- 评价AS—LNA—qPCR法检测JAK2V617F突变率的临床应用价值
- 2013年
- 目的建立一种定量检测外周血细胞酪氨酸激酶2（JAK2）基因V617F突变率的等位基因特异性实时荧光定量PCR（AS＋qPCR）方法。方法在AS—qPCR基础上，引入l条锁核酸（LNA）修饰的寡核苷酸探针，用以选择性抑制AS—qPCR中突变引物对野生等位基因的非特异性扩增，定量检测JAK2V617F突变率，称之为AS—LNA—qPCR法。通过AS—LNA—qPCR法测定样本的循环阈值（ct值），根据AS．LNA—qPCR法检测不同JAK2V617F突变率标准品的ct值，绘制标准曲线，根据标准曲线直接获得检测样本中JAK2V617F突变率。我们对该方法标准品的批内、批问检测结果进行了评价，并对623名表观健康人外周血细胞基因组DNA中JAK2V617F突变进行检测，以探讨其临床应用价值。结果AS—LNA—qPCR法定量检测JAK2V617F突变率的下限可达到0．01％，批内、批问平均变异率分别是6．3％和8．6％。对623名表观健康人外周血细胞基因组DNA中JAK2V617F突变检测显示，其中19名（3％）表现健康人JAK2V617F突变阳性，突变率变化范围为0．01％～5．49％。结论AS—LNA—qPCR方法直接定量检测外周血细胞JAK2V617F突变率，具有检测灵敏度高和重复性好的特性，适合临床上用于对骨髓增殖性疾病诊断、疾病进程评估和疗效的监测。
- 邵冬华梁国威何美琳曹清芸
- 关键词：DNA突变分析骨髓增殖性疾病锁核酸
- UF-500i全自动尿沉渣分析仪测定尿细菌计数参考范围的建立被引量：5
- 2015年
- 目的建立UF-500i型全自动尿沉渣分析仪检测健康成人尿液中细菌计数的参考范围。方法用UF-500i型全自动尿沉渣分析仪检测健康成年人（男、女各150例）新鲜非离心尿液标本,对不同性别和年龄组研究对象的检测结果进行分析,建立健康成人尿液中细菌计数的参考范围。结果女性尿液中细菌计数明显高于男性,差异有统计学意义（P〈0.05）。〉60岁组的尿液中细菌计数明显高于其他年龄组（P〈0.05）。〉60岁和18-60岁的女性尿液中细菌计数参考范围分别是190.91-334.96、0.00-2 476.12/μL。〉60岁和18-60岁的男性尿液中细菌计数参考范围分别是51.49-83.68、0.00-1 759.76/μL。结论各实验室有必要根据自身情况建立自己的健康人群尿液细菌计数参考范围。
- 闫飞张茹何美琳梁国威曹清芸刘洁邵冬华
- 关键词：细菌计数尿沉渣
- B族链球菌在妊娠末期孕妇中的感染状态与阴道微生态评分相关性分析被引量：26
- 2019年
- 目的对妊娠末期B族链球菌(GBS)感染状况与阴道微生态Nugent评分进行相关性分析。方法 2017年10月～2018年8月共收集621例妊娠35～37周孕妇的生殖道分泌物标本,应用荧光定量PCR检测GBS,应用涂片革兰氏染色进行Nugent评分,以GBS结果阳性与否分组,比较两组间Nugent评分差异有无统计学意义,以Nugent评分分组比较组间GBS阳性率差异有无统计学意义,双侧P<0.05为差异有统计学意义。结果 GBS阴性组与阳性组间Nugent评分分别为4.07±1.11,4.66±1.49,差异有统计学意义(t=-3.380,P<0.001)。根据Nugent评分分为正常组(≤3分)、疑似组(4～6分)与细菌性阴道炎(BV)患者组(≥7分),三组GBS阳性率分别为9.14%,11.81%和33.33%。两两比较显示,正常组与疑似组间阳性率差异无统计学意义(χ~2=0.916,P=0.339),正常组与BV组组间比较差异有统计学意义(χ~2=19.665,P<0.001),疑似组与BV组组间比较差异有统计学意义(χ~2=17.689,P<0.001)。结论 GBS感染与阴道微生态紊乱有一定的相关性,Nugent评分越高,GBS感染率越高,有一定的临床提示意义。
