罗桥
- 作品数：19 被引量：58H指数：5
- 供职机构：南华大学医学院肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胃癌组织及癌旁组织蛋白质双向电泳图谱的差异分析被引量：2
- 2004年
- 目的 利用蛋白质组学方法建立分辨率高和重复性好的人胃癌组织及其正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,分析其差异表达的蛋白质 ,为进一步寻找胃癌标志物奠定基础。方法 采用固相pH梯度双向凝胶电泳分离人胃癌组织及正常胃黏膜组织的总蛋白质 ,凝胶经银染显色后 ,ImagingMaster 2D图像分析软件进行比较分析 ,识别差异表达的蛋白质。结果 ⑴癌组织和正常胃黏膜组织凝胶的平均蛋白质点数分别为 10 49± 67和 10 97± 73 ,平均匹配的点数分别为 83 5± 48和 95 3± 5 6,匹配率分别为79 6%和 86 7%。⑵通过比较分析 5例胃癌组织及正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,得到平均匹配蛋白点数为 769± 45 ,差异表达蛋白点数为 81个 ,其中 17个点仅在癌组织中表达 ,2 4个点仅在正常胃黏膜中表达 ,2 6个点在癌组织中为高表达 ,14个点在癌组织中为低表达。结论 本研究建立了分辨率高且重复性较好的人胃癌组织与正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,发现两者间存在一些差异表达的蛋白质 ,为进一步筛选胃腺癌特异性的分子标志物打下了坚实的基础。
- 陈彦贺修胜容映晖罗桥宋颖龙志峰苏坚李艳兰
- 关键词：胃癌双向凝胶电泳蛋白质双向电泳图谱癌旁组织
- DADS抑制SW480细胞系生长增殖及CK19蛋白质分子鉴定
- 2009年
- 目的:观察不同浓度和作用时间二烯丙基二硫(DADS)对SW480细胞的生长抑制作用,应用前期蛋白质组学筛出的部分差异表达蛋白质分子,进行进一步分析与鉴定。方法:采用MTT、细胞计数法;施用流式细胞仪、RT-PCR和Western blotting方法,检测50μg/mL DADS对SW480细胞的凋亡率、CK19 mRNA和蛋白的表达水平。结果:MTT法显示,DADS能明显抑制SW480细胞生长增殖,呈浓度和时间依赖性,细胞生长增殖速度明显减慢。细胞计数表明,当DADS浓度增加时,SW480细胞群体倍增时间延长,与对照组比较,差异有统计学意义,P<0.05。流式细胞仪分析显示,50μg/mL DADS使SW480细胞凋亡率增加。RT-PCR和Western blotting结果证实,50μg/mL DADS处理SW480细胞后,CK19 mRNA和蛋白表达较对照组降低,差异有统计学意义,P<0.05。结论:DADS抑制SW480细胞系生长增殖,可能与CK19表达下调,促进细胞凋亡有关。
- 赵其辉胡波贺修胜邱青朝罗桥全建设王海伦贺秋炎唐国华
- 关键词：结肠肿瘤角蛋白
- STGC3基因缺失突变对CNE2细胞生长增殖能力的影响被引量：5
- 2011年
- 为探讨鼻咽癌候选抑癌基因STGC3中层粘连蛋白G结构域(LG domain)对CNE2生长增殖能力的影响,应用基因定点突变技术将该结构域缺失,亚克隆至真核表达载体上,并将野生型及突变型STGC3稳定转染人鼻咽癌细胞系CNE2,检测其对CNE2细胞系表型的影响,包括测定稳转细胞系的生长曲线、细胞集落形成能力和细胞周期分布.研究发现,LGdomain的缺失明显降低了STGC3的肿瘤抑制活性,使受其稳定转染的细胞系恶性度显著增强,提示该结构域在STGC3发挥肿瘤抑制功能中起着重要作用.
