李治国
- 作品数：15 被引量：15H指数：3
- 供职机构：南方医科大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 纤维素与明胶微载体微重力培养肝细胞的比较被引量：4
- 2010年
- 目的探讨商品化的多孔微载体:cytopore 2和cultispher S何种更适合于微重力条件下培养CL-1细胞。方法采用RCCS旋转培养系统,在50ml水平微重力旋转培养CL-1细胞。分别对接种至cytopore 2和cultispher S的细胞进行动态形态学观察、细胞计数和功能学检测。结果CL-1细胞在两种载体上均可粘附生长,并于第9天达到生长高峰。细胞计数结果提示cultispher S的细胞密度可达到4×106个/ml。在第10、11、12天,cytopore 2组的上清中白蛋白浓度明显高于cultispher S组,有显著差异(P<0.05),在第10、11天,cytopore 2组的上清中尿素浓度明显高于cultispher S组,有显著差异(P<0.05)。结论Cytopore2培养的CL-1细胞计数低于Cultispher S组,但功能好于Cultispher S组。
- 张志周焕城李治国潘明新王忠高毅
- 关键词：多孔微载体人肝细胞
- 一种简易的人原代肝细胞分离培养方法被引量：3
- 2012年
- 背景:采用原位两步灌流法分离肝细胞数量多,活性高,但灌流装置价格昂贵,操作环节多,技术要求高,所需时间长,易污染,限制了在一般实验室及人原代肝细胞在医学中的应用。目的:建立人原代肝细胞体外分离培养方法。方法:采用多点穿刺灌注方法将预温38℃的前灌流液及Ⅱ型胶原酶溶液灌依次灌入人肝脏组织中,经消化及离心后获得人原代肝细胞;倒置显微镜和电镜观察细胞形态特征,并鉴定。结果与结论:经多点穿刺灌注法消化分离后可获得约5×105个肝细胞,分离获得的肝细胞活率达90%;细胞培养24h后呈铺路石样生长;电镜示肝细胞呈典型形态特征:细胞核大,胞质少;培养的肝细胞PAS糖原染色阳性,白蛋白表达阳性。说明多点穿刺灌注法分离人原代肝细胞简单易行,肝细胞产量高、活力好、纯度高,分离培养的肝细胞具有特异性生物学功能表达,适宜在一般条件实验室推广应用。
- 吴青松李治国刘广波高毅
- 关键词：原代肝细胞灌注法
- 人原代肝细胞分离培养方法
- 本发明提供了一种人原代肝细胞分离培养方法，包括以下步骤：用D-Hank’s液清洗肝组织表面血块，并将结缔组织剪除；用针头注射器多点穿刺灌注预温38℃的前灌流液，使肝组织块由暗红色变为灰白色且流出的前灌流液变清亮；继以预温...
- 李治国高毅刘广波汪艳杜江赵欣张志
- 文献传递
- 利用RNA干扰技术建立稳定抑制猪内源性逆转录病毒表达的西藏小型猪成纤维细胞
- 目的:建立稳定抑制猪内源性逆转录病毒(porcine endogenous rctrovims,PERV)表达且不含PERV-C的猪成纤维细胞,为下一步培育更安全的转基因猪提供核供体细胞,从而解除异种器官和细胞在异种移植...
- 李治国吴青松刘广波潘明新葛梅杜江汪艳高毅
- 关键词：RNA干扰猪内源性逆转录病毒西藏小型猪成纤维细胞
- 文献传递
- 流向控制器
- 本实用新型公开一种流向控制器，用于任意切换进入其中的流体的流向后回流，其包括：四个电控三通阀，每个电控三通阀均具有一垂直口、第一顺水口、第二顺水口、以及电子阀门，该电子阀门受控切换至垂直口与第一顺水口相连通，或切换至垂直...
