李江华
- 作品数：174 被引量：782H指数：12
- 供职机构：江南大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学理学更多>>
- 利用环糊精糖基转移酶转化合成AA-2G的研究被引量：2
- 2018年
- 利用环糊精糖基转移酶(CGT-SL)对转化合成2-O-α-D-吡喃葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2G)的条件进行考察。反应产物通过HPLC/LC-MS分析确定含有AA-2G。以便宜易得的可溶性淀粉和VC作为底物,在初始反应条件下AA-2G的产量为1.23 g/L。通过转化条件优化初步确定了转化反应的最优条件:最适温度15℃,最适pH 4.0,转化反应时间32 h,底物VC和可溶性淀粉的比例为2∶4,VC质量浓度为16 g/L,酶浓度为79 U/m L时,AA-2G的产量达到6.23 g/L,VC转化率为19.93%。
- 单丽媛刘龙李江华堵国成陈坚
- 关键词：环糊精葡萄糖基转移酶L-抗坏血酸
- 比较基因组分析Yarrowia lipolytica BBE-17的赤藓糖醇合成机制
- 2019年
- Yarrowia lipolytica BBE-17是一种野生型非模式菌,可发酵生产赤藓糖醇,具有潜在的工业应用价值。我们将菌株BBE-17与模式菌株CLIB122进行了比较基因组分析,探究其赤藓糖醇积累的可能机制,揭示了BBE-17中43921个单核苷酸多态性(SNPs),8078个小片段插入和缺失。此外,与参考基因组相比,发现了129个基因组结构变异和142个覆盖六条染色体的DNA拷贝数变异。在这些变异中,与赤藓糖醇合成有关的途径基因只有TKL1和ER,分别发生了1个单核苷酸多态性变化,并且只导致1个氨基酸发生改变,表明这两个基因中的SNP不是造成赤藓糖醇积累的主要原因,而BBE-17中大量的缺失型基因组变化可能是代谢网络改变的主要原因,也可能是靶向代谢途径增强和赤藓糖醇积累的主要原因。在基因组层面全局揭示了BBE-17与CLIB122的差异,探寻其积累赤藓糖醇的机制,为进一步优化改造亚罗解脂酵母生产赤藓糖醇提供了思路和理论依据。
- 邱学良堵国成张娟李江华
- 关键词：赤藓糖醇
- L-氨基酸脱氨酶全细胞转化L-苯丙氨酸生产α-苯丙酮酸
- 苯丙酮酸是一种多功能有机酸,广泛应用于制药、食品、化学工业.传统化学合成法污染严重,能耗高,产率低.L-氨基酸脱氨酶(EC1.4.3.2,L-AAD)催化L-氨基酸氧化脱氨基,生成相应α-酮酸和氨,多为黄素蛋白.Prot...
- 侯颖刘龙李江华堵国成
- 关键词：催化剂L-苯丙氨酸
- 文献传递
- 代谢工程改造蛋氨酸代谢途径构建高产L-蛋氨酸大肠杆菌被引量：5
- 2013年
- 以Escherichia coli BL21(DE3)为出发菌株,敲除其蛋氨酸合成途径中关键酶的阻遏基因metJ,使菌株积累蛋氨酸达22 mg/L.在此基础上,利用紫外诱变筛选育出一株抗蛋氨酸结构类似物的蛋氨酸高产菌株YB12,使蛋氨酸产量提高到60 mg/L.通过过量表达蛋氨酸合成途径中的metA和cysE基因及编码蛋氨酸转运蛋白的yeaS基因,YB12菌株积累蛋氨酸量提高到251 mg/L.结果表明,蛋氨酸在胞外的积累受多个基因、多种代谢途径调控,单独敲除某个基因或改造某个途径不能使蛋氨酸大量合成和积累,对多个代谢途径共同改造是构建蛋氨酸工程菌的最有效方法.
- 郭谦方芳李江华陈坚堵国成
- 关键词：大肠杆菌蛋氨酸突变
- 生物工程专业虚拟仿真实验教学资源建设思路探讨被引量：1
- 2020年
- 在"互联网+"时代,各项技术的发展给生物工程专业实验教学的教学方法、课堂模式、学习支持、教学资源、教学评价等带来多方面的改变,各项虚拟仿真实验在现代技术的帮助下有了质的改善,无论是实验的仿真程度,还是教学资源的信息化水平,都有了很大的提升。基于当前技术不断发展的社会背景,对优化生物工程专业仿真实验教学的意义和方法进行探索。
- 李由然李江华
- 关键词：生物工程专业虚拟仿真实验教学资源发酵工程微生物工程生物工程下游技术
- 环糊精糖基转移酶-淀粉酶CBM区域嵌合酶的构建以提高2-O-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸的合成效率
- 本文基于融合PCR技术,以来自于Alkalimonas amylolytica 的α-淀粉酶碳水化合物结合区域(CBMAmy)与来自于Paenibacillus macerans 的环糊精糖基转移酶(CGTase)为基础...