- 李丽贺修胜罗桥张志伟姚旭炯陈苏琼李春成王莉莉段蓉陈主初
- 关键词：鼻咽癌抑癌基因
- STGC3基因高表达Daudi细胞系的建立与鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的探讨STGC3基因高表达对Daudi细胞形态、倍增时间和增殖速度的影响。方法采用电穿孔基因转染技术,将pCDNA3.1(+)/STGC3真核表达载体导入Daudi细胞系,G418筛选,建立高表达STGC3基因的Daudi细胞系,利用Western-blotting检测转基因细胞系中STGC3蛋白的表达;运用免疫细胞化学和HE染色方法及绘制细胞生长曲线,了解STGC3基因表达在Daudi细胞中的定位,以及对细胞倍增时间和增殖速度的影响。结果在转基因的Daudi细胞系中,STGC3蛋白高表达并定位于胞浆与胞核。转染STGC3基因后,Daudi细胞倍增时间延长,增殖速度明显减慢(P<0.05)。结论成功建立STGC3基因高表达Daudi细胞系。
- 肖建忠贺修胜邱清朝邓敏胡波罗桥
- 关键词：DAUDI细胞细胞增殖
- p33^(ING1b)基因对人结肠癌细胞SW480生物学行为的影响被引量：1
- 2006年
- 目的:构建pcDNA3.1(+)/p33ING1b真核表达载体及观察其对人结肠癌细胞SW480生长的影响。方法:构建人p33ING1b真核表达载体,采用脂质体转染方法,将pcDNA3.1(+)/p33ING1b转染人结肠癌细胞系SW480,G418筛选,挑选阳性克隆,阳性克隆经RTPCR及Westernblot鉴定后,通过生长曲线和软琼脂克隆形成实验检测高表达p33ING1b基因的SW480细胞体外增殖情况,并用流式细胞仪分析细胞凋亡率的改变。结果:成功构建重组pcDNA3.1(+)/p33ING1b基因的真核表达载体,建立高表达p33ING1b基因的SW480细胞系,p33ING1b基因在SW480细胞中高表达后,其生长速度减慢,细胞凋亡率(15.4±1.7)%较空载体组(2.0±0.6)%及未转染组(1.6±0.8)%明显升高。结论:p33ING1b基因高表达对SW480细胞系具有生长抑制和促进凋亡的作用。
- 赵帅贺修胜罗桥邓敏曾超邱青朝胡波
- 关键词：结肠肿瘤SW480细胞
- 胃腺癌组织蛋白质双向电泳图谱分析被引量：8
- 2004年
- 目的 利用蛋白质组学方法建立分辨率高和重复性好的人胃腺癌组织及其正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,并分析其差异表达的蛋白质 ,以期用于早期诊断。方法 采用固相pH梯度(immobilizedpHgradient,IPG)双向凝胶电泳 (two -dimensionalgelelectrophoresis ,2 -DE)分离人胃腺癌组织及正常胃黏膜组织的总蛋白质 ,凝胶经银染显色后 ,ImagingMaster 2D图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质。结果 ( 1 )得到了分辨率较高、重复性较好的人胃腺癌组织和正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,癌组织和正常胃黏膜组织凝胶的平均蛋白质点数分别为 1 0 4 9± 67和 1 0 97± 73,平均匹配的点数分别为 835± 48和 95 3± 5 6,匹配率分别为 79.6%和 86.7% ;同一组织凝胶在蛋白质点位置上有较好的重复性 ,不同凝胶间蛋白质点在等电聚焦 (isoelectricfocusing ,IEF)方向的偏差是 0 .873±0 .1 2 5mm ,在十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳 (sodiumdodecylsulfate -polyacrylamidegelelectrophore sis ,SDS -PAGE)方向上的偏差为 1 .0 2 5± 0 .2 1 3mm。 ( 2 )通过比较分析 5例胃腺癌组织及正常胃黏膜组织的双向凝胶电泳图谱 ,得到平均匹配蛋白质点数为 769± 45 ,差异表达蛋白质点数为 81 ,其中 1
- 李艳兰贺修胜陈彦容映晖罗桥宋颖龙志峰苏坚
- 关键词：胃腺癌双向凝胶电泳蛋白质组
- p33^(ING1b)基因对SW480细胞生长增殖的影响被引量：1
- 2008年