- 曹清芸柏明见何美琳侯芳梁国威
- 关键词：妊娠末期B族链球菌细菌性阴道炎
- 同型半胱氨酸联合肾功能指标对老年高血压早期肾损伤的诊断效果评价被引量：1
- 2021年
- 目的探讨在老年高血压早期肾损伤的诊断中应用同型半胱氨酸(Hey)联合多项肾功能指标检测的临床价值。方法回顾性分析2019年8月至2020年7月航天中心医院收治的90例老年高血压患者的临床资料,根据其是否合并肾损伤分为单纯高血压组(45例)与早期肾损伤组(45例),同时回顾性分析45例老年体检健康者的临床资料,将其设为对照组。对比3组研究对象各项临床指标水平与阳性检出率,采用受试者工作特征(R0C)曲线分析不同检测方式对老年高血压早期肾损伤的诊断效能。结果对照组、单纯高血压组、早期肾损伤组患者Hey、尿素氮(BUN)、肌酐(Ser)、尿酸(UA)水平均呈上升趋势,且早期肾损伤组患者均显著高于对照组与单纯高血压组;3组研究对象Hey、BUN,UA及联合检测阳性检出率均呈上升趋势,且联合检测阳性检出率显著高于BUN、UA单独检测(均P<0.05);经R0C曲线分析,Hcy、BUN、UA及联合检测曲线下面积分别为0.814,0.733、0.748、0.898。结论血清Hey、BUN、UA水平的变化均可有效反映老年高血压早期肾损害程度,而联合检测会进一步提高对老年高血压早期肾损伤的诊断效能。
- 牛茜高荣曹清芸
- 关键词：高血压早期肾损伤同型半胱氨酸肾功能指标
- 6620例早、中期妊娠妇女不同年龄段全血微量元素分析被引量：7
- 2019年
- 目的:探讨不同妊娠期不同年龄孕妇微量元素的全血含量,为孕妇合理安全补充微量元素提供依据。方法:6620例年龄20~39岁健康孕妇,按孕期分为早孕组2530例和中孕组4090例。分别进行血铜、锌、钙、镁、铁含量检测,选取相同年龄范围200例健康非妊娠妇女作对照组。结果:在早、中孕期,孕妇血镁、钙水平与对照组无统计学差异(P>0.05),铜高于对照组(P<0.05),锌、铁低于对照组(P<0.05)。早、中孕期26~<36岁及≥36岁年龄段血铜水平高于≤25岁年龄段(P<0.05),孕中期≤25岁段血铁水平高于26~<36岁及≥36岁年龄段妇女(P<0.05)。早孕、中孕组血铁低水平比率分别为16.1%和27.8%,与对照组(1.5%)比较有统计学差异(P<0.01);早孕、中孕期分别有5.8%、9.6%的孕妇血锌水平低,高于对照组(2.5%)(P<0.01)。早中孕期妇女血钙低水平分别占4.97%和4.96%,高于对照组(2.5%)(P<0.05)。结论:宜根据孕妇不同孕期不同年龄阶段补充微量元素,以满足母亲和胎儿的需要。
- 曹清芸王兵徐旭
- 关键词：妊娠期年龄
- 毛细支气管炎患儿血清TNF-α、VEGF、CK-MB及血浆D-二聚体水平的变化及临床意义被引量：8
- 2019年
- 目的探究检测毛细支气管炎患儿血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、血浆D-二聚体水平变化与毛细支气管炎的关系及临床意义。方法 2015年10月至2016年10月于该院治疗的80例毛细支气管炎患儿及30例体检健康婴幼儿作为研究对象,80例毛细支气管炎患儿根据病情严重程度分为重症组(44例)与轻症组(36例),30例体检健康婴幼儿设为对照组。两组患儿均给予抗感染、化痰、平喘等常规治疗。