- 韩瑞枝刘龙李江华堵国成陈坚
- 分阶段调控关键因素提高白僵菌固态发酵产孢量被引量：3
- 2013年
- 采用分阶段调控关键因素策略,对白僵菌固态发酵过程进行优化。优化后最佳发酵模式为:初始含水量为65%,发酵至48 h将含水量调为68%;发酵至20 h和40 h分别适当翻料;0～48h(适应期)发酵温度为25℃,48～108 h(快速生长期)发酵温度为24℃,108～168 h(稳定期)发酵温度为28℃;同时,48～108 h按通气比1:2通气,0～48 h和108～168 h不通气。采用上述关键因素调控策略后,白僵菌固态发酵产孢量达18亿孢子/g(干培养基),与优化前相比产孢量提高约360%,效果显著。
- 李华祥杨海泉李江华刘龙华兆哲堵国成陈坚
- 关键词：白僵菌固态发酵产孢量
- 转氨酶产生菌的筛选鉴定及其摇瓶发酵条件的优化被引量：7
- 2008年
- 从土壤中分离到1株具有支链氨基酸转氨酶活性,且亮氨酸转氨酶活性较高的菌株WJ44。通过观察形态特征、生理生化实验以及16SrRNA序列的比对和系统发育分析,鉴定其为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。经过对产酶条件的优化,确定最佳摇瓶产酶条件为:葡萄糖20g/L,蛋白胨15g/L,牛肉膏5g/L,玉米浆15g/L,KH2PO43g/L,MgSO4·7H2O0.5g/L,初始pH7.0,培养温度37℃,装液量20mL/250mL三角瓶,摇床转速200r/min。WJ44菌株在最佳产酶条件下培养10h其亮氨酸转氨酶酶活即可达到45.787U/mL,菌体干重8.643g/L,分别比原来提高了54%与10%,是一株产酶和生长性能较佳的菌株。
- 王晶李江华房峻陆健堵国成陈坚
- 关键词：蜡状芽孢杆菌发酵条件优化
- 微生物酶高效异源表达策略的最新研究进展被引量：3
- 2013年
- 酶是一种高专一性的生物催化剂,在化工、农业、医药、食品、纺织、饲料等领域具有广泛应用。常见的酶表达宿主包括大肠杆菌、芽孢杆菌、丝状真菌、酵母、乳酸菌等。不同类型的表达宿主具有不同的特点,如细菌宿主可用来快速地过量表达原核来源的酶,但真核来源的大分子蛋白由于翻译后修饰的原因往往不能在细菌表达系统中正确表达,仅可以在真核表达宿主中正确表达。近年来利用不同表达宿主实现工业酶的高效异源表达取得了很大进展。本文系统总结了在不同表达宿主中实现工业酶高效异源表达策略的最新研究进展,并对工业酶高效异源表达技术的发展趋势进行了展望。
- 杨海泉刘龙李江华堵国成陈坚
- 关键词：异源表达芽孢杆菌丝状真菌乳酸菌
- 基于蛋白质折叠自由能分析的定点突变提高谷氨酰胺转胺酶热稳定性被引量：3
- 2018年
- 谷氨酰胺转胺酶(Transglutaminase,EC 2.3.2.13,TGase)广泛应用于食品、纺织等领域。为提高TGase的热稳定性,通过PoPMuSiC-2.1预测了降低Streptomyces hygroscopicus TGase分子折叠能的氨基酸位点,并构建了相应的突变体。PoPMuSiC-2.1预测结果显示,替换P132的氨基酸引起TGase折叠自由能下降的幅度最大。基于此,通过定点突变分别构建了低折叠自由能的突变体P132I、P132G、P132M、P132Q。酶学分析表明,P132I在50℃下的半衰期达到5.0 min,较野生酶提高31%;其它突变体则较野生酶提高2%～13.7%。此外,P132I和P132G比酶活亦分别较野生酶提高24%和12.4%,其它突变比酶活变化不明显。作用力分析发现,突变体P132I中较野生TGase增加两个氢键。上述结果表明,基于蛋白质折叠自由能分析的定点突变能有效地提高TGase的热稳定性与催化活性,氢键的增加可能是P132I热稳定性提高的原因之一。
- 童理明刘松李江华堵国城陈坚
- 关键词：谷氨酰胺转胺酶定点突变热稳定性
