曾丽娟
- 作品数：4 被引量：11H指数：2
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 生淀粉酶生产菌株Paenibacillus sp.的筛选和酶的纯化及酶学性质被引量：6
- 2010年
- 分离得到1株产生淀粉酶的菌株,通过扩增和测定16S rDNA序列并进行比对,发现是Paenibacillus属的细菌。液体摇瓶发酵结束后,其产生的生淀粉酶比酶活达108.5U/mL。通过饱和(NH4)2SO4沉淀、Sephacryl S-300层析的方法对其所产的生淀粉酶进行分离纯化,得到纯化的酶蛋白比酶活为5112.04U/mg,纯化倍数为14.1,相对分子质量约为1.0×105。该酶以木薯生淀粉为底物时,最适pH5.6,最适温度50℃。金属离子Ca2+、Mg2+对该酶具有激活作用,Zn2+、Cu2+、Fe2+、Ni2+、Mn2+、Co2+和EDTA2-对该酶均具有抑制作用。
- 曾丽娟杨键陈英王青艳黄日波
- 关键词：PAENIBACILLUS生淀粉酶
- 富集宏基因组DNA中α淀粉酶全长基因的克隆及重组表达被引量：3
- 2010年
- 利用反向-巢式PCR(IN-PCR)从富集土壤宏基因组DNA中克隆到一种α-淀粉酶基因的全序列,其基因登录号为GU045523,测序分析显示与来自Bacillussp.KR-8104耐酸淀粉酶不完整基因同源性为99%。将获得的α-淀粉酶成熟肽基因与表达载体pSE380连接,导入Escherichia coliJM109中,IPTG诱导表达。粗酶液经Ni-NTA、SephacrylS-200纯化后测定酶学性质:重组酶GXAA的最适作用pH为7.0,最适作用温度为75℃,对可溶性淀粉的Km值为11.6g/L。构建突变子E27G、A450T、E27G-A450T,其酶学性质与原始酶没有显著差别。
- 杨键曾丽娟廖思明王青艳杜丽琴韦宇拓黄日波
- 关键词：宏基因组侧翼序列Α-淀粉酶
- 类芽孢杆菌属菌株产生淀粉酶的分离纯化及对淀粉结合域CBM25的初步研究
- 由于近年来石油价格不断攀升，各个国家和实验室都在寻找高效的可再生能源来取代石油这一高耗费的能源，比如利用木薯、马铃薯淀粉等来生产燃料乙醇。工业上，淀粉转变为葡萄糖需要经过液化和糖化两个步骤，这就要求对淀粉原料进行高温蒸煮...
- 曾丽娟
- 关键词：生淀粉酶分离纯化酶学性质
- 文献传递
- 酿酒酵母脂肪酶基因TGL3的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达被引量：2
- 2010年
- 目的:克隆Saccharomy cescerevisiae脂肪酶基因,并实现其在Pichia pastoris中高效表达。方法:根据NCBIGenBank中已公布的Saccharomyces cerevisiae脂肪酶基因TGL3设计引物,以Saccharomyces cerevisiae总DNA为模板,PCR扩增目的片段,构建重组子pPIC9K-TGL3,转化到Pichia pastoris GS115。结果:扩增得到1929bp的基因片段,与GenBank中公布的序列氨基酸同源性达99.7%,编码的643个氨基酸中有脂肪酶的保守序列GXSXG,位于235～239位。重组子摇瓶发酵120h发酵液上清脂肪酶酶活达到60U/mL,酶学性质研究表明:该酶的最适作用温度为40℃,在25℃～40℃之间能保持60%以上酶活力。最适pH值为8.5,在pH6.5～9.0之间能保持50%以上的酶活力。除Al3+和Fe2+外,该酶不受Ca2+、Mg2+、Zn2+、Cu2+、Mn2+、Ni+、Sr2+等多种金属离子的影响。结论:发酵液上清脂肪酶酶活达到60U/mL,是原菌株的10倍,成功实现了该基因的高效表达。
- 陈英卢福芝曾丽娟朱绮霞张搏韦宇拓黄日波
- 关键词：酿酒酵母脂肪酶基因克隆毕赤酵母