分别于治疗前、治疗6d后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清TNF-α、VEGF,乳胶增强免疫比浊法检测血浆D-二聚体水平,全自动生化分析仪检测CK-MB水平。结果治疗前,轻症组和重症组患者血清TNF-α、VEGF、CK-MB、D-二聚体表达水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),Spearman等级相关性分析显示,血清TNF-α、VEGF、CK-MB、D-二聚体表达水平与毛细支气管炎密切相关,VEGF与毛细支气管炎的相关性最大(r=0.882,P=0.000),CK-MB、D-二聚体、TNF-α表达水平与毛细支气管炎的相关性分别为:r=0.844、0.798、0.678,P<0.001。治疗6d后,重症组和轻症组患儿血清TNF-α、VEGF、CK-MB、D-二聚体表达水平均显著低于治疗前(P<0.05)。其中重症组36例患儿病情缓解,各指标均显著低于治疗前(P<0.05),仅有8例患儿病情未缓解,上述各指标仍呈高表达状态,TNF-α、VEGF、CK-MB、D-二聚体表达水平均显著低于治疗前(P<0.05);轻症组所有患儿症状均得到缓解。治疗6d后,重症组TNF-α、VEGF、CK-MB、D-二聚体表达水平仍显著高于对照组(P<0.05)。结论患儿血清TNF-α、VEGF、CK-MB、血浆D-二聚体表达水平与毛细支气管炎的发生发展密切相关,病情严重时上述指标均呈高表达状态,病情缓解时上述指标表达水平下降,其水平的动态监测可用于毛细支气管炎病情严重程度及预后评价,具有一定的临床意义。
- 曹清芸王素宁
- 关键词：肌酸激酶同工酶毛细支气管炎
- 3151例九种呼吸道病原体IgM检测结果分析被引量：19
- 2015年
- 目的通过检测9种呼吸道病原体Ig M,了解本地呼吸道病原体的流行情况,为临床诊断和治疗提供帮助。方法应用间接免疫荧光法检测2012年8月至2013年7月我院门诊及住院共3 151例有呼吸系统感染症状的患者血清中的九种呼吸道病原体Ig M抗体：军团菌血清1型（LP1）,肺炎支原体（MP）,Q热立克次体（COX）,肺炎衣原体（CP）,腺病毒（ADV）,呼吸道合胞病毒（RSV）,甲型流感病毒（INFA）,乙型流感病毒（INFB）及副流感病毒（PIVs）,并对结果进行分析。结果 3 151份血清中共检出阳性1 229份,阳性率分别为MP 20.0%、INFB16.9%、INFA 4.0%、PIVs 2.7%、RSV 2.5%、ADV 1.0%、CP 0.8%、COX 0.6%和LP1 0.2%。全年中2～5月、10～12月、12～1月分别为MP、RSV和INFB的高发期,好发于6～15岁的儿童。MP和INFB在各年龄组的感染率明显高于其他病原体（P=0.000）。结论 INFB及MP在春冬季节流行,是导致呼吸道感染的主要病原体。
- 刘洁何美琳邵冬华曹清芸
- 关键词：呼吸道感染流行病学病毒肺炎支原体乙型流感病毒
- 尿路感染患者血清微量元素改变与炎症细胞因子、氧化应激指标的相关性被引量：9
- 2018年
- 目的:尿路感染(UTI)患者血清微量元素改变与炎症细胞因子、氧化应激指标的相关性。方法:选择在我院诊断为下尿路感染的患者作为UTI组、体检的健康志愿者作为对照组,采集血清并测定微量元素、炎症细胞因子的含量,采集尿液并测定氧化应激指标的含量。