李兰玉
- 作品数：11 被引量：12H指数：2
- 供职机构：广西大学更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学医药卫生艺术更多>>
- 甲基化酶抑制剂5-Aza-CdR处理对德保猪手工克隆胚胎体外发育潜能的影响被引量：3
- 2014年
- 供体细胞的不完全重编程是动物克隆效率低的主要原因。本研究采用不同浓度(0.00(对照)、0.25、0.50和1.00μmol·L^(-1))的DNA甲基化转移酶抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理德保猪耳成纤维细胞,将处理后成纤维细胞作供体进行手工克隆。结果显示:各处理组细胞生长曲线均呈"S"型,其中0.25μmol·L^(-1)组细胞生长曲线与对照组最相近。随着5-Aza-CdR浓度增加,细胞均有不同程度的畸变、生长抑制甚至致死。0.00~0.50μmol·L^(-1)5-Aza-CdR处理对德保猪成纤维细胞不会显著改变其细胞染色体整倍性。5-Aza-CdR不同程度下调了德保猪耳成纤维细胞中Dnmtl、Tet1、Tet2和Tet3的相对表达,对Dnmt1、Tet1和Tet3表达量的下调呈剂量相关。以处理后成纤维细胞作供体,猪手工克隆重构胚体外发育的卵裂率(24、48 h)和桑椹胚率各组间差异不显著(P>0.05),其中0.25μmol·L^(-1)组和0.50μmol·L^(-1)组囊胚发育率显著高于1.00μmol·L^(-1)组(P<0.05),而与对照组差异不显著(P>0.05)。0.50μmol·L^(-1)组囊胚细胞数显著高于对照组和1.00μmol·L^(-1)组(P<0.05),而与0.25μmol·L^(-1)组之间差异不显著(P>0.05)。综上表明:高浓度5-Aza-CdR对德保猪成纤维细胞增殖和染色体具有副作用,低浓度(≤0.25μmol·L^(-1))的5-Aza-CdR可用于供体处理以降低克隆胚胎甲基化水平及提高手工克隆猪胚胎发育潜能。
- 陆杏蓉孙俊铭李志鹏李兰玉谢炳坤刘庆友石德顺崔奎青
- 关键词：5-AZA-CDR重编程
- 慢病毒介导多短发卡RNA串联载体构建与体内外抗口蹄疫效果评估被引量：2
- 2014年
- 【目的】探讨应用多短发卡RNA（ shRNA）串联沉默口蹄疫病毒RNA复制的可行性。【方法】针对口蹄疫病毒（Foot and mouth disease， FMDV）非结构蛋白基因3B和3D保守区域设计合成3个shRNA的串联片段，并分别用3个不同序列的启动子引导，成功构建了3shRNA串联的慢病毒RNAi载体。利用慢病毒3质粒包装系统共转于293T细胞包装成慢病毒颗粒。利用包装的慢病毒处理细胞及乳鼠，并接种FMDV，观察FMDV抑制情况。【结果和结论】结果显示，慢病毒处理BHK-21获得的转基因细胞中检测shRNA表达；通过O型FMDV接种发现转基因细胞对口蹄疫病毒的复制有明显的抑制，其中在接种后24 h病毒拷贝量仅为普通细胞的1/3；O型FMDV毒株接种于抗口蹄疫慢病毒载体预处理过的3～5日龄乳鼠，在5 LD50滴度下全部乳鼠均存活，在20 LD50滴度下存活率也提高50％。构建的慢病毒介导多shRNA串联表达抗口蹄疫载体能提高BHK-21细胞和乳鼠对口蹄疫病毒的抵抗力，有效地避免了5 LD50滴度内乳鼠的死亡现象，具有抵抗口蹄疫病毒毒性的良好性能。
- 张晓溪李兰玉刘庆友郑海学李湘萍崔奎青石德顺
- 关键词：口蹄疫病毒慢病毒载体
- 一种完全小分子化合物诱导山羊多能干细胞的制备方法
- 本发明提供了一种完全小分子化合物诱导山羊多能干细胞的制备方法，包括以下步骤：山羊耳缘成纤维细胞及小鼠胎儿成纤维细胞的分离、饲养层的制备、细胞培养基配制、山羊诱导多能干细胞样克隆的生产、山羊诱导多能干细胞样克隆形态特征的识...
- 黄奔李兰玉石德顺张丹丹郑贝贝任颜颜叶升刘树林
- 文献传递
- 小分子化合物诱导山羊成纤维细胞重编程为类多能干细胞及转分化的研究
- 获得理想的细胞类型是再生医学长久的目标,对生物医学的发展及动物繁育方面有着巨大影响,如细胞治疗、药物研究、疾病模型制作、器官体内再生、动物育种、转基因动物生产以及乳腺生物反应器等方面。体细胞重编程以及转分化技术为上述研究...
- 李兰玉
- 关键词：表观遗传修饰转分化
- 文献传递
- 利用小分子化合物获得完全化学诱导小鼠多能干细胞(CiPSC)
- 引言 2006年Takahashi和Yamanaka应用转录外源因子首次获得了小鼠诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell,iPSC)[1],这为多能干细胞建系培养提供了新的的研究方法的...
