罗保君 作品数:19 被引量:26 H指数:4 供职机构: 军事医学科学院微生物流行病研究所 更多>> 发文基金: 中国科学院院长基金 国家自然科学基金 中国科学院重点实验室基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
CC类趋化因子受体5(CCR5)在原核和昆虫细胞中的克隆与表达;油桐尺蠖单粒包埋核型多角体病毒(BUSUNPV)BAMHI-H片段的序列分析 该文分三章进行论述:第一章:CCR5在原核表达系统中的表达.第二章:CCR5在昆虫细胞SF21中的克隆和表达.第三章:BUSUNPV BAMHI-H片段序列分析. 罗保君关键词:CCR5 原核表达系统 文献传递 网络资源链接 汉坦病毒包膜糖蛋白基因核酸免疫的初步研究 被引量:2 2006年 目的将克隆有汉坦病毒包膜糖蛋白基因M片段及G1、G2基因的重组质粒免疫动物,了解上述目的基因在核酸疫苗中的应用价值。方法大量制备已构建好的pcDNA3.1-M、pcDNA3.1-G1、pcDNA3.1-G2重组质粒DNA及对照空质粒pcDNA3.1。然后用这四组质粒DNA通过肌肉注射的方法免疫6~8周龄的BALB/c小鼠(每组5只),每4周免疫一次,共免疫3次,每次免疫前及最后一次免疫后2周断尾取血,用免疫荧光的方法检测基因免疫的体液免疫应答效果。结果重组质粒pcDNA3.1-G1免疫小鼠有4只血清抗汉坦病毒抗体为阳性,重组质粒pcDNA3.1-G2以及重组质粒pcDNA3.1-M免疫小鼠各有1只血清抗汉坦病毒抗体为阳性。结论汉坦病毒糖蛋白基因核酸免疫动物后可刺激机体产生特异性的体液免疫应答。 杨茜 张伦理 周育森 罗保君 陈万荣关键词:汉坦病毒 M片段 G1 G2基因 核酸免疫 汉滩病毒M片段噬菌体表位文库的构建及筛选 被引量:1 2006年 目的通过构建汉滩病毒M片段的噬菌体展示文库,筛选汉滩病毒包膜蛋白的抗原表位。方法DNaseⅠ随机消化的M片段与载体pComb3连接,转化宿主XL-1Blue,在辅助噬菌体VCSM13存在的条件下,获得M片段的随机噬菌体文库。利用纯化的恢复期病人血清对M片段噬菌体文库进行3轮淘洗,通过ELISA、序列分析对所获得的克隆进行鉴定。并对其中2个阳性克隆的目的片段进行了原核表达和免疫原性分析。结果筛选获得的5个阳性噬菌体克隆均位于G1蛋白编码区,原核表达的2个阳性克隆片段蛋白免疫兔,免疫兔血清能与病毒抗原发生特异反应。结论本技术路线可用于汉滩病毒包膜蛋白抗原表位的研究,为汉滩病毒诊断试剂的研制、亚单位疫苗的设计提供了数据。 罗保君 石英 常国辉 张秀娟 周育森关键词:噬菌体文库 汉滩病毒膜蛋白重组腺病毒的构建表达及免疫效果的研究 本文将汉滩病毒76-118株M片段克隆入质粒pAdTrackCMV的CMV启动子下游,得到阳性克隆pAdTrackCMV-M.PmeI线性化的阳性克隆与腺病毒骨架载体pAdeasy-1共转化BJ5183宿主菌,脂质体介导... 罗保君 张强 董京芳 丁美 刘树玲 杭长寿 李银太 周育森关键词:汉滩病毒 基因工程 腺病毒载体 免疫效果 文献传递 杆状病毒的分子生物学及分子进化研究 陈新文 胡志红 孙修炼 王华林 王汉中 彭辉银 金锋 李枚 Just M.Vlak Basil M.Arif 刘明富 梁布锋 王录明 邓菲 吴东 罗保君 刘岚 卢玉蓉 张双民 首次报道了棉铃虫病毒HaSNPV基因组131403bp和HzSNPV基因组的全序列97%同源性揭示了两者可能为同一种病毒的不同变种。发明了“基因对比排列图”(GeneParityPlot)研究方法,首次揭示了NPV基因组...关键词:关键词:杆状病毒 分子生物学 分子进化 汉滩病毒膜蛋白重组腺病毒的构建表达及免疫效果研究 被引量:2 2004年 探讨利用腺病毒载体作为汉滩病毒基因工程疫苗载体的可行性。通过PCR扩增,得到完整的汉滩病毒76-118株M片段编码区,将该片段克隆入质粒pAdTrackCMV的CMV启动子下游,得到阳性克隆pAdTrackCMV-M。