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王翔

作品数:6 被引量:11H指数:2
供职机构:军事医学科学院生物工程研究所更多>>
发文基金:国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 4篇生物学
  • 4篇医药卫生

主题

  • 3篇单链
  • 3篇单链抗体
  • 3篇抗体
  • 2篇融合基因
  • 2篇尿激酶
  • 2篇肿瘤
  • 2篇重组子
  • 2篇结肠
  • 2篇结肠肿瘤
  • 2篇基因
  • 2篇激酶
  • 2篇杆菌
  • 2篇肠肿瘤
  • 2篇大肠杆菌
  • 1篇单链抗体基因
  • 1篇蛋白
  • 1篇突变
  • 1篇突变体
  • 1篇片段
  • 1篇缺失突变

机构

  • 6篇军事医学科学...
  • 2篇中国人民解放...

作者

  • 6篇俞炜源
  • 6篇王翔
  • 2篇刘志刚
  • 2篇李力
  • 2篇李启胜
  • 2篇李力
  • 1篇王国力
  • 1篇袁枚
  • 1篇黄君健
  • 1篇袁玫

传媒

  • 4篇军事医学科学...
  • 2篇生物工程学报

年份

  • 1篇2000
  • 3篇1999
  • 1篇1998
  • 1篇1996
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
抗结肠癌抗体重链可变区和κ轻链基因的克隆被引量:2
1998年
目的:从一株抗结肠癌细胞系LS174T的单抗细胞株CL-4中克隆出抗结肠癌抗体重链可变区和κ轻链基因。方法:用一步法提取总RNA,逆转录形成cDNA,设计并合成一套扩增小鼠抗体重链可变区和完整κ轻链的通用引物,通过PCR扩增基因,分别克隆入pUC19,作核苷酸序列分析。结果:用重链引物扩增获得长约360bp的片段;用轻链引物扩增获得约640bp的片段,序列测定获得它们的DNA序列。结论:克隆的重链可变区基因长度为360bp,属于小鼠重链可变区I(B)亚族;κ轻链长度为642bp,其中可变区为321bp,属于小鼠κ轻链Ⅴ亚族。
李启胜俞炜源王翔王翔李力
关键词:结肠肿瘤重链可变区克隆
抗结肠癌抗体Fab片段在大肠杆菌中的表达被引量:1
1999年
目的:在大肠杆菌中表达抗结肠癌抗体Fab片段,比较表达产物和原杂交瘤单克隆抗体的抗原结合特性。方法:以DNA重组法构建重组表达质粒,在大肠杆菌中进行表达。对表达产物包涵体进行复性。用ELISA法和SABC法测定复性产物的抗原结合特性。结果:构建了抗结肠癌相关抗原抗体Fab片段的重组表达质粒pGL4,在大肠杆菌JM83中获得表达,表达的Fab片段占全菌蛋白的21%,主要以包涵体形式存在;对包涵体进行分离、变性和复性后得到了有活性的Fab分子。结论:复性后的Fab具有与原杂交瘤单克隆抗体相同的抗原结合活性。
李启胜俞炜源王翔王翔李力
关键词:FAB片段大肠杆菌结肠肿瘤
多菌落分组PCR法从高背景中筛选重组子被引量:1
1996年
多菌落分组PCR法从高背景中筛选重组子王翔俞炜源军事医学科学院生物工程研究所北京100071在基因工程操作中,重组子的筛选、鉴定是必不可少的步骤,一般来说,这属于常规技术,不会有太大难度,但在很多情况下,人们会被很低的重组效率所困扰,如平端连接、部分...
王翔俞炜源
关键词:聚合酶链反应重组子
缺失突变法研究尿激酶——单链抗体融合基因在大肠杆菌中的高表达被引量:2
1999年
对抗人纤维蛋白二聚体单链抗体与scuPA32K融合基因的表达质粒进行内切酶切割、拼接和外切酶Bal31消化,得到了该融合基因的一系列缺失突变体,通过对这些突变体表达情况的研究,将影响表达的关键因素定位于基因的841~851位,可能对应于两个连排的大肠杆菌稀有密码子AGG(精氨酸),用PCR定位诱变法把这两个AGG均改造成CGT后,融合蛋白的表达量从改造前的2%~3%提高到了约30%。
王翔俞炜源
关键词:大肠杆菌缺失突变体
人源化小鼠抗人交联纤维蛋白单链抗体基因的克隆与表达1 刘士辉,王国力,黄君健 等.鼠抗人纤维蛋白抗体 Fv 片段的三维结构模建.军事医学科学院院刊,1997,21(2):1202 王 翔,俞炜源.多菌落分组 P C R 法从高背景中筛选重组子.军事医学科学院院刊,1996;20(4):2333  Kutem ri被引量:1
1999年
目的:克隆和表达人源化小鼠抗人交联纤维蛋白单链抗体。方法:首先依照人源化单链抗体的蛋白序列设计并优化人源化单链抗体的核苷酸序列,然后在化学合成 14 条人源化单链抗体基因片段的基础上,利用二次 P C R 方法构建完整的人源化单链抗体基因,并把构建的全长人源化单链抗体基因直接克隆到表达载体上,利用表达筛选和测序验证相结合的方法挑选正确的基因,并在大肠杆菌中进行了人源化单链抗体基因的 I P T G 诱导表达。结果:构建并挑选到序列正确的全长人源化单链抗体基因,而且在大肠杆菌中实现了目的基因的高表达。结论:基因的部分化学合成, P C R构建及表达筛选是克隆基因的一种有效方法。
刘志刚俞炜源王翔王国力黄君健
关键词:交联纤维蛋白单链抗体
两种人源化单链抗体-尿激酶融合基因的构建与表达被引量:4
2000年
By using PCR and DNA recombination,two fusion genes of humanized mouse anti human fibrin scFv and low molecular weight single chain urokinase (Scu PA 32K)was constructed.The difference of these two fusion genes lay in the linker between two moieties,one was (Ala) 3 and another was (Gly 4Ser) 3.These two fusion genes were both overexpressed in E.coli with the expression level at 30%.Both expression products showed the activity of binding antigen D Dimer and activating plasminogen after the denaturation and renaturation,but under general refolding conditions,the one with linker (Gly 4Ser) 3 showed better effect in the renaturation of fusion protein.
刘志刚俞炜源王翔
关键词:单链抗体尿激酶融合基因连接肽基因表达
共1页<1>
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