结果:UTI组血清中锌(Zn)的含量明显低于对照组(P<0.05),铜(Cu)、硒(Se)、钙(Ca)、镁(Mg)的含量与对照组比较无显著性差异(P>0.05);UTI组血清中C反应蛋白(CRP)、淀粉样蛋白A(SAA)、降钙素原(PCT)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子β1(TGF-β1)的含量以及尿液中丙二醛(MDA)、晚期蛋白氧化产物(AOPP)的含量均明显高于对照组且与血清中Zn的含量呈负相关(r=-0.514、-0.573、-0.475、-0.636、-0.612、-0.585、-0.492、-0.537、-0.611、-0.476、-0.542,P=0.015、0.011、0.024、0.007、0.009、0.010、0.020、0.014、0.009、0.024、0.013),尿液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)的含量均明显低于对照组且与血清中Zn的含量呈正相关(r=0.592、0.657、0.610,P=0.010、0.002、0.009)。结论:尿路感染患者血清微量元素Zn显著降低且与疾病的发生及病程中炎症反应、免疫应答、氧化应激反应的异常密切相关。
- 曹清芸贾振芳
- 关键词：尿路感染微量元素免疫应答氧化应激反应
- TaqMan探针结合COLD-PCR原理定量检测JAK2 V617F突变率研究被引量：3
- 2012年
- 目的建立在外周血基因组DNA中定量检测JAK2V617F突变率的方法。方法应用TaqMan/MGB探针技术,结合较低变性温度下复合扩增聚合酶链反应(COLD-PCR)基因扩增原理,采用Real-Time PCR分析系统,通过JAK2V617F突变率和其循环阈值(Ct值)的标准曲线,建立TaqMan-COLD-PCR测定方法,并对9例骨髓增殖性疾病(MPD)患者外周血基因组DNA中JAK2V617F突变率进行检测,探讨其应用价值。结果建立的TaqMan-COLD-PCR方法检测JAK2V617F突变率的检测下限为0.1%,100%-0.1%的JAK2V617F突变率与其测定的Ct值间呈明显的线性关系。对9例MPD患者外周血基因组DNA中JAK2V617F突变率检测显示,其中6例患者的JAK2V617F突变阳性,突变率范围为18.5%-50.9%,经测序确认全部符合。结论 TaqMan-COLD-PCR方法可高灵敏度、定量检测外周血中JAK2V617F突变率。该方法将明显提高MPD疾病的诊断灵敏度,并有助于疾病治疗过程中治疗效果的监测。
- 梁国威邵冬华曹清芸王树琴王新华徐雪松
- 关键词：JAK2V617F骨髓增殖性疾病
- 等位基因特异性引物和TaqMan-MGB探针双抑制野生等位基因扩增的实时荧光定量PCR检测JAK2V617F突变率被引量：2
- 2012年
- 本研究建立在外周血基因组DNA中定量检测JAK2V617F突变率的荧光定量PCR检测方法并探讨其临床应用价值。在实时荧光定量PCR分析系统中,应用等位基因突变引物和等位基因野生TaqMan-MGB探针共同抑制JAK2V617F野生等位基因扩增,从而特异性地扩增JAK2V617F突变等位基因。通过测定不同JAK2V617F突变率标准品及其循环阈值(Ct值),建立JAK2V617F突变率定量测定方法,并对89例表观健康人外周血基因组DNA中JAK2V617F突变率进行检测。结果表明,建立的方法定量检测JAK2V617F突变率的下限为0.1%,检测JAK2V617F突变率的批内、批间平均变异率分别为4.1%和6.1%。对89例表观健康人外周血基因组DNA中JAK2V617F突变率检测显示,其中2例为JAK2V617F阳性,突变率分别为0.64%和0.98%。结论:建立的JAK2V617F突变率定量检测方法具有检测灵敏度高和重复性好的特性,适合骨髓增殖性疾病的诊断及疾病进程和疗效监测。本方法检测原理可用于各种单碱基突变率的检测,具有广泛的应用前景。
- 梁国威邵冬华何美琳曹清芸
- 关键词：JAK2V617F突变骨髓增殖性疾病TAQMAN-MGB探针