- 背景与目的:p33ING1b基因作为一个新的候选抑瘤基因,具有多种生物学功能。本实验旨在研究p33ING1b基因对人结肠癌细胞SW480生长的影响。方法:经Western印迹和免疫细胞化学鉴定,通过生长曲线绘制、软琼脂集落形成实验和流式细胞仪分析检测p33ING1b基因转入对SW480细胞生长增殖以及细胞周期改变和凋亡率方面的影响,并用Western印迹法,检测3组细胞p53、p21WAF1、Bax及Bcl-2蛋白的表达情况,探讨p33ING1b基因抑瘤的可能分子机制。结果:与未转染组(SW480)和空载体组(pcDNA3.1(+)/SW480)相比,p33ING1b蛋白转染组(pcDNA3.1(+)/p33ING1b/SW480)细胞生长增殖速度减慢(P<0.05);软琼脂集落形成率降低(P<0.01);凋亡率增高(P<0.05),而对细胞周期的改变不明显(P>0.05)。p33ING1b基因在SW480细胞中高表达,能有效抑制SW480细胞的生长,并促进其凋亡。Western印迹法分析显示SW480细胞中p33ING1b基因高表达,导致Bax蛋白表达水平升高、Bcl-2蛋白质表达水平降低,差异有显著性(P<0.05);p53及p21WAF1蛋白表达水平稍有升高,但差异无显著性(P>0.05)。结论:高表达外源性p33ING1b基因后,SW480细胞生长增殖速度减慢,凋亡增加,其机制可能与Bax蛋白表达上调、Bcl-2蛋白表达下调有关。
- 赵帅贺修胜吕文玲罗桥
- 关键词：转染基因表达
- 鼻咽癌相关新基因NPCEDRG表达对CNE2细胞生长的影响被引量：7
- 2010年
- 为研究鼻咽癌相关新基因NPCEDRG的功能,探讨其对鼻咽癌细胞生长特性的影响,利用Tet-on调控系统,建立受强力霉素(deoxycycline,Dox)诱导NPCEDRG基因表达的CNE2细胞系.运用RT-PCR选择背景表达低、诱导活性高的细胞克隆,以不同浓度Dox诱导CNE2/Tet/TRE-NPCEDRG细胞,确定Dox的最佳诱导浓度.借助形态学观察、细胞生长曲线、软琼脂克隆形成试验和流式细胞仪分析等方法,对Dox诱导NPCEDRG高表达后CNE2细胞的生物学行为进行了检测.结果显示,NPCEDRG高表达后CNE2细胞增殖速度显著减慢(P<0.05),克隆形成能力显著降低(P<0.01),瘤细胞群体中处于G0/G1期细胞数增加,S期细胞数减少,细胞阻滞于G0/G1期.Tet调控NPCEDRG基因表达CNE2细胞系成功建立,恢复NPCEDRG表达能部分逆转CNE2的恶性表型,证明NPCEDRG是一个鼻咽癌相关的抑瘤基因.
- 阳帅胡华邓敏董娟慧王妍罗桥贺修胜陈主初
- 关键词：鼻咽癌抑癌基因基因表达
- 染色体8p21区域胃癌相关EST的筛选被引量：1
- 2010年
- 目的筛选胃癌发病相关的表达序列标签,为克隆胃癌相关新基因奠定工作基础。方法在染色体8p21-22区域定位查找ESTs,经BLAST比对分析,筛选出符合条件的10个EST,选取其中4个进行引物设计;收集28例胃癌手术切除的新鲜标本,切取胃癌组织为实验组,远离癌组织(≥5 cm)的胃黏膜组织作为正常对照组,分别提取胃癌及正常胃黏膜组织总RNA,运用RT-PCR方法检测EST的表达水平,筛选出在胃癌和正常胃黏膜中表达差异的EST。结果RT-PCR结果显示:EST DA931869在正常胃黏膜组织中阳性表达率为89.28%(25/28),在胃癌组织中阳性表达率为46.43%(13/28),两者比较差异有显著性(P<0.05);其中高分化胃癌中阳性表达率83.33%(5/6),明显高于中分化胃癌57.14%(4/7)和低分化胃癌26.67%(4/15),差异均有显著性(P<0.05);无淋巴结转移胃癌阳性表达率60.00%(9/15)高于有淋巴结转移胃癌的阳性表达率30.77%(4/13),差异有显著性(P<0.05)。结论EST DA931869在胃癌组织中的阳性表达率低于正常胃黏膜组织,胃癌中该EST表达下调或缺失。
- 董娟慧唐雪芳王妍罗桥贺修胜
- 关键词：胃癌
- 胃癌中RUNX3蛋白表达与胃癌关系的研究被引量：3
- 2006年
- 背景与目的:探讨RUNX3基因表达与胃癌发生发展和转移的关系。材料与方法:采用羊抗人RUNX3蛋白抗体和枸橼酸_微波_SP免疫组织化学方法检测胃癌标本和正常胃组织阳性细胞数及阳性率,并采用Westernblot检测胃癌中RUNX3蛋白的表达状况。结果:免疫组化结果表明RUNX3在正常胃组织中阳性率100%,在胃癌中阳性率为51.13%,两者间的差异具有统计学意义(P<0.05);RUNX3蛋白的丢失在胃癌中占48.87%,并且与胃癌的组织类型、淋巴结转移状况有关。Westernblot结果表明RUNX3在胃癌组织中表达明显低于相应正常胃组织,且高分化胃癌中RUNX3蛋白表达高于低分化胃癌。结论:RUNX3可能是胃癌发生中重要的候选抑癌基因。
- 曾超贺修胜罗桥赵帅邓敏
- 关键词：胃肿瘤免疫组织化学RUNX3蛋白