PmeI线性化的阳性克隆与腺病毒骨架载体pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,经同源重组后得到重组病毒pAdEasy-M。pAdEasy-M经PacI线性化后,脂质体介导转染293细胞,经Western-blot检测表明,G1、G2基因在293细胞中得到表达。重组病毒免疫BALB/c小鼠,产生了具有一定中和活性的抗体。该研究为进一步研制以腺病毒为活载体的工程疫苗奠定了基础。 罗保君 张强 董京芳 丁美 刘树玲 杭长寿 李银太 周育森关键词:汉滩病毒 M片段 重组腺病毒 油桐尺蠖单粒包埋核型多角体病毒(BusuNPV)BamHI-H片段的序列分析 被引量:7 1999年 对油桐尺蠖单粒包埋核型多用体病毒(Buzurasuppressariasingle-nucleocapsidnucleopolyhedrovirus,BusuNPV)基因组中BamHI-H片段的序列进行分析,该片段全长2422bp,包括三个开放阅读框:p47基因(AcMNPVORF40的同源区)的5′端,完整的组织蛋白酶基因(cathepsin)(AcMNPVORF127的同源区)和p74基因(AcMNPVORF138的同源区)的3′端。序列比较分析表明,BusuNPV的这三个基因与其它杆状病毒的同源基因具有相同的结构保守区。BusuNPV基因组BamHI-H片段上这三个基因的排列顺序完全不同于AcMNPV相应基因的排列顺序。 罗保君 王华林 陈新文 孙修炼 王汉中 彭辉银 胡志红 BasilM.Arif JustM.Valk关键词:基因 中国人HIV辅助受体CXCR4基因的克隆及序列测定 被引量:2 2002年 为了获得HIV辅助受体CXCR4基因,进一步探索艾滋病(AIDS)的诊断、防治方法,采用逆转录巢式聚合酶链式反应(RT-nPCR)从中国人外周血淋巴细胞中克隆了CXCR4 cDNA基因,得到了预期的1 100bp左右的片段。将PCR产物与T载体连接,并进行了酶切反应鉴定,获得与T载体正向连接的克隆。测序结果表明:克隆的片段含有一个开放性阅读框架,编码352个氨基酸残基。搜索GenBank,目标片段与M99293、XM051223、XM051224、 XM051225有很高的同源性,比较结果显示:克隆的片段包括完整的编码序列,含两个碱基的差异。 范兆军 李敬云 罗保君 李天宪关键词:CXCR4 CDNA克隆 中国人 茶毛虫核型多角体病毒基因组酶切分析及质粒文库的构建 被引量:4 1999年 应用限制性内切酶图谱分析法,估算茶毛虫核型多角体病毒(EpNPV) 基因组大小为131.09 kb;通过随机克隆,将EpNPV 基因组8 条BamH Ⅰ酶切片段中的6 条、13 条Pst Ⅰ酶切片段中的7 条、26 条EcoR Ⅰ酶切片段中的7 条、21 条Hind Ⅲ酶切片段中的7 条、14 条Xba Ⅰ酶切片段中的9 条分别克隆至载体PTZ19R,构建了EpNPV基因组的部分质粒文库。 陈绳亮 罗保君 常国辉 李天宪 张忠 赵林关键词:茶毛虫 核型多角体病毒 质粒文库 茶毛虫核型多角体病毒(EpNPV)多角体蛋白基因的定位及克隆 被引量:7 2001年 The polyhedrin gene of EpNPV was located on Hin d III E, Xba I B, Eco RI J, Kpn I A, Pst I F, Bam H I G fragments under stringent condition(68℃,in water),by using the DIG labeled Bam H I F fragment of AcMNPV DNA as the probe.In order to sequence the EpNPV polyhedrin gene,the Bam H I G fragment was cloned into pTZ19R vector.Then the fragment was digested by Xba I? Hin d III,and subcloned into pTZ19R. 常国辉 陈绳亮 罗保君 李天宪关键词:茶毛虫核型多角体病毒 克隆