秦宜德
- 作品数：111 被引量：428H指数：11
- 供职机构：安徽医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 敲减EEF1D的人卵巢癌细胞的构建及其药物敏感性研究被引量：2
- 2018年
- 目的探讨RNA干扰真核生物翻译延长因子1δ(EEF1D)基因表达对人卵巢癌耐药细胞DDP、PGPIPN敏感性的影响。方法针对人EEF1D基因设计并筛选出下调基因表达效果最佳的siRNA,构建shRNA序列表达载体pLJM1-shRNA。通过慢病毒表达载体构建稳定转染pLJM1-shRNA-EEF1D的SKOV3、SKOV3/DDP细胞株。RT-PCR和Western blot检测稳定转染细胞株EEF1D基因的表达情况,MTT法测定PGPIPN、DDP、DDP/PGPIPN对稳定转染细胞株的增殖抑制率。结果成功构建重组慢病毒载体pLJM1-shRNA-EEF1D。RT-PCR和Western blot法均证实在SKOV3、SKOV3/DDP细胞中成功敲减EEF1D的表达。此外,MTT结果显示,与对照组和非特异性转染组相比,DDP/PGPIPN细胞的增殖均明显受到抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过敲减EEF1D基因表达可以明显增强人卵巢癌SKOV3/DDP细胞对DDP/PGPIPN的敏感性。
- 汪慎燚徐恰阮昕席浩王鹏陈曦秦宜德
- 关键词：RNA干扰人卵巢癌DDP
- 改良的碱裂解法提取动物细胞附加体DNA被引量：1
- 2009年
- 目的利用一种快速、简便的方法提取动物细胞附加体DNA。方法通过电转移的方法介导pEGFP-N1转染小鼠成纤维细胞NIH3T3和中国仓鼠卵巢癌细胞CHO等细胞系。转染后48h,收集转染细胞。用STET缓冲液重悬细胞,加入碱裂解液裂解细胞,再用7.5mol/L醋酸胺中和。离心收集上清,用1∶1酚/氯仿抽提2次,氯仿抽提1次,乙醇沉淀附加体DNA。TE溶解DNA。提取的DNA通过PCR和Southern blot方法进行分析。结果PCR和Southern blot结果证实利用改良的碱裂解法可以从动物细胞提取附加体DNA。结论利用简便快速的碱裂解法可以提取哺乳动物细胞附加体DNA。
- 周海胜汪渊秦宜德储斌张胜权周青沈继龙
- 关键词：质粒DNA
- 乳中生物活性物质的研究进展被引量：10
- 2004年
- 哺乳动物的乳不仅营养物质丰富,而且含有激素、生长因子、酶、抗体和非抗体保护蛋白等多种生物活性物质,乳蛋白中蕴藏着大量生物活性肽。此外乳中还含有活细胞。这些生物活性物质对婴儿或新生幼仔的代谢、生长发育、免疫和抗菌等有非常重要的作用,有些生物活性物质参与乳腺的生长分化和保护。本文综述了乳源激素和生长因子、酶、抗体、非抗体保护蛋白以及生物活性肽等生物活性物质及其研究进展。
- 秦宜德邹思湘
- 关键词：生物活性物质蛋白质生物活性肽
- 乳源六肽预防和降低小鼠急性酒精性肝损伤及其机制被引量：2
- 2019年
- 目的研究乳源六肽(PGPIPN)在降低小鼠酒精性肝损伤方面的作用及其机制。方法建立小鼠急性酒精肝损伤的动物模型,健康雄性昆明种小鼠60只,体质量18~22 g,动物预饲养1周后分成6组:对照组、模型组、PGPIPN L组、PGPIPN M组、PGPIPN H组和谷胱甘肽(GSH)组,每组10只小鼠。为了制作小鼠急性酒精性肝损伤的动物模型,实验最后3 d,PGPIPN低、中、高剂量组、GSH组和模型对照组以56°红星二锅头酒灌胃,对照组使用等量蒸馏水灌胃,建立小鼠的急性酒精性肝损伤的对照模型。12 h后,将小鼠颈椎脱臼处死,取材检测相关指标。在实验结束时,将小鼠称重并麻醉,收集血清和肝脏样品,取肝脏称重后保存,计算出肝脏指数。同时,测定小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)含量,血清和肝匀浆中三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)的含量。取肝脏组织制作成病理切片,观察肝脏细胞的病理学变化。原代细胞培养,流式细胞术检测肝脏组织的凋亡状况。结果生化分析显示模型组小鼠血清TG、TC和肝脏TG(肝匀浆中TG的浓度)高于对照组,PGPIPN H剂量组、PGPIPN M剂量组和PGPIPN L剂量组血清中ALT、AST含量与模型组相比降低,PGPIPN高剂量组中TNF-α含量较模型组也有减少。对照组中,肝细胞结构完整,凋亡指数为3.61%。而模型组中肝索结构紊乱,液泡数目增加,肝脏细胞的边界不清晰,细胞核消失,细胞皱缩,凋亡指数为36.87%,出现了明显的细胞凋亡状态。PGPIPN L组细胞出现凋亡状态,而PGPIPN H组细胞状态良好,无凋亡现象发生。流式细胞术检测细胞凋亡,对照组为4.558%,模型组为31.50%。结论PGPIPN能够预防和降低小鼠急性酒精性肝损伤。
- 席浩刘沁雪陈曦王鹏李敬文姚晓炜吕志昊许尹秦宜德
- 关键词：小鼠
- 提高医学生物化学教学质量策略探讨被引量：1
- 2012年
- 医学生物化学对于医学院学生而言是一门非常重要的基础学科,但是由于该学科的课程特点使得学生对生物化学的学习具有畏惧心理,如课程内容多、知识结构复杂以及不易记忆等特点。怎样有效的提高医学生物化学教学效果是一个值得关注的问题,笔者根据自己多年的医学院医学生物化学的教学经验提出几点相应的对策。
- 章华兵秦宜德
- 关键词：医学生物化学
- 猪乳中一组高分子量蛋白质的表达量与母猪泌乳性能关系的研究被引量：3
- 2004年
- 通过设计的数学模型,分析了162头二花脸母猪和50头大约克母猪乳中一组高分子量蛋白质(HMWP)的基因表达量(HMWP浓度)与母猪泌乳性能的关系。结果表明,初乳和常乳中HMWP的基因表达量与乳中蛋白质和表皮生长因子(EGF)含量存在显著相关(P<0.05或P<0.01),其中常乳中HMWP的基因表达量与乳蛋白存在极显著正向线性相关(P<0.01)。常乳中HMWP基因表达量与乳糖含量也有正向线性相关的趋势(P<0.1),但与类胰岛素样生长因子-1(IGF-I)和胰岛素含量无显著相关性(P>0.1)。
- 秦宜德徐银学邹思湘Walter L Hurley
- 关键词：猪乳高分子量蛋白质基因表达量母猪泌乳性能表皮生长因子
- 提高母猪泌乳性能的生理生化途径被引量：4
- 2000年
- 猪的初乳和乳是新生仔猪成活、健康生长和发育的关键。本文介绍了哺乳仔猪的生长潜能以及制约因素 ,猪乳的组成特点和分泌规律。探索了调节和促进母猪乳腺分泌功能、改善乳成分和提高母猪泌乳量的可能途径 。
- 邹思湘秦宜德
- 关键词：母猪泌乳性能哺乳仔猪
- 肝细胞生长因子基因修饰的人骨髓间充质干细胞促进大鼠肢体血管新生被引量：10
- 2010年
- 目的评价肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)修饰的人骨髓间充质干细胞(Human bone marrow mesenchymal stem cells,hMSC)体内促血管新生效应,探讨其作用机制。方法结扎Wistar大鼠右侧股动脉,建立局部肢体缺血模型。将hMSC、hMSC/Ad-HGF或PBS,通过肌肉注射接种于缺血区,21d后以对侧肢体为正常对照,进行激光多普勒灌注成像测定、HE染色和免疫组化检查,评价骨骼肌微血管密度。以MTT、Transwell及内皮细胞体外管状结构形成实验,评价hMSC/Ad-HGF对血管内皮细胞的体外增殖、迁移及成管状能力的影响。结果 21d后,hMSC/Ad-HGF和hMSC组血流灌注水平明显高于对照组(P<0.01),前者接近PBS组,显著高于hMSC组(P<0.05)。组织学分析表明,每高倍视野肌肉组织中,hMSC/Ad-HGF组微血管数量最高,PBS组和hMSC组次之,对照组最低(P<0.01)。hMSC/Ad-HGF培养上清可明显促进ECV304细胞的增殖,刺激作用高于表皮生长因子(20ng/mL,P<0.001);促进细胞跨膜迁移和管状样结构形成,强于表皮生长因子。结论 hMSC/Ad-HGF可促进血管内皮细胞的增殖、迁移及血管结构重建,从而引发血管新生效应。
- 刘滋康具星爱靳继德秦宜德郭子宽
- 关键词：间充质干细胞肝细胞生长因子血管新生基因转移
- 牛乳铁蛋白肽基因的慢病毒载体构建
- 牛乳铁蛋白肽(Bovine lactofericin,简称LfcinB)是一种阳离子生物活性肽,是从牛乳铁蛋白的降解产物中分离得到,其含有25个氨基酸残基(Phe-Lys-Cys-Arg-Arg-Trp-Gln-Trp-...
- 张晓宇秦宜德王超张文晓王巍何晓光
- 医学院校生物化学教学方法探讨被引量：3
- 2012年
- 生物化学是医学院校基础医学的必修课程,学好生物化学对于医学院校学生来说十分重要。然而由于生物化学理论抽象、代谢反应复杂、调控机制繁琐,内容涉及众多学科,因而成为基础医学中较难学习的课程之一。如何将抽象深奥的理论知识通过浅显易懂的教学方法传授给学生,一直是生物化学课程教学过程中探讨的热点和核心问题。此外,在科学技术日新月异的今天,生物化学教学的发展不仅要包括教师的教和学生的学,而且还要求教师不断地创新进取。现就如何妥善解决这些相关问题进行一些探讨。
- 戚楠秦宜德
- 关键词：生物化学院校教学方法