- 李兰玉刘庆友张俊邓彦飞石德顺黄奔
- LPA对猪孤雌胚胎早期发育的影响
- 2017年
- 为了研究Hippo信号通路对猪胚胎早期胚层分化的影响,试验采用QRT-PCR方法测定了孤雌囊胚多能性以及胚层标志基因SOX2、OCT4、KLF4、CDX2、NANOG和GATE4的表达变化。结果表明:Lysophosphatidic acid(LPA)处理后滋养层标志基因CDX2上调2.15倍,内胚层标志基因GATE4显著下调,多能性基因OCT4上调2.3倍,而SOX2、NANOG以及KLF4没有显著变化。
- 朱秀生高邦君伊善宝付念文邓彬朱露露李兰玉石德顺黄奔
- 关键词：孤雌胚胎多能性外胚层内胚层滋养层
- 2i/LIF对维持小鼠胚胎干细胞多能性的研究
- 2016年
- 为了研究小分子化合物对维持小鼠胚胎干细胞(Embryo Stem Cell,ES细胞)体外培养的影响,试验使用2i/LIF培养基,包括基础培养基N2B27(Knockout DMEM/F12+N2+Neurobasal+B27+20%SR)添加1μmol/L PD0325901(FGF-MAPK通路抑制剂)和3μmol/L CHIR99021(GSK通路抑制剂)两个小分子化合物以及10 ng/m L小鼠白血病抑制因子(m LIF),以丝裂霉素C处理过的小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)为饲养层培养小鼠胚胎干细胞,进而探讨该培养基对维持ES细胞多能性的影响,并进行PCR和免疫荧光检测以及体内外分化试验,为应用该培养基到大家畜多能干细胞体外培养奠定基础。结果表明:该培养条件能有效维持ES细胞的多能性。细胞具有典型小鼠胚胎干细胞的形态特征,呈碱性磷酸酶阳性,表达OCT4、KLF4、NANOG、SOX2、REX1、DNMT3B、DAPP4和CDH1多能性干细胞标志基因,表达多能性相关蛋白OCT4、SOX2、NANOG、TRA-1-60、E-cadherin和表面特异性抗原SSEA-1,具有分化成3个胚层的能力。说明已经建立了利用2i/LIF培养基维持多能干细胞体外培养的实验平台。
- 李兰玉张俊朱露露朱秀生石德顺黄奔
- 关键词：小分子化合物多能性体外培养
- BMP1基因在动物卵泡发生和胚胎发育中的表达规律及调控机制的研究进展被引量：2
- 2015年
- 骨形态发生蛋白1(BMP1)是一类属于虾红素家族的金属蛋白酶,它在细胞外基质的形成以及调控TGFβ信号通路的过程中发挥重要作用。BMP1基因在动物卵泡发育过程中具有不同程度表达,并以某种形式参与了动物胚胎的发生和发育过程。开展对BMP1基因的研究将有助于人们从基因角度进一步阐明动物卵泡的形成和胚胎发育的机制,对医学和畜牧业等领域将产生积极的影响。着重从BMP1基因在动物胚胎发育过程中的表达定位、功能及其机制进行综述。
- 雷小灿李兰玉李志鹏崔奎青刘庆友石德顺
- 关键词：胚胎发育
- BGJ398对猪孤雌胚胎早期发育的影响
- 2016年
- 为了研究FGF信号通路对猪胚胎早期胚层分化的影响,试验采用QRT-PCR方法检测FGF信号通路抑制剂BGJ398处理后猪孤雌囊胚多能性及胚层标志基因SOX2、OCT4、KLF4、CDX2、NANOG和GATA4的表达变化。结果表明:BGJ398促进了多能性和滋养层标志基因的表达,SOX2、OCT4、KLF4和CDX2的相对表达量分别是对照组的4.13,3.25,33.06,2.59倍,但未显著影响原始外胚层标志基因NANOG和内胚层标志基因GATA4的表达。说明BGJ398并未显著影响内外胚层的分化,因此推断FGF信号通路对于猪胚胎早期胚层分化可能并不是必需的。
- 李兰玉张俊李志鹏朱露露朱秀生石德顺黄奔
- 关键词：孤雌胚胎QRT-PCR
- 小分子化合物促进体细胞重编程为多能干细胞的研究进展被引量：5
- 2017年
- 诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iP SCs)是指通过转入外源转录因子将体细胞重编程为具有胚胎干细胞(embryo stem cells,ESCs)特性与功能的一种细胞。iP SCs在细胞治疗、体外疾病模型建立与机理研究、药物发现及评价等方面有着巨大的潜在应用价值。近年来,重编程技术发展快速,然而仍处在了解细胞重编程机制的早期阶段。小分子化合物作为一种简单的操作工具,可以调控细胞的不同信号通路、表观遗传及新陈代谢等。在重编程过程中,它能够显著提高iP SCs的重编程效率,可以替代相关转录因子进行重编程,也可以促进初始态多能性(Na6ve)的转化。文章旨在总结近几年来小分子化合物在诱导体细胞重编程中的作用,为进一步完善iP SCs重编程技术提供参考。
- 李兰玉朱露露朱秀生石德顺黄奔
- 关键词：PLURIPOTENT重编程小分子化合物