- 高毅周焕城葛梅李治国赵逸超
- 文献传递
- 永生化人肝细胞系的建立和生物学特性研究
- 目的:构建永生化人肝细胞系,并对其生物学特性及某些功能进行研究,评价其作为生物人工肝种子细胞的可行性。方法:利用慢病毒表达载体对原代培养的正常人肝细胞稳定转染人端粒酶逆转录酶基因(H-TERT)和抑制Caspase-3表...
- 李治国吴青松刘广波潘明新葛梅杜江汪艳高毅
- 关键词：永生化肝细胞生物学特性肝细胞系
- 文献传递
- 明胶、丝素—壳聚糖微载体培养肝细胞的比较研究被引量：3
- 2010年
- 目的自制丝素—壳聚糖多孔微载体,在模拟微重力条件下接种培养肝细胞,并与多孔微载体CultispherS上的细胞生长状况进行比较。方法油包水乳化后以冻干法制作丝素—壳聚糖多孔微载体。培养体积50 ml,以旋转培养系统分别对接种至丝素—壳聚糖多孔微载体和Cultispher S的CL-1细胞进行培养,并动态观察形态学、细胞计数,检测人源性白蛋白分泌和尿素合成功能。结果CL-1细胞在Cultispher S上呈单层生长,在丝素—壳聚糖多孔微载体上呈现多层生长。第9天细胞计数结果达到峰值,丝素—壳聚糖多孔微载体的细胞密度可达到5.7×106个/ml,明显高于Cultispher S组(P<0.01)。自培养第10天起,丝素—壳聚糖多孔微载体组上清中的人源性白蛋白和尿素水平均明显高于Cultispher S组(P<0.01)。结论相对Cultispher S,丝素—壳聚糖多孔微载体更适合在微重力条件下培养CL-1细胞。
- 张志龚独辉周焕成李治国潘明新高毅
- 关键词：微载体丝素壳聚糖人肝细胞
- 人源肝细胞系CL-1、HepFMMU、HepG2、C3A生物学特性与功能的比较被引量：2
- 2012年
- 目的:比较体外培养的四种人源肝细胞系CL-1、HepFMMU、HepG2、C3A生物学与功能特性的异同,初步评价其应用于生物人工肝的可行性,为其在组织工程学研究和临床医学中的应用奠定基础。方法:4种肝细胞在接种密度相同的条件下培养7d,观察4种细胞形态特征和功能状态,检测培养液中白蛋白、尿素及安定代谢量。结果:4种肝细胞系均具有较快的生长速度,功能学比较C3A具有良好的白蛋白合成和安定代谢功能;CL-1具有良好的尿素合成功能。结论:4种肝细胞具有良好的增殖能力,C3A具有良好的白蛋白合成及安定代谢能力,但其尿素合成能力较差,需进一步改进;CL-1具有较好的尿素合成能力,但其安定代谢和白蛋白合成功能较差;HepFMMU功能较差,不适宜用于生物人工肝。
- 吴青松李治国刘广波高毅
- 关键词：肝细胞生物人工肝
- RNA干扰抑制猪内源性逆转录病毒表达及其多克隆抗体制备的研究
- 第一部分兔抗猪内源性逆转录病毒P15E多克隆抗体的制备 研究背景和目的 猪器官、组织和细胞作为临床移植的供体源具有广泛和良好的应用前景,可缓解临床器官移植的器官相对短缺；也可为临床治疗1型胰岛素依赖型糖尿病,帕金森病、亨...
- 李治国
- 关键词：猪内源性逆转录病毒多克隆抗体猪内源性逆转录病毒西藏小型猪成纤维细胞RNA干扰技术猪内源性逆转录病毒成纤维细胞
- 文献传递
- 一种检测微量白蛋白的方法
- 本发明提供一种检测纳克级含量的白蛋白的方法，该方法包括将白蛋白标准品稀释至在纳克级别内适当分布的浓度梯度，加入过量的白蛋白抗体，并进行第一次温育；向温育后的液体中加入相对于剩余白蛋白抗体是过量的放射性同位素标记的白蛋白，...
- 李治国高毅汪艳刘金华杜江
- 文献传递
