2025年3月14日
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石智聪
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2
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供职机构:
天津大学化工学院生物化工系
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发文基金:
天津市应用基础与前沿技术研究计划
教育部“新世纪优秀人才支持计划”
国家自然科学基金
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相关领域:
化学工程
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合作作者
史清洪
天津大学化工学院生物化工系
孙彦
天津大学化工学院生物化工系
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离子交换介质内蛋白置换行为的观测与解析
2013年
以肌醇六磷酸钠(PAS)为置换剂研究了绿色荧光蛋白(eGFP)在Q Sepharose HP离子交换色谱(IEC)介质上的置换行为。置换色谱结果表明,不同浓度PAS下eGFP均可形成稳定的置换列并成功分离。利用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)技术对eGFP在离子交换色谱介质内吸附动力学的观测发现,eGFP在IEC介质内的吸附是由表面扩散和孔扩散共同作用的复杂行为。置换过程中不同时刻的CLSM图像显示,eGFP置换不仅取决于置换剂的亲和力,也与置换剂与介质的结合过程相关;介质内荧光强度的分析表明,eGFP置换首先发生在介质的外层,PAS浓度的降低导致置换速率下降。这与置换色谱的结果相吻合。CLSM不仅为蛋白置换动力学的研究提供了一种直观观测技术,CLSM结果也确认了蛋白质置换过程的复杂性。
石智聪
史清洪
孙彦
关键词:
共聚焦激光扫描显微镜
绿色荧光蛋白
共聚焦扫描显微镜辅助离子交换置换色谱动力学的研究
与传统洗脱色谱相比置换色谱具有分辨率高、处理量大等优点,但其机理较复杂,这在一定程度上限制了其在生物分离领域的应用。已有学者从宏观角度研究了置换色谱中动力学对等速置换列的影响,但对其微观过程研究较少。目前在置换色谱的微观...
石智聪
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