例健康志愿者的血浆标本进行B19V-IgG、IgM和DNA的检测。结果HIV抗体阳性的静脉药瘾者的B19V-IgG、IgM和DNA检出率分别为41.8%(76/182)、0.0%(0/182)、7.2%(13/182);而健康志愿者的检出率分别为34.0%(35/103)、0.0%(0/103)、0.0%(0/103)。对13例B19V-DNA阳性者进行测序分析,发现其NS1序列区2个核苷酸多态性位点可以造成第558位(P/S)和573(Y/G)位氨基酸突变。系统进化分析发现13例B19V均属于第1基因型。结论HIV抗体阳性的静脉药瘾者的B19V-DNA检出率显著高于健康志愿者,但两类人群的B19V-IgG和IgM检出率没有显著差异。13例B19病毒在遗传关系上均为第1基因型。
- 黄玲玲辛小军蔡成松潘峰张腊红陈兆军
- 关键词：B19病毒静脉药瘾者HIV阳性
- CD38影响Treg/Th17平衡促进类风湿关节炎发生发展的机制研究
- 2024年
- 目的 检测类风湿关节炎(RA)小鼠模型组织中分化簇38(CD38)的表达和CD4^(+)T细胞中调节性T细胞(Tregs)与辅助性T细胞17(Th17)的比例,探讨CD38促进RA发生发展的机制。方法 构建胶原诱导小鼠关节炎模型(CIA),每组3只,通过蛋白免疫印迹、荧光定量PCR检测滑膜组织、脾脏、淋巴结中CD38蛋白、mRNA的表达;采用流式细胞术分析Th17细胞和Treg细胞的比例;从小鼠脾脏分离出幼稚CD4^(+)T细胞,分化后,检测CD38蛋白的表达,计算Th17细胞和Treg细胞的比例;极化幼稚CD4^(+)T细胞,检测PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR的蛋白表达,分析CD38对PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。结果 CIA中各滑膜组织、脾脏、淋巴结中CD38蛋白表达高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);与极化组+sh-NC相比,极化组+sh-CD38的Th17细胞比例降低,Treg细胞比例升高(P<0.01);p-AKT、p-mTOR蛋白表达量在极化组+sh-NC(3.00±0.08、3.18±0.12)均高于极化组+sh-CD38(2.48±0.09、1.70±0.10,P<0.01)。结论 CD38在CIA中高表达,抑制CD38的表达CIA炎症得到改善;在特定分化条件下,CD38高表达使得Th17细胞比例升高,Treg细胞比例下降;经极化处理,CD38能通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响Treg/Th17平衡促进类风湿关节炎炎症的发生发展。
- 林海丽杜孝康王依璐蔡成松高锦潘峰
- 关键词：信号通路类风湿关节炎
- 基于病例模块教学的《诊断学》形成性考核评价体系初探被引量：4
- 2017年
- 目的研究形成性考核在以病例为模块的教学法中的应用效果;方法 2014级临床医学专业学生作为研究对象,一班96人使用传统教学法和期终闭卷笔试法考核,二班92人采用基于病例模块教学法和形成性考核,以期终统一考试和问卷调查进行教学效果评价。结果相同教学大纲和教学内容,传统教学法和期终闭卷笔试法考核的学生期末平均考试成绩74.6分,基于病例模块教学法和形成性考核的学生期末平均考试成绩79.2分。问卷调查显示形成性考核可以调动学生的积极性,培养学生的自主学习能力,提高实际技能。结论基于病例模块教学法和形成性考核的教学效果和总成绩明显优于传统教学法。
- 蔡成松沈悦娣许航潘建柯强江雪玲
- 关键词：诊断学形成性考核问卷调